免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段,由于其可以利用同位素、酶、化学发光物质等对检测信号进行放大和显示,因此常被用于检测蛋白质、激素等微量物质。化学发光免疫分析方法是在放射免疫分析(Radioimmunoassay, RIA)和酶联免疫分析(enzymeimm unoassay,EIA)两种方法基础上改进的一种新方法,无放射性和致畸物质,兼具有以上两种方法的优点,且产品有效期长、对环境无污染、对人体无毒无害,是目前体外诊断试剂检测方法中的佼佼者,在技术上具有明显的优势。
化学发光免疫分析法的优点:
1、灵敏度高
灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性,其灵敏度可达 10-22 mol/L ( RIA 为 10 -12 mol/L )。化学发光免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法无法检出的物质,对疾病的早期诊断具有十分重要的意义。
几种标记免疫技术灵敏度的比较:
2、宽的线性动力学范围
发光强度在 4 ~ 6 个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度( OD 值)为 2.0 的范围相比,优势明显。虽然RIA 也有较宽的线性动力学范围,但放射性限制了其应用。
几种标记免疫技术线性范围的比较:
3、光信号持续时间长
辉光型的 CLIA 产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。
4、分析方法简便快速
绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂(或复合试剂)的一步模式。
5、结果稳定、误差小
样品系直接自己发光,不需要任何光源照射,免除了各种可能因素(光源稳定性、光散射、光波选择器等)给分析带来的影响,使分析结果灵敏稳定可靠。
6、安全性好及使用期长
免除了使用放射性物质。到目前为止,还未发现其危害性;试剂稳定,保存期可达六个月至一年以上。
化学发光免疫分析法试剂盒与同类免疫分析产品的异同:
方法
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优 点
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缺 点
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放射免疫
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试剂成本低,灵敏度较高
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操作复杂,放射性污染,有效期短
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酶联免疫
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试剂成本低,操作简单
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灵敏度低,适用于定性和半定量测定
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化学发光
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操作简单,成本较低,灵敏度较高,试剂较稳定
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工作曲线随时间漂移
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