色谱分析时操作技巧

液相溶剂瓶原装盖上有两个小孔，一直担心空气当中的悬浮颗粒会落入瓶中，污染流动相，为了避免污染，又防止出现内外压差，对溶剂瓶做了如下小改进。

一、大一点的孔用一次性针筒过滤头堵上，另一小孔则先将一次性针筒过滤头套入一个塑料枪头再插入。

二、装水相的和有机相的溶剂瓶，分别选用无机相的和有机相的一次性针筒过滤头。

三、我曾经用空针筒套上过滤头推拉空气，测试无明显阻力，用在溶剂瓶上应该不会产生内外压差。

四、每三个月就更换一次，保证过滤空气效果，改进两年多来对液相运行无影响。

毛细管电泳法操作经验

1 断流的可能原因

a、有气泡。解决办法：所有进入毛细管的液体都要超声排气，特别是容易起气泡的溶液，如SDS。

b、有沉淀物。解决办法：所有进入毛细管的液体都要过滤，滤膜孔径要比毛细管内径小。

c、毛细管有裂口，最容易裂的地方是窗口处和毛细管出口端，有时候看不出来，因为加压注水的时候仍能看到液滴出来，需要用手碰一碰才能发现。

2 基线漂移

a、毛细管没活化好：需要用0.1 M氢氧化钠多冲一冲

b、毛细管没平衡好：冲完氢氧化钠和水后需要用buffer再冲一段时间，这个时间得根据buffer的组成而定。必要时候需要跑空白一段时间。

c、灯接近寿命：查看灯的使用时间，如果已经两千多个小时接近三千小时的话，可以考虑换灯了。

d、毛细管寿命已到。毛细管是有使用寿命的，要看怎么保养，当然，还跟使用的buffer有关。有些buffer特别伤管子的。

3 常见缓冲溶液的使用

缓冲溶液一般是先配好stock solution，使用的时候再进行稀释。但是stock solution也不能长时间存放，0.1 M 的磷酸、硼砂等溶液常温下一个星期就会有变化，再长时间可以看到有沉淀析出。但是也不能因此放到冰箱去，因为放到冰箱也会有沉淀析出，尽量常温存放，然后每星期重配一次。另外，配置硼砂的时候要稍微加热帮助溶解，不然溶解不了。但加热也不要太猛烈，不然溶解效果也是不好。

4 sds使用注意事项

sds在配置过程中容易产生气泡，所以如果用容量瓶来配置是不实际的。这时候就不能对sds的浓度做精确要求。所以，一般用量筒或者离心管配置就好了，加水的时候用玻棒引流，小心的搅拌，边配置边超声促进溶解。

5 毛细管的使用和维护

避免用强碱溶液长时间冲洗，比如1 M氢氧化钠，内壁会被腐蚀的。长时间不用的时候应该吹干，两端密封保存。也有人建议用水封存。

6 UV灯的使用注意事项

不要暴力关电，要在操作界面按关灯键。一般不超过两小时暂停检测不需要关灯，因为开关灯都是会对灯造成损害的。