气质联用技术检测对甲苯磺酸酯类杂质

　　对甲苯磺酸烷基酯，如对甲苯磺酸甲酯和对甲苯磺酸乙酯，是对甲苯磺酸与甲醇，乙醇，或其它低级醇形成的酯。对甲苯磺酸烷基酯会被视为潜在基因毒性杂质，这些物质可与DNA发生烷基化反应，从而可能成为引发癌症的诱因。由于拉帕替尼在生产过程中使用了对甲苯磺酸、甲醇、乙醇和异丙醇，反应过程中易生成对甲苯磺酸甲酯，对甲苯磺酸乙酯，对甲苯磺酸异丙酯。本试验采用气相色谱质谱联用技术检测检测这三种杂质。 
　　1 仪器 
　　Agilent6890-5973GC/MS气质联用仪。 
　　2 对照品 
　　对甲苯磺酸甲酯（分析纯），对甲苯磺酸乙酯（分析纯），对甲苯磺酸异丙酯（分析纯），对甲苯磺酸丁酯（分析纯）。 
　　3 色谱条件 
　　色谱柱：以6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱（长：30m，内径：0.32mm，膜厚：1μm）。 
　　载气：氦气。 
　　流速：2.0mL/min。 
　　进样口温度：220℃。 
　　顶空条件：平衡温度60℃；平衡时间30min。 
　　柱程序升温：初始柱温40℃，保持3分钟，以每分钟5℃的速度升到220℃，保持5分钟。 
　　质谱检测参数：电子轰击（EI）离子源，电离能量70eV，离子源温度230℃，SIM扫描模式，分别选择质荷比（m/z）为142、156、170、184的离子进行检测。 
　　4 溶液配制 
　　稀释剂：水―乙腈（50∶50）。 
　　溶液A：称取120g碘化钠，60mg无水硫代硫酸钠溶于少量水中，再用水定容至100mL量瓶中。 
　　内标液：精密量取100μL对甲苯磺酸正丁酯用稀释剂稀释至100mL，摇匀，精密量取该液20μL用稀释剂稀释至100.0mL，摇匀即得。 
　　供试品溶液：取本品适量（约相当于拉帕替尼25mg），精密称定，置于20mL顶空瓶，加入0.50mL溶液A和0.50mL内标液，密封，摇匀。 
　　对照品溶液（a）：分别精密称取400mg的对甲苯磺酸甲酯、1250.0mg的对甲苯磺酸乙酯和18.0mg的对甲苯磺酸异丙酯，用甲苯稀释至10.0mL。精密量取50μL该液用内标液稀释定容至25.0mL。 
　　对照品溶液（b）：精密量取100μL对照品溶液（a）用内标液稀释至100mL，取1.0mL该液和1.0mL溶液A于20mL顶空瓶中，密封，摇匀。 
　　对照品溶液（c）：精密量取500μl对照品溶液（a）用内标液稀释至20.0mL，取1.0mL该液和1.0mL溶液A于20mL顶空瓶中，密封，摇匀。 
　　5 方法验证 
　　（1）系统适用性考察 
　　①灵敏度试验。取对照品溶液（b）进样，记录色谱图。结果各目标峰的信噪比均远大于10。 
　　②进样重复性试验。取对照品溶液（c）5份，分别进样检测，各溶剂峰面积与内标物峰面积比值的RSD均小于5.0%，各溶剂峰保留时间均小于1.0%。 
　　（2）专属性 
　　分别对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯、对甲苯磺酸异丙酯和对甲苯磺酸正丁酯适量，制得对照品溶液，分别进样。专属性考察结果表明，各目标峰之间分离度良好，无其他分子量相同的杂质干扰测定，该方法专属性强。 
　　（3）定量限 
　　试验数据显示：对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯和对甲苯磺酸异丙酯定量限浓度均为0.001μg/mL；即样品检测浓度为25mg/mL时，样品中含有0.004ppm的对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯和对甲苯磺酸异丙酯均能被定量检出。 
　　（4）线性范围 
　　对甲苯磺酸甲酯在0.040μg/mL～2.203μg/mL浓度范围内线性方程：y=9.958x+0.591，相关系数：r=0.9989；对甲苯磺酸乙酯在0.125μg/mL～6.877μg/mL浓度范围内线性方程：y=9.187x+1.297，相关系数：r=0.9992；对甲苯磺酸异丙酯在0.002μg/mL～0.109μg/mL浓度范围内线性方程：y=6.254x+0.010，相关系数：r=0.9995。 
　　（5）精密度考察 
　　①重复性考察。分别配制供试品溶液6份，依法检测。对甲苯磺酸甲酯平均含量为0.15ppm，RSD为1.8%，对甲苯磺酸乙酯平均含量为3.42ppm，RSD为2.3%，对甲苯磺酸异丙酯平均含量为0.06ppm，RSD为4.6%。 
　　②中间精密度考察。在同一实验室，由不同操作者，于不同日期进行检测。对甲苯磺酸甲酯平均含量为0.13ppm，RSD为1.4%，对甲苯磺酸乙酯3.53ppm，RSD为3.1%，对甲苯磺酸异丙酯0.05ppm，RSD为3.4%。 
　　（6）回收率 
　　分别配制相当于进样浓度80%、100%、120%的加标供试品溶液，每个浓度配制3份。分别进样检测，计算回收率。对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯、对甲苯磺酸异丙酯的回收率分别为99.6%、98.2%、103.8%。 
　　（7）样品检测 
　　取样品，依法测定。