发布时间:2019-07-07 13:15 原文链接: 免疫荧光技术简介

一些基本概念和基本知识:

1 荧光免疫测定技术的概念:将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记,试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的荧光素,这种免疫技术,称为免疫荧光素技术。
2.技术分类:
  ⑴荧光抗体技术(荧光显微镜技术)
      抗原抗体反应后,利用荧光显微镜判
      定结果的检测方法。

  ⑵ 免疫荧光测定技术:
      抗原抗体反应后,利用特殊仪器测定
    荧光强度而推算被测物浓度的检测方法
3.荧光的产生:
          物质吸收外界能量而进入激发状态,在回复基态时多余的能量以电磁辐射的形式释放,即发光,这种光称为荧光。 
          这种物质,称为荧光素           
      由光激发所引起的荧光,为光致荧光
                            ------荧光免疫技术       
      由化学反应所引起的荧光,为化学荧光
                            ------化学发光技术
4.荧光素的荧光特性:

⑴ 停止供能,荧光现象随即终止
⑵ 对光的吸收和荧光的发射具高度选择性
      入射光波长<发射光波长
⑶ 荧光效率:           发射荧光的光量子数
          荧光效率=-------------------------------
                            吸收光的光量子数
  ⑷ 荧光猝灭现象:荧光素的辐射能力减弱
5.常见荧光素:
  
  ⑴ FITC
  ⑵ RB200
  ⑶ TRITC
  ⑷ 镧系:Eu、Tb
  ⑸ PE
  ⑹ 其它
常见荧光素的特性:
  ⑴ FITC:黄色结晶粉末,吸收光:490~495nm,
          发射光:520~530nm,明亮的黄绿色荧光。
  ⑵ RB200: 橘红色粉末, 吸收光570nm,发射光
                  595~600nm,橘红色荧光。
  ⑶ TRITC: 紫红色粉末,吸收550nm,发射光                 
                  620nm,橙红色荧光。