凝胶浓度与蛋白质分离范围
凝胶浓度％ （W/V） | 最适分离范围（KD） |
7.5 | 70-200 |
10.0 | 50-150 |
12.0 | 30-100 |
15.0 | 12-45 |
20.0 | 4-30 |
不同浓度分离胶的制备（两块胶）
组分 | 7.5％ | 10％ | 12％ | 15％ | 20％ |
Tris-HCL缓冲液* | 3.75ml | 3.75 ml | 3.75 ml | 3.75 ml | 3.75 ml |
蒸馏水 | 7.28 ml | 6.03 ml | 4.95 ml | 3.45 ml | 1.0ml |
丙烯酰胺溶液，30﹪** | 3.75 ml | 5.0 ml | 6.0 ml | 7.5ml | 10.0ml |
SDS，10﹪ | 150.0μl | 150.0μl | 150.0μl | 150.0μl | 150.0μl |
过硫酸胺，10﹪ | 150.0μl | 150.0μl | 150.0μl | 150.0μl | 150.0μl |
TEMED | 15.0μl | 15.0μl | 15.0μl | 15.0μl | 15.0μl |
* 1.5mol/L Tris-HCL，pH8.8。
**29.2g丙烯酰胺，0.8g甲撑双丙烯酰胺/100ml水。
4﹪浓缩胶的制备（两块胶）
组分 | 体积 |
Tris-HCL缓冲液* | 1.25 ml |
蒸馏水 | 3.05 ml |
丙烯酰胺溶液，40﹪ | 0.67ml |
SDS，10﹪ | 50μl |
过硫酸胺，10﹪ | 50.0μl |
TEMED | 10.0μl |
* 0.5mol/L Tris-HCL，pH6.8。
一 试剂