超液相色谱仪的发展值得期待

　超液相色谱仪的发展值得期待

　　超液相色谱仪是分离科学中的一个全新类别，UPLC借助于HPLC(液相色法)的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。超液相色谱仪是一个新兴的领域，作为世界*个商品化UPLC产品的Waters ACQUITY UPLCTM 超液相色谱仪系统在1996年问世，之后像安捷伦、岛津等公司也陆续开始生产超色谱仪。目前，超液相色谱仪已经开始逐渐地投入液相实验中。

　　超液相色谱仪法的原理与超液相色谱仪法基本相同，所改变的地方有以下几点:

　　小颗粒、高性能微粒固定相的出现。 超液相色谱仪的色谱柱，例如常见的十八烷基硅胶键合柱，它的粒径是5um，而超液相色谱仪的色谱柱，会达到3.5um，甚至1.7um。这样的孔径更加利于物质分离

　　(2)超高压输液泵的使用。

　　由于使用的色谱柱粒径减小，使用时所产生的压力也自然成倍增大。故液相色谱的输液泵也相应改变成超高压的输液泵。

　　(3)高速采样速度的灵敏检测器。

　　(4)使用低扩散、低交叉污染自动进样器。配备了针内进样探头和压力辅助进样技术;

　　(5)超液相色谱仪整体系统优化设计。色谱工作站配备了多种软件平台，实现超液相分析方法与液相分析方法的自动转换。

　　超液相色谱仪与传统的HPLC相比，UPLC的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍，它缩短了分析时间，同时减少了溶剂用量降低了分析成本。

　　不过由于实验过程中仪器内部压力过大，也会产生相对应的问题。例如泵的使用寿命会相对降低，超液相色谱仪的连接部位老化速度加快，包括单向阀等部位零件容易出现问题等。

　　超液相色谱仪尤其对中药研究领域的发展是一个极大的促进。中药的组分复杂，分离困难等问题都可以通过超液相色谱仪法逐渐解决。在同样条件下，UPLC能分离的色谱峰比HPLC多出一倍还多。在同样条件下，UPLC的分辨率能够认出更多的色谱峰。

　　相信在分析实验室中超液相色谱仪会越来越普及，让液相色谱法得到飞跃和进步。

　　超液相色谱仪是目前应用zui多的色谱分析方法，超液相色谱仪系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压超液相色谱仪的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。HPLC应用非常广泛，几乎遍及定量定性分析的各个领域。

　　使用超液相色谱仪时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，zui后通过分析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。超液相色谱仪作为一种重要的分析方法，超液相色谱仪广泛的应用于化学和生化分析中。超液相色谱仪从原理上与经典的液相色谱没有本质的差别，超液相色谱仪的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和微粒固定相，适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。

　　超液相色谱仪主要特点

　　高压——压力可达150～300 kg/cm2。色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上。

　　高速——流速为0.1～10.0 mL/min。

　　——塔板数可达5000/米。在一根柱中同时分离成份可达100种。

　　高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。

　　HPLC与经典液相色谱相比有以下优点：

　　速度快——通常分析一个样品在15～30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。

　　分辨率高——可选择固定相和流动相以达到zui佳分离效果。

　　灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg。

　　色谱柱可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。

　　样品量少，容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。