简化细胞凋亡研究的工具

有许多凋亡触发器，其中包括某些细胞因子，蛋白质 - 蛋白质相互作用和化学品。一旦开始凋亡，线粒体膜电位变化，可以测量通过流式细胞仪使用BD：MitoScreen（JC-1）流式细胞仪检测试剂盒。

　　线粒体膜电位导致线粒体膜通透性增加，并释放出可溶性蛋白，如细胞色素C和亲半胱天冬酶的增加。

　　半胱天冬蛋白酶激活后，天门冬氨酸残基的裂解在凋亡过程中的早期是一系列。活跃的半胱天冬酶可以切割许多蛋白质，包括聚ADP核糖聚合酶（PARP）和半胱天冬。

　　DNA的片段化是在细胞凋亡导致的核酸内切酶的活化在细胞凋亡过程中的最后阶段。有一些已建立的方法，包括分离和分离的DNA的片段通过琼脂糖凝胶电泳和末端标记的DNA的片段化的研究。

　　BDAPO的BrdU试剂盒采用结束标签或末端脱氧核苷酸转移酶（TDT）缺口末端标记法（TUNEL法）支持研究的DNA的片段。在该试验中，末端转移酶催化依赖模板的bromolated的脱氧尿苷三磷酸（溴的dUTP），羟基（OH）的3'-末端的双链和单链DNA。的Br-dUTP的成立后，这些终端站点使用流式细胞仪，双和单链DNA识别染色细胞抗BrdU标记。与此相反，的BrdU增殖测定结合到新合成的DNA中的BrdU，DNA链断裂的网站。

 

　　用压倒性数目的可用技术和产品，选择最合适的方法是非常困难的。为了帮助使这个选择更容易，概述总结市售的检测从生物学的角度来看。

　　劈开caspases的测量和PARP半胱天冬是细胞凋亡的重要发起者。最早，最一贯观察细胞凋亡的特点之一是一系列的胞浆蛋白酶，叫做半胱天冬酶的激活。当被激活细胞凋亡，半胱氨酸蛋白酶切割多蛋白底物一起，导致细胞结构和功能的丧失，并最终导致细胞死亡。特别是，-8，-9，半胱天冬酶-3已经牵连在细胞凋亡：caspase-9的线粒体途径，Caspase-8在Fas/CD95途径，通过多种途径活化的caspase-3的下游。

　　其他技术检测细胞凋亡各种试剂进行测量半胱天冬酶，特别是caspase-3的。他们包括专门针对蛋白酶的活性形式的抗体。这些抗体是在各种不同的格式，并提供可用于成像，流式细胞术，ELISA，Western印迹。一系列个别荧光肽底物和抑制剂对caspase活性检测工具包，随时可以使用检测板。是这样设计的水解作用而释放的荧光基团或发色基团的基团的活性的人或小鼠的半胱天冬酶的结果，合成的四肽底物的基础上使用。连同半胱天冬酶抑制剂和活性半胱天冬酶酶的半胱天冬酶的活性测定实验设计方案的灵活性。