1. 上面的步骤是传统方法。有许多地方可以进行改动:如消化时可以直接用0.125-0.25%的胰酶消 化15-20 min 左右,也可用 DNA 酶进行消化,有人还直接进行吹打,都可行。 2. 上面虽然时大鼠皮层神经元,但是同样适用于小鼠,但是应该选择孕13 d 左右的小鼠。 3. 神经元是一种比较难培养的细胞,因此在接种时细胞的密度一定要够。 4. 在玻片上培养神经元时,一定要注意玻片的来源和处理方法,这个非常重要,对神经细胞的影响 是很大的。如果您现在在玻片上培养的神经元生长情况还不错的话,那么您在以后的培养中最好还是用同 一来源(厂家)的玻片。 5. 如果有B27 和neurobasal 培养基,那么就方便了(不用加 AraC): (1)把细胞悬液用(DMEM+20%FBS)悬浮,种到培养皿上6-12 h 后,全量换成 2% B27 的 neurobasal 培养基,继续培养,3 d 半量换液。 (2)把细胞悬液用直接用 2% B27 的 neurobasal 培养基悬浮接种。 (3)可以用新生1 d 内的胎鼠皮层直接培养。 展 |