液相色谱仪的日常维护和保养

     一套HPLC系统大致分为以下几个部分：流动相前处理部分、输液部分、进样部分、分离部分、检测部分。下面将分两期介绍各部分的使用方法和注意事项。*期先介绍流动相前处理部分和输液部分。

一、流动相前处理

       流动相前处理主要包括过滤和脱气，使用设备主要为溶剂过滤器、真空泵和超声波。

      1、过滤。HPLC所用流动相必须预先过滤和脱气，过滤的作用是防止颗粒性的杂质堵塞系统，或影响单向阀的正常工作。过滤时需要注意滤膜的选择，油膜和水系膜必须分开使用。水膜易有机溶剂溶解而进入系统导致泵流路和色谱柱头的堵塞。

      2、超声。超声的作用是去除流动相中的气泡。超声时间一般在20min即可。超声后，液体温度会升高，应冷却到室温再使用。超声后的流动相若需隔天使用再次超声。

二、输液系统

        输液系统即是指高压恒流泵，其作用是能提供稳定准确的流速。泵的维护主要分为以下三个部分。

       1、溶剂过滤头。吸液过滤头，或称沉子，主要作用是过滤流动相中可能存在的颗粒性杂质。长时间使用后，杂质有可能阻塞溶剂过滤头上的过滤板孔隙；或长时间使用缓冲液，过滤头表面容易产生一层膜，阻碍流动相正常通过。严重时，即使是已超声过的溶剂，泵吸液时也会有气泡在四氟输液管里产生，因此应经常对过滤头进行清洗。清洗溶剂可以选择乙醇或者30%稀硝酸溶液，正相系统需注意滤头的烘干处理。

       2、单向阀。单向阀的作用是确保液体向一个方向流动，是高压恒流泵稳定输液的保证。日常使用过程中，可以通过观察压力的情况，初步判断流量是否正常。如果系统已经平衡一段时间，压力应该是稳定的。但如果压力存在波动，则表明流量不稳定；如果无压力，则表明无流量。这两种情况大多是因为单向阀里混入了气泡或杂质。混入气泡的情况，应把放空阀打开，按冲洗键将里面的气泡排出。单向阀混入杂质的情况，须对其进行清洗。清洗溶剂可以选择乙醇，安装时注意标记环的方向。

                                                           单向阀装配图及剖面图

                       1 带标记环阀外套；2 陶瓷座；3 宝石球；4 带密封垫限位套；5 密封垫

       3、密封圈。密封圈是固定在柱塞杆上防止泵腔内的液体泄漏，是保证泵头输液正常的关键部件。但柱塞杆和柱塞密封圈长期使用会发生磨损，主要与流量、操作压力和所使用的流动相有关。当使用含盐的流动相时，由于脱水或蒸发，可能形成盐结晶，而泵运动时盐结晶会导致密封圈和柱塞杆的磨损。因此，每天实验前和实验后都需用纯水冲洗一次密封圈（在柱塞密封圈和二级密封圈之间），保持清洗管内有水以防止形成晶体，延长柱塞杆和密封圈的使用寿命。

       等度系统                       梯度系统

                          柱塞杆清洗连接示意图

       4、在线过滤器。为了防止由于流动相杂质微粒进入色谱系统，泵在放空阀内安装了在线过滤器，经泵出口流出的液体通过在线过滤器，经排空管流出的液体不通过在线过滤器。仪器使用一定时间后，建议用户清洗在线过滤器的烧结不锈钢过滤片。用扳手卸下压帽，将密封环和烧结不锈钢过滤片一同取出清洗，清洗后按原位装上。清洗溶剂可以选择30%稀硝酸溶液，正相系统需注意滤头的烘干处理。

             在线过滤装置示意图