色谱柱的操作压力,一般情况下离子排斥色谱柱的操作压力不是很高,因此要注意色谱柱的zui大压力和zui大流速,以免造成色谱柱不可逆损失。
对于新的色谱柱或者色谱柱长期不用,用淋洗液冲洗20min,清除色谱固定相中的聚合物,以保护抑制器不被损坏。按测试色谱条件测试离子排斥色谱柱的分离度和重现性。
色谱柱的清洗溶液如下:
1 铁离子污染会降低色谱峰高,可用2~5mmol/l的柠檬酸清洗,如果仍有污染,可以用其他络合物酸如草酸来清洗;
2 有机污染:可用5%的有机溶剂清洗,zui高不超过15%的有机溶剂,同时也可以在有机溶剂中加入5~10mmol/l HCl,zui通用的清洗溶液为10%乙腈汇总含5mmol/l七氟丁酸。
色谱柱的清洗过程如下:
1 配制500mL清洗溶液;
2 将抑制器与分离柱断开;
3 设置泵的流速为0.5ml/min;
4 清洗溶液清洗色谱柱60min;
5 如果进行梯度泵洗脱,可以在30min后达到zui高的有机溶剂浓度,清洗30min后,逐步减少有机溶剂的浓度;
6 重新连接抑制器;
7 用常规淋洗液平衡离子色谱柱进行正常操作。
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