近紫外CD分析蛋白质三级结构
蛋白质中芳香氨基酸残基，如色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)及二硫键处于不对称微环境时，在近紫外区250～320nm，表现出CD信号[8]。另外芳香氨基酸残基在远紫外光谱区也有CD信号；二硫键的变化信息反映在整个近紫外CD谱上。实际的近紫外CD光谱形状与大小受蛋白质中芳香氨基酸的种类、所处环境(包括氢键、极性基团及极化率等)及空间位置结构(空间位置小于1nm的基团形成偶极子，虽然这对CD光谱的贡献不是很明显)的影响。近紫外CD光谱可作为一种灵敏的光谱探针，反映Trp、Tyr和Phe及二硫键所处微环境的扰动，能应用于研究蛋白质三级结构的精细变化。总的来说，在250～280nm之间，由于芳香氨酸残基的侧链的谱峰常因微区特征的不同而改变，不同谱峰之间可能产生重叠。Krell[9] 等研究了来自Streptomyces coelicolor的野生型与突变型dehydroquinase 的远紫外与近紫外CD光谱，结果表明，野生型与突变型dehydroquinase 的远紫外CD光谱几乎没有发生变化，即二级结构没有发生明显变化，而其近紫外CD光谱却发生较为明显的变化，即较之二级结构，突变型dehydroquinase 的三级结构可能发生了较为明显变化。