液相色谱压力偏高之故障排查

　　压力是液相色谱系统中非常重要的技术指标，我们在使用液相色谱的过程中，经常会遇到系统压力偏高，甚至出现超过系统最大耐压而报错的现象。出现这种现象通常的问题就是“堵”了，堵的位置可能是在线过滤器、保护住或色谱柱、进样器或检测器的流通池。如果堵了，需要先确定是保护柱或色谱柱堵了还是系统堵了，可以按照流动相的流路依次分段排查。

　　排查色谱柱

　　 首先排查是否是色谱柱或保护柱堵了，可以将保护柱卸下，如果压力正常，说明是保护柱堵了，需要更换保护柱或保护柱柱芯。将色谱柱的出口断开，如果压力依然很高，再将色谱柱卸下，如果压力很小，说明是色谱柱堵了，需要对色谱柱进行冲洗或更换。

　　 如果经过排查不是色谱柱或保护柱的原因，则很有可能是系统堵了，需要按照流动相的流路依次排查。

　　排查在线过滤器

　　 在排查保护柱的时候， 将保护柱卸下，并断开流路，如果压力偏高，则很有可能是在线过滤器堵了。或者，在流动相灌注的时候，系统压力偏高，则很有可能是在线过滤器堵了，需要对在线过滤器进行清洗。

　　排查进样部位

　　 对于华谱S3000液相色谱仪，采用的是针在线直接进样方式，如果在平衡色谱柱的时候系统压力正常，进样后系统压力偏高，则很有可能是进样针或针座堵了，需要对进样部位进行清洗和维护。

　　排查流通池

　　 将检测器入口接头断开，如果压力恢复正常，说明很有可能是流通池堵了，需要对流通池进行清洗维护。

　　【引起“堵”的因素——样品】

　　 引起液相色谱堵的原因大多是样品、流动相或缓冲盐使用不当引起的。经过前处理的样品一定要经过微孔滤膜过滤后再进行色谱进样，而且在选择微孔滤膜的时候一定要根据样品溶剂选择有机系、水系或者其他类型的滤膜。

　　【引起“堵”的因素——纯水】

　　 液相使用的纯水最好是“现用现配“，新制备的纯水在实验室放置几天就会长菌，虽然这些细菌用肉眼观察不到，但却很容易进入系统及色谱柱的孔隙，造成堵塞。

　　【引起“堵”的因素——有机溶剂】

　　 使用的甲醇、乙腈及其他有机溶剂最好是购买色谱纯的，虽然市售有很多国产的色谱纯试剂，但质量也是参差不齐，所以在购买前要进行合理的评估。如果有机相需要和水进行混合，则在混合后要进行过滤。虽然纯有机溶剂不容易滋生细菌，但是装入流动相瓶的纯有机溶剂不建议放置时间太长，超过三个月需要进行更换。

　　【引起“堵”的因素——缓冲盐】

　　 配制好的缓冲盐溶液一定要先用0.22μm的微孔滤膜进行过滤。使用完缓冲盐溶液时，及时用纯水将管路中缓冲盐置换出去，再以高比例的水相冲洗色谱柱。由于缓冲盐是用纯水配制的，所以放置时间长很容易滋生细菌，所以缓冲盐溶液一般不建议一次配制后长时间使用。有些实验员为了节约时间，一次配制很多缓冲盐溶液，过滤后放置于冰箱中随用随取，这样低温下很容易有缓冲盐析出，从而堵塞色谱系统。

　　绝大多数的色谱故障是人为因素引起的，所以在使用液相色谱的时候一定要养成良好的使用习惯，做好平常的维护保养，可以有效降低仪器故障率，延长仪器的使用寿命。