1.将小玻棒放在洁净的载玻片中央,然后将3ml溶化的琼脂糖溶液(0.8g琼脂糖/100ml巴比妥钠盐酸缓冲液)浇制其上,待冷凝后,用针尖挑去玻棒,中央出现一穴槽。
2.在穴槽一端的两侧近边沿2mm处各打一小孔(直径2——3mm),在一孔穴中加入健株叶片汁液,在另一孔穴加入感染病毒的植株叶片汁液。
3.加汁液的孔穴一端接负极,电泳缓冲液仍是0.1mol/LpH8.6巴比妥钠盐酸缓冲液,电压150V,电泳1h。
4.在穴槽加入抗HRP兔血清,置于湿盒中,在37℃温箱中反应3h左右或室温过夜。
5.在生理盐水中浸洗3——4天,每天换水3次。
6.敷上干净的湿滤纸,置于40℃烘箱内烘干。
7.浸入底物显色,从沉淀弧的形状,部位不同,比较健,病汁液所形成的沉淀线。 展开 |