1. 提取 方法1 (均质提取)称取试样约20 g(精确0.1 g)至于250 mL具塞锥形瓶中,加入20 mL水,混摇后放置1 h。然后加入100 mL丙酮,高速均质提取3 min。将提取液抽滤于250 mL梨形瓶中。残渣再用50 mL丙酮重复提取一次,合并滤液,于40 ℃水浴中旋转浓缩至约20 mL,待净化。 方法2 (ASE快速溶剂提取)称取试样约20 g (精确至0.1 g)于样品池中, 密闭,按规定的条件[ASE提取条件提取溶剂:二氯甲烷;压力:1500 psi (l psi= 6894.76 Pa);温度:50 ℃ ;提取体积:60 mL;静态时间:5 min]进行提取、净化。 2. 液-液分配净化 将浓缩提取液转移至250 mL分液漏斗中,加入150 mL氯化钠水溶液和50 mL二氯甲烷(ASE提取无需加二氯甲烷),振摇3 min,静置分层,收集二氯甲烷相。水相再用2×50 mL二氯甲烷重复提取两次,合并二氯甲烷相。经无水硫酸钠柱脱水,收集于250 mL梨形瓶中,于40C水浴中旋转浓缩至近干,加入5 mL环己烷-乙酸乙酯(1 + 1)以溶解残渣,并用0.45 um滤膜过滤。将5 mL待净化液用GPC净化。 3. 凝胶色谱净化 合并馏分收集器中的收集液于500 mL梨形瓶中,于40 ℃水浴中旋转浓缩至近干,加入2 mL正己烷以溶解残渣,待SEP净化。 凝胶色谱(GPC)条件净化柱:700 mm×25 mm, Bio BeadsS-X3, 或相当者;流动相:环己烷-乙酸乙酯(1 + 1);流速:5.0 mL/min;样品定量环:5.0 mL;预淋洗体积:50 mL;洗脱体积:200 mL;收集体积:90〜190 mL。 4. 固相萃取净化 用6 mL正己烷预淋洗活性炭固相萃取柱,将样液倾入活性炭固相萃取柱中,用2 mL正己烷洗涤,然后用20 mL正己烷-乙酸乙酯(2 + 3) 进行洗脱。收集全部洗脱液于50 mL梨形瓶中,于40 ℃水浴中旋转浓缩至干,用正己烷溶解并定容至2.0 mL,供气相色谱-质谱测定和确证。 5. 测定 电离方式:EI;电离能量:70 eV;测定方式:选择离子监测方式; 溶剂延迟:5 mD; 展开 |