克拉维酸钾的鉴别与含量测定

克拉维酸钾的产品CAS号为61177-45-5，它有微弱的抗菌活性，但可与多数的β-内酰胺酶牢固结合，生成不可逆的结合物、它具有强力而广谱的抑制β-内酰胺酶的作用，不仅对葡萄球菌的酶有作用，而且对多种革兰阴性菌所产生的酶也有作用，因此为一有效的β-内酰胺酶抑制药。下面来看看克拉维酸钾的鉴别与含量测定。

关于克拉维酸钾的鉴别有三条：

1、在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与克拉维酸对照品峰的保留时间一致。

2、本品的红外光吸收图谱应与克拉维酸对照品的图谱一致。

3、本品的水溶液显钾盐的鉴别反应。

克拉维酸钾的含量测定方法：

此方法的名称为克拉维酸钾原料药－克拉维酸－高效液相色谱法。本方法采用高效液相色谱法测定克拉维酸钾原料药中克拉维酸的含量。本方法适用于克拉维酸钾原料药。

方法原理： 供试品加水溶解并稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长220nm处检测克拉维酸钾的峰面积，计算出其含量。

试剂： 

1、乙腈

2、磷酸盐缓冲液

3、稀磷酸

4、氢氧化钠溶液（10mmol/L）

仪器设备：高效液相色谱仪，色谱柱，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，紫外吸收检测器。

色谱条件：

1、流动相：磷酸盐缓冲液 乙腈=95 5

2、检测波长：220nm

3、柱温：室温

4、流速：1.0mL/min

试样制备：

1、磷酸盐缓冲液

称取磷酸二氢钠7.8g，加水900mL溶解，用稀磷酸或10mmol/L氢氧化钠溶液调节pH值至4.4，用水稀释至1000mL。

2、对照品溶液的制备

精密称取克拉维酸对照品适量（约相当于克拉维酸25mg），置100mL量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。

3、供试品溶液的制备

精密称取供试品25mg，置100mL量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长220nm处测定克拉维酸（C8H9NO5）的峰面积，计算出其含量。

原创作者：上海elisa生物技术有限公司