巨噬细胞的活化经历两个阶段：致敏阶段和激活阶段。活化巨噬细胞的方案多采用一 步 法 （致敏并且激活），本方案则明确区分巨噬细胞活化的这两个阶段。经过一段时间 诱 导 后 （48〜72h) ，可 检 测 巨 噬 细 胞 对 病 原 体 （如寄生虫或细菌；单 元 6. 5 和 6. 6)的杀伤作用或所合成的活性氮介质（reactive nitrogen intermediates， R N I ; 单 元 6. 5)。
| 实验步骤 | 基本方案 小鼠巨噬细胞的活化材料小鼠巨噬细胞，静 息 状 态（单 元 6.1) D M E M - 10 : 含 1 0 % (V /V ) FBS (HyCloxie) 和 50 ug/1111 硫酸庆大霉素的 D M E M 培 养 基（G I B C O /B R L ) 辅助方案炎性小鼠巨噬细胞的活化附加材料炎性巨噬细胞：促炎剂刺激后的小鼠腹腔巨嗟细胞（单 元 6.1) 2 4 孔 平 底 细胞培养板（Costar) 1 . 设置实验组和对照组（见基本方案步骤 1)，在 2 4 孔板中每孔加入 0.5m l 细胞悬液。 2 . 置 37°C ， 5 % C 〇 2 细胞培养箱中培养 I h 使巨噬细胞贴壁。 3 . 弃上清后，沿孔壁缓慢加入 Iml D E M E M - I O 培养基，避免破坏贴壁细胞层。重复洗涤 2 次 ，最后加入 0.5 ml D E M E M - I O 培养基。 4 . 致敏及激活巨噬细胞，参见基本方案步骤 2 和 4 。 展开 |
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