致死率高于99％，7大方法用于检测狂犬病

近日一篇关于亲眼看着母亲死于狂犬病的微博文章，又掀起了一阵对狂犬病关注的热潮。虽然现代医疗水平提高，但是目前狂犬病仍然是“可防不可治”，一旦发作没有医治方法，只能等待死神收割前来收割人头。

世界卫生组织在关于狂犬病的词条中对其重要事实进行描述。

　　世界卫生组织指出，狂犬病是一种疫苗可预防的人畜共患病毒性疾病。一旦出现临床症状，狂犬病几乎100%致命。在高达99%的情况下，家犬是将狂犬病病毒传播给人类的原因。不过，狂犬病也可以感染家畜和野生动物。它通过咬伤或抓伤传播给人和动物，通常是经由唾液。

　　除南极洲以外，其它各洲都存在狂犬病，但95%以上的人类死亡病例发生在亚洲和非洲。狂犬病是一种被忽视的热带病，主要影响偏远农村地区的贫困和脆弱人群。大约80%的人类病例发生在农村地区。已有存在很有效的人类狂犬病疫苗和免疫球蛋白，但对需要这些医疗产品的人来说，并不一定可得和可及。从全球来看，狂犬病致死病例鲜有报告，5-14岁儿童往往成为受害者。为治疗狂犬病暴露，狂犬病暴露后预防的平均费用在非洲为40美元，亚洲为49美元，对受影响的家庭来说可能是灾难性的经济负担，他们的平均日收入约为每人1-2美元 。

　　每年全世界有2900多万人接受咬伤后免疫接种，这一做法估计每年挽救了成千上万人的生命。在全球范围，犬类传播狂犬病每年导致的经济负担估计为86亿美元。

　　预防

　　消除犬类的狂犬病

　　狂犬病是疫苗可预防疾病。为犬类接种疫苗是预防人类狂犬病最具成本效益的方法。为犬类接种疫苗不但可以减少犬类传播狂犬病导致的死亡，还能减少被犬类咬伤者的暴露后预防需求。

　　提高对狂犬病的认识和防止被犬类咬伤

　　对儿童和成人进行犬类习性和预防咬伤教育，是狂犬病疫苗接种规划一个重要扩展，可以降低人类狂犬病的发病率，减轻治疗犬类咬伤的经济负担。提高社区预防和控制狂犬病的意识包括，宣讲负责任的宠物豢养知识和信息，讲解如何预防犬类咬伤，以及如何在被咬后立即采取医疗措施。社区参与和对规划的自主权有助于扩大宣传面和更好地掌握重要信息。

　　人的免疫接种

　　同样的疫苗可用于暴露后(见暴露后预防)或暴露前(不太常见)对人进行狂犬病免疫接种。建议从事某些高风险职业的人进行暴露前免疫接种，如处理狂犬病和狂犬病相关活病毒（lyssavirus）的实验室工作人员，以及其专业或个人活动可能使其直接接触蝙蝠、食肉动物或其它可能被感染的哺乳动物的人员(如动物疾病控制人员和野生动物管理员)。

　　在狂犬病暴露高风险和当地获得狂犬病生物制剂的途径有限的偏僻地区，还建议对户外旅行者和外籍人士进行暴露前免疫接种。最后，对生活在或访问这些地区的儿童，也应考虑进行免疫接种。他们在与动物玩耍时，可能会遭受更严重的咬伤，而且可能不会报告被咬。

　　症状

　　狂犬病潜伏期通常为2-3个月，短则不到一周，长则一年，这取决于狂犬病毒进入位置和病毒载量等因素。狂犬病最初症状是发热，伤口部位常有疼痛以及异常或原因不明的颤痛、刺痛或灼痛感（感觉异常）。随着病毒在中枢神经系统的扩散，发展为可致命的进行性脑和脊髓炎症。

　　狂犬病有以下两种形式：

　　狂躁性狂犬病的症状是机能亢进、躁动、恐水、恐高（惧怕气流或清新空气）。数日后患者因心肺衰竭而死亡。

　　麻痹性狂犬病约占人类病例总数的20%。与狂躁性狂犬病相比，其病程不那么剧烈，且通常较长。肌肉从咬伤或抓伤部位开始逐渐麻痹，然后患者渐渐陷入昏迷，最后死亡。麻痹性狂犬病往往会有误诊，造成狂犬病的漏报现象。

　　诊断

　　目前的诊断工具尚不适于在出现临床疾病发作前发现狂犬病感染，而且若不出现恐水、恐高等特异性狂犬病征兆，可能难以作出临床诊断。人类狂犬病可通过各类诊断技术对活体和尸体作出确认，这些技术旨在检测受感染组织（大脑、皮肤或唾液）的全病毒、病毒抗原或氨基酸 。

　　狂犬病检查

目前狂犬病检测大体有7个方法。

　　1.血液检查

　　白细胞总数自(12～30)×109/L不等，中性粒细胞百分率大多在80%以上，大单核细胞百分率亦可增加。

　　2. 尿常规检查

　　常可发现轻度蛋白尿，偶有透明管型。

　　3.脑脊液检测

　　其压力在正常范围或稍有增高，蛋白质轻度增高，细胞数稍增多，但很少超过200×106/L，主要为淋巴细胞。

　　4.免疫学试验

　　A)血清中和抗体或：

　　对未注射过疫苗、抗狂犬病血清或免疫球蛋白者有诊断价值。缺点是在病程第8天前不易测出。接种过疫苗的患者，如中和抗体效价超过1∶5000时，对诊断狂犬病仍有价值，因仅注射疫苗者其抗体效价较低。近来亦有采用ELISA进行抗体检测。

　　B)荧光抗体测定：

　　即狂犬病毒抗原检测。应用荧光抗体检查脑组织涂片、角膜印片、冷冻皮肤切片中的病毒抗原，发病前即可获得阳性结果。方法简便，数小时内可完成，且与小鼠脑内接种检查内氏小体方法有较高的符合率，因此是实际应用价值较大的一种试验。在有经验的实验室中，免疫荧光试验的可靠性可达95%以上。最近采用快速狂犬病酶链免疫吸附诊断法(rapid rabies enzyme immuno diagnosis，RREID)可用于检测脑组织中狂犬病毒抗原，只需肉眼观察或酶标仪测定结果即可，如阳性反应显示橘黄色，阴性反应则无色，甚为快速简便。

　　5.病毒分离

　　从患者脑组织、脊髓、涎腺、泪腺、肌肉、肺、肾、肾上腺、胰腺等脏器和组织虽可分离到病毒，但机会均不多，自脑脊液和唾液中则更不易分离出病毒；患者的存活时间越长，病毒的分离也越困难。分离病毒可采用组织培养或动物接种，分离出病毒后可用中和试验加以鉴定。

　　6.脑组织动物接种与检查

　　均于死后进行，动物接种为将死者脑组织制成10%混悬液接种于小鼠脑内(2～3周龄的乳鼠较成年鼠为敏感)，阳性者小鼠于6～8天内出现震颤、竖毛、尾强直、麻痹等现象，10～15天内因衰竭而死亡。死亡小鼠脑组织切片中可发现内氏小体。

　　以死者脑组织或咬人动物死亡后的脑组织作病理切片或压片，用Seller染色及直接免疫荧光法检查内氏小体，阳性率可达70%。

　　7.反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测狂犬病毒核酸

　　为了能检侧大多数狂犬病毒和狂犬相关病毒，可选择狂犬病毒核蛋白基因(N)中最保守区域设计引物：N1( )(587)5’-TTTTGAGACTGCTCCTTTTTG-3’(605)，N2(-)(1029)5’-CCCATATAGCATCCTAC-3’(1013)。取脑组织或病毒感染细胞，先获得病毒RNA。N1引物用于合成cDNA，然后进行PCR反应，琼脂糖凝胶电泳检测结果。