肠道菌群粪便直接涂片染色检查

一、粪便直接涂片的优缺点：
1、优点：①设备简单②操作简单③时间短④形象直观，直接了解粪便菌群的“像”，熟练者对诊断菌群失调有较高的准确性。
2、缺点：①检验者必须有一定的经验，否则易判断错误②主要是定性检查，确定分度较困难。
二、操作技术：
1、涂片  将新鲜大便直接涂抹在洁净的玻片上，粪便不可稀释以防细菌变形。标本务求新鲜，涂片厚薄适宜。
2、外观  肉眼检查外观颜色、形状（若含有膜状物的大便应补做艰难梭菌培养）。
3、镜检  染色技术是诊断准确成功的关键，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌要对比鲜明。镜检时应将涂片视野全面观览，切不可看几个视野就计数或报告。
三、检查方法：
1、细菌总数：观察菌群涂片首先要总览细菌总数。了解涂片上细菌的数量是增多还是减少，有无优势菌或真菌。细菌总数过多的情况较少见或不易引起重视。菌群失调时细菌总数多在正常、减少或消失。
细菌总数评定标准
每油镜视野细菌数评价
＜10显著减少
11—100明显减少
101—500略微减少
501—5000正常
＞5000增多
2、观察革兰氏阳性、阴性杆菌及球菌的比率改变
革兰氏阳性杆菌：革兰氏阴性杆菌：革兰氏阳性球菌：革兰氏阴性球菌（包括球菌/杆菌）比率反映了粪便菌群的质素，它一般不受粪便稀释或浓缩的影响，所以较细菌总数有更大的意义，更能反映菌群的本质和预后。
选定有代表性视野中的部分区域作细菌分类计数，需要数100—200个细菌以求得比例。不同年龄的人的比例都不一样，一般杆菌与球菌比例约为75：25。
各年龄组细菌比率平均值的正常参考值（%）
年龄   革兰氏阳性杆菌  革兰氏阴性杆菌   革兰氏阳性球菌   革兰氏阴性球菌
1d：     30.7—61.5     38.5—6.9           0—2.2          0—0.01
2d：     60.0—71.6     34.8—36.9         3.0—3.5         0—0.01
3d：     66.9—82.7     16.0—31.4         1.3—1.6         0—0.05
4d：     79.2—86.2     12.4—19.2         1.4—1.7         0—0.1
5d：     85.5—87.51    1.0—12.8          1.4—1.7         0.08—0.4
6d—7d：  75.4—90.1    7.2—20.8          1.3—2.9         0.1—0.6
8d—15d： 72.4—93.3    5.3—18.9          0.8—1.9         0.1—0.8
1个月：   76.1—95.2    3.3—21.8          0.9—2.6         0.2—1.1
3个月：   80.7—95.9    3.2—17.0          0.9—2.8         0.3—1.5
半年：    82.1—96.4    2.3—15.8          0.5—2.6         0.2—1.1
1岁：     78.4—94.5    3.5—16.6          1.5—2.6         0.3—1.7
2岁：     68.3—90.6    7.5—26.6          1.8—12.2        0.2—2.1
5岁：     51.7—86.3    10.6—37.7         2.0—13.2        1.1—5.4
10岁：    56.7—88.5    7.6—30.7           2.5—12.2       2.0—6.7