红细胞酶缺陷的检验

红细胞酶缺陷为遗传性溶血的三大原因之一。已知至少有19种酶缺陷可引起溶血性贫血。红细胞酶缺陷所致的溶血性贫血，除葡萄糖6磷酸脱氢酶（G6PD)缺陷较多见，丙酮酸激酶（PK)亦可见外，余均少见。

红细胞能量来源主要是通过糖代谢生成ATP。红细胞糖代谢主要有无氧糖酵解途径（EMP)和己糖单磷酸旁路（HMP)两种。前者有13种酶参与，已知其中有10种酶缺陷可以引起溶血性贫血（如 HK，GPI，PFK，ALD，TPI，PGK，DPGM，PK等)。后者有6种酶参与，均有因遗传性缺陷而引起溶血的报告（如 G6PD，GSHPx，GR，α-GCSyn, GSHSyn等)。近年来发现参与核苷酸代谢的嘧啶5'核苷酸酶（P5'N)、腺苷脱氨酶（AD)、腺苷酸激酶（AK)缺陷也可引起溶血性贫血。 以下简要介绍红细胞酶缺陷相关检测方法和原理。

变性珠蛋白小体生成试验
1．原理
G －6 －PD 缺乏的病人血样加入乙酰苯肼于37 ℃孵育2 ～4 小时，用煌焦油蓝染色观 察红细胞中珠蛋白小体的生成情况，计算含5 个及以上珠蛋白小体的红细胞的百分率。
2．参考值
正常人含5 个及以上珠蛋白小体的红细胞一般＜30 ％。
3．临床评价
G －6 －PD 缺乏症常高于45 ％，故可作为 G －6 －PD 缺乏的筛检试验。但还原型谷 胱甘肽缺乏症也增高；不稳定血红蛋白病含小体的细胞百分率为75 ％～84 ％，HbH 病 和化学物质中毒时也增高。

高铁血红蛋白还原试验
1．原理
高铁血红蛋白还原试验 （methemoglobin reduction test，M Hb －RT） 是在血液中加入亚 硝酸盐使红细胞中的亚铁血红蛋白变成高铁血红蛋白，正常红细胞的 G －6 －PD 催 化戊糖旁路使 NA DP （氧化型辅酶Ⅱ） 变成 NA DPH （还原型辅酶Ⅱ），其脱的氢通过亚 甲蓝试剂的递氢作用而使高铁血红蛋白 （Fe3 ＋） 还原成亚铁血红蛋白（Fe2 ＋），通过比色可观察还原的多少。当 G －6 －PD 缺乏时，高铁血红蛋白还原率下降。
2．参考值
正常人高铁血红蛋白还原率≥75 ％ （脐带血≥77 ％）
3．临床评价
G －6 －PD 缺乏时，高铁 血红蛋白 还原率 下降。中间 缺乏 （杂合 子） 为31 ％～74 ％，严重缺乏 （半合子或纯合子） ＜30 ％。