支原体培养实验

实验材料 肺炎支原体

试剂、试剂盒 糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊 青霉素

仪器、耗材 培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子

实验步骤

一、标本采集
 
支原体常侵及人和动物的粘膜表面，一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中，或取其分泌液，若标本是组织块，可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种，取样后应尽快接种培养。
 
二、分离培养
 
转动拭子将标本液体尽量挤出，用无菌滴管吸1~2滴接种在平皿上盖好，用L棒涂抹或倾斜转动平皿使标本均匀分布，置37℃孵育。
 
三、结果观察
 
绝大多数支原体为兼性厌氧，少数在含10% CO2和相对湿度80~90%的大气环境中生长良好。支原体生长缓慢，多数于3~4 d长出菌落，少数于1~2 w方长出典型菌落，在平皿固体培养基上生长的菌落呈"油煎蛋"状，边缘不整齐。

其他

一、附录

糖酵解培养基（肺炎支原体培养基）
基础培养基 70 ml
马（或牛血清） 20 ml
25%酵母浸液 10 ml
0.4%酚红 0.5 ml
1%醋酸铊 2.5 ml
青霉素10000 IU/ml 5.0 ml
调pH 7.8