发布时间:2024-01-11 00:00 原文链接: 进一步优化糖蛋白的糖谱分析数据质量

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当前获批的生物药物中,有 60% 都是经过糖基化修饰的。糖基化是生物治疗蛋白的一种重要的翻译后修饰。N 糖的结构可能会显著影响治疗性蛋白质(如单克隆抗体(mAb)和 Fc 融合蛋白)的免疫原性、药代动力学和药效学,是公认的关键质量属性(CQA),也是生物治疗蛋白开发的关键之一。

用染料标记释放的 N 糖进行分析是一种常用的方法,该染料促进亲水相互作用液相色谱(HILIC)并通过荧光(FLD)和/或质谱(MS)进行检测。为这些分离选择合适的 HILIC 色谱柱,对于确保复杂糖谱中各组分的良好分离至关重要。峰形、保留时间和色谱柱的稳定性也经常被认为是选择合适色谱柱的重要因素。

安捷伦最新推出了 AdvanceBio 酰胺 HILIC 色谱柱,采用亚二微米填料,提供更好的分离性能。相比传统 HILIC 柱,更有以下优势:

更高使用温度,更长使用寿命

出色的温度稳定性可以适用于典型分析温度(60°C),相比于原先的 AdvanceBio 糖谱柱使用寿命显著提高

更高的灵活性

提高带电基团(如唾液酸)的选择性,使用典型梯度/方法时,降低复杂样品中共流出的可能性;还可通过调节流动相缓冲强度调整电荷基团选择性

更好的兼容性

允许在最大压力为 600 bar 泵的 LC 仪器上(如 Agilent 1260)运行亚 - 2 µm 粒径色谱柱

安捷伦联合佰傲谷举办在线讲座

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