1.在本病流行地区，夏秋季节，于1～3周内有疫水接触史或病畜接触史。
2.临床上出现寒热、酸痛、全身乏力、眼红、腿痛、淋巴结肿大等三症状、三体征。
3.出现神经系统损害的临床表现；或在患过钩体病后半月到9个月出现脑血管病样表现和周围神经损害的表现。
4.结合血清学检查，即可做出诊断。
但对本病的确诊，应有病原学的依据。患者的血、脑脊液和尿培养可发现病原体，但难以达到早期诊断的目的。血清免疫学检查，不论在急性期或免疫期，均有助于确诊，尤其对于没有急性期表现的脑动脉炎患者有意义。
凝集溶解试验（MAT）效价达到或超过1∶400为阳性；病后l周出现，15—20天达高峰，可持续多年。也可用补体结合试验、间接凝集试验测定钩端螺旋体特异性抗体，有助早期诊断。近年用钩体抗体致敏乳胶进行反向乳凝试验，于病初3天内可查出钩体抗原，3～5min出结果，简便、快速、敏感，有早期诊断价值。
纤维素膜渍片法（DSA）是新近发展的一种方法，用钩体广谱反应原浸渍纤维素片制成试纸样检测条，以检测钩体特异性IgM抗体（张志安等，2000）。研究证实，DSA对于钩体病的诊断和快速筛查具有实用价值。
