色谱柱键合基质分为硅胶基质、聚合物基质等,其中硅胶基质应用较为广泛,其特点主要包括以下3方面:
(1)低pH值,硅胶键合键容易水解(pH<2);高pH值,硅胶容易溶解(pH>8)。
(2)在接近中性的条件时,硅醇基裸露,显酸性,不适宜分离碱性化合物。
(3)某些硅胶被一定金属污染,这些金属会引起峰的不对称或拖尾,甚至化合物的死吸附。
如何保证硅胶基质色谱柱的性能与柱寿呢?
1、认证阅读色谱柱使用说明书;
2、使用填充良好的色谱柱;
3、尽量减少压力波动,避免机械及热冲击;
4、使用保护柱及在线过滤器;
5、经常以强溶剂冲洗色谱柱;
6、充分过滤样品及流动相,尽量避免杂质微粒与强保留成分;
7、用稳定的固定相(C18*稳定);
8、在中等PH值操作(6~8),用有机缓冲溶液;
9、色谱柱使用温度小于40℃;
10、应保持流动相的PH值范围在3.0~8.0;
11、在水流动相与缓冲溶液中加200ppm的叠氮钠;
12、流动相中含有缓冲溶液,应注意应95∶5的水及有机溶剂过渡,有机溶剂不能低于5%;
13、过夜或贮存时,冲洗掉盐和缓冲液,用纯有机溶剂流动相保存。
色谱柱是高效液相色谱仪最主要的部件,被测物质能否被很好的分离和测定,色谱柱的性能起着决定性的作用。因此,在日常工作中,应特别注意色谱柱的正确使用和维修保养,以延长色谱柱的使用寿命。 01色谱......
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