人胃癌高转移模型的建立实验

实验方法原理 用人胃癌组织块SGC-7901 原位移植于SCID小鼠，第4周末移植瘤向淋巴结和肝脏等器官转移， 转移率达66. 7% (2/3) ，第6 周末转移率高达100% (10/ 10) 。

实验材料 雄性SPF级SCID小鼠人胃癌组织SGC-7901

试剂、试剂盒 水合氯醛福尔马林液

仪器、耗材 饲养笼光学显微镜石蜡

实验步骤

一、实验材料准备

1.  雄性SPF 级SCID 小鼠，6～7 周龄， 体重20～25g 。

2.  裸小鼠皮下传代的人胃癌组织( SGC-7901，低分化腺癌) 。

二、胃癌高转移模型建立　

1.  SCID 小鼠25 只， 随机分为试验组( n= 15) 和正常对照组( n= 10) 。

2.  试验组动物原位移植人胃癌组织SGC-7901：用4. 3%水合氯醛将动物麻醉后，依次切开左上腹皮肤、腹壁和腹膜， 仔细暴露胃壁，在胃大弯中部用剪刀损伤胃浆膜层( 直径约3 mm)，用丝线将人胃癌组织块( 约5 mm×7 mm，重量为150 mg ) 缝在损伤处，然后将胃送入腹腔内， 用0 号缝线依次缝合腹壁和皮肤。

3.  术后观察动物麻醉情况，直至全部动物清醒后，送至饲养室。

4.  正常对照组不作处理。

5.  手术后第2、4、6 周末分别随机处死试验组动物2、3、2 只， 发现第6 周末2 只动物的癌肿均已转移，故余下8 只SCID 小鼠也于第6 周末处死。

6.  取胃局部生长的肿瘤组织、肿大淋巴结、脑， 及胸腔、腹腔内脏器， 以10% 福尔马林液固定，石蜡包埋，常规制片，HE 染色，光学显微镜下观察并记录肿瘤生长和转移情况。

其他

一、实验讨论

近年有文献报道用原位移植方法建立肿瘤转移模型。原位移植包括原位接种人类肿瘤细胞株，或原位移植人类肿瘤组织块至裸鼠相应器官两种方法。原位接种人癌细胞株可提高结肠癌、胰腺癌等少数肿瘤的转移率，但不能提高胃癌等人类肿瘤在裸鼠的转移率 。Furukawa 等用人胃癌组织块原位移植方法建立裸小鼠胃癌转移模型，发现此法建立的模型癌转移率高达100% ( 向淋巴结和肝、肺等脏器转移)； 但对照组用同样大小组织块制作细胞悬液再原位接种至胃壁，则癌转移率仅为6. 7%。此结果表明， 原位移植癌组织块至裸鼠相应的器官，可能由于保留了癌细胞之间的某些结构，移植癌能较好地反映人类肿瘤的浸润、转移特性。SCID 小鼠为重度联合免疫缺陷小鼠，免疫功能较裸小鼠更为低下，因此更适宜作转移模型。作者用人胃癌组织块SGC- 7901 原位移植SCID 小鼠建立转移模型，发现原位移植后2 周即见癌细胞向肌层和粘膜下层浸润性生长，4周见淋巴结、肝脏和脾脏等处转移灶，6 周时肿瘤转移率高达100% 。这与文献报道的人胃癌组织原位移植裸小鼠的结果一致，但后者需8～12 周才能达到较高的转移率。这表明， 在SCID 小鼠上采用癌组织块原位移植方法， 建立肿瘤转移模型所需时间短，可为肿瘤转移研究提供更为理想的动物模型。