在微生物检测中常会遇到以下问题,
小编为您支招,
让您轻松解决这些问题!
Q
为什么划不出单个菌落?
A
(1)平板上有过多的水分;
(2)划线时接种环未经反复灼烧。
(3)多区划线,三区或四区划线,越是稀释到4区,间距要越宽。
Q
培养基配制时应注意哪些问题?
A
(1)灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量。
(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。
(3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏。
(4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。
(5)分装培养基前要使培养基完全溶解。
Q
培养基如何保存?
A
(1)平板:大多数平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。
(2)干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。
(3)亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,避免水浴加热。
(4)抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。
(5)兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。
Q
观察时间的掌握
A
按SN、GB等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察,时间过短或时间过长,单菌落的特征都不会很明显。
如单增李斯特氏菌显色培养基,时间短单菌落看不到卵磷脂环,时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此,时间过长,李氏菌使整个平板成黑色,不利于观察单个菌落。霉菌要3天后要及时观察计数,防止时间长成一片。
Q
添加剂的添加要注意哪些?
A
(1)温度的掌握:卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。
(2)定量:过多会抑制一些目标菌,太少又导致杂菌的过度生长。
Q
培养温度的掌握
A
(1)真菌类:25-28℃培养;
(2)细菌类:李氏菌在增菌和生化中要求培养温度在30℃左右;
(3)其他一般在36℃左右。
Q
常用的接种方法有哪些?
A
穿刺接种、倾注接种、涂布接种、划线接种。