如何使用KeyPro污染净化仪防止RNA的降解和保证PCR的结果准确性
在此次的新型冠状病毒疫情中，核酸检测作为确诊的金标准发挥着重要的作用。众所周知，本次新冠病毒的核酸检测流程为采样（咽拭子、肺泡灌洗液），提取病毒RNA，再经过RT-qPCR或者一步法RT-数字PCR检测样本。但近期关于核酸检测准确性的讨论也甚嚣尘上，其中PCR实验污染是导致实验有偏差的原因之一， 造成PCR实验污染的主要原因有以下几点，样本间交叉污染（样本泄漏引起的交叉，样本提取过程中移液器、耗材的污染），PCR试剂的污染（容器、耗材、移液器，水等被污染），PCR扩增产物污染，气溶胶污染，克隆质粒污染等。
在病毒核酸检测过程中，结果的准确性除了检测方式的灵敏度很重要以外，保证提取RNA样本的完整性也十分重要。今天我们就聊聊如何防止RNA降解，获得高质量的RNA进行后续试验。导致RNA降解最主要的物质就是RNase，RNase非常稳定，且无处不在，用常规的高温高压蒸汽方法和蛋白酶抑制剂不能使所有的RNase完全失活。
RNase结构
除上述方法外，研究人员最常用的就是使用DEPC等对实验过程中使用的耗材和试剂进行处理，但DEPC处理时间长且有毒，下面给出远离DEPC的三大理由：
1、DEPC 对人体有害，DEPC为高活性烷化试剂，能对蛋白质进行共价稀释，使其组氨基团的乙氧基甲酸化（RNase 活性位点有两个组氨基酸，故能被灭活）；同时能使 RNA 分子中没配对的腺嘌呤羟甲基化，改变其活性，严重时会影响 RNA 形成杂交双链的能力，归为强致癌物，使用时要十分小心。
2、不能处理一些试剂：例如：一级胺的试剂TRIS，PBS等，会发生化学反应；二是不能高压灭菌的试剂，DTT，dNTP，Mgcl2，因为 DEPC必须通过高压灭菌去除；三是不能用于PH低于4及以下的试剂，DEPC在此条件下对RNase没有灭活作用。
3、DEPC不适合某些实验，测OD值的实验，OD读数跟 PH 有关， DEPC 在溶液中分解后变成乙醇和二氧化碳，部分二氧化碳与水反应形成碳酸，导致 PH 降低，进而降低OD值。
实验者迫切需要一种非常快速且方便的去除RNase的方法，保证结果的准确性。使用 KeyPro™KP100生物污染紫外净化仪，通过275nm和365nm双紫外的协同作用可在5min解除上述污染烦恼。免清洗，无化学残留，方便快捷，适用于高保真 RNA 文库制备，测序和 PCR 实验室中的微孔板去污、移液器、水、金属、陶瓷、塑料、玻璃等表面RNase的灭活等。同时KeyPro™KP100还可以去除病毒和细菌等的污染，防止实验用品导致的实验结果和环境污染。
KeyPro™KP100 生物污染紫外净化仪采用 SLM™ZL技术将 LED 阵列，光学元件和热冷却技术集于一身，可最大限度地提高消毒和去污性能，为您节省宝贵的科研时间。
仪器优势:
1. 5min 完全灭活污染物
2. 触屏操作，简单易用
3. 快速，通量高
4. 稳定，一致的效果
5. 降低实验室耗材成本
6. 工作流程集成化