沙门氏菌显色培养基的快速检测与分离应用

　　沙门氏菌属是一大群寄生于人类和动物肠道内，生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌，有的专对人类致病，有的只对动物致病，也有对人和动物都致病，这些统称为沙门氏菌。

　　沙门氏菌目前已经发现1800种以上，按抗原成分可分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌型。其中与人类疾病有关的主要有甲组的副伤寒甲杆菌，乙组的副伤寒乙杆菌和鼠伤寒杆菌，丙组的副伤寒丙杆菌和猪霍乱杆菌，丁组的伤寒和肠炎杆菌。

　　此菌可引起禽伤寒、鸡白痢、猪霍乱、鼠伤寒沙门氏菌病、猪副伤寒、马流产沙门氏菌病等疾病。致病性最强的是猪霍乱沙门氏菌，其次是鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌。

　　感染沙门氏菌或食用被带菌者粪便污染的食品，可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。

　　原理：

　　蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;抑菌剂抑制革兰氏阳性菌，增强培养基的抑制杂菌的能力;混合色素分别与沙门氏菌和大肠菌群所对应的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上沙门氏菌产生品红色的菌落，大肠菌群产生蓝绿色的菌落。

　　培养基配方(每升)：

　　蛋白胨19.6g

　　酵母膏粉3g

　　氯化钠5g

　　抑菌剂1.5g

　　琼脂12g

　　混合色素6.4g

　　最终pH 7.0±0.2

　　使用方法：

　　1、称取本培养基47.5g，用1000ml蒸馏水或纯水溶解，混合均匀加热至100℃，并按常规不断搅拌直至完全溶解(不能持续高温加热，建议不要重复煮溶)，不需高压灭菌，冷至50℃，倾注灭菌平皿。

　　2、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液与增菌液。

　　3、建议使用二步增菌法：

　　(1)前增菌：将处理过的样品25g置于225mL缓冲蛋白胨水中，混合均匀后37℃培养6～8h;

　　(2)选择性增菌：取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)中，混合均匀后37℃培养18～24h;

　　4、用接种环取增菌液一环，划线接种于沙门氏菌显色平板上，置于36±1℃培养18-24小时。

　　5、观察结果。挑取显色平板上呈品红色，扁平透明，边缘光滑，直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。

　　6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验，对疑似沙门氏菌菌落进行生化鉴定。

　　质量控制：

　　本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后于36±1℃培养18—24h生长情况如下表。

菌 名　　　　　　　　菌 号　　　　生长状况　　 培养特征

　　鼠伤寒沙门氏菌　　CMCC50115 　　　良好　　　　菌落品红色

　　大肠埃希氏菌　　　ATCC25922　　　良好　　　　菌落蓝绿色

　　奇异变形杆菌　　CMCC(B)49005　　　良好　　　　菌落无色

　　粪肠球菌　　　　　ATCC29212　　　受抑制　　　　----

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。

　　规 格：可配置1L的培养基干粉。