锌 ----双硫腙比色法(一次提取)
样品经消化后,在pH4.0~5.5时,锌离子与双硫腙形成紫红色络合物,溶于四氯化碳,加入硫代硫酸钠,防止铜、汞、铅、铋、银和镉等离子干扰,与标准系列比较定量。
试剂:
1.乙酸钠溶液(2 mol/I):称取68 g乙酸钠(CH,COONa·3H,O),加水溶解后稀释至250 mL,
2.乙酸(2mol/L):量取10.0 mL冰乙酸,加水稀释至85mL,
3.乙酸一乙酸盐缓冲液:乙酸钠溶液(2 mol/L)与乙酸(2 mol/L)等量混合,此溶液pH为4. 7左右。用二硫腺一四氯化碳溶液(0. 1 g/L)提取数次,每次10 mL,除去其中的锌,至四氯化碳层绿色不变为止,弃去四氯化碳层,再用四氯化碳提取乙酸一乙酸盐缓冲液中过剩的二硫踪,至四氯化碳无色,弃去四氯化碳层。
4.硫代硫酸钠溶液(250 g/L):乙酸钠溶液(2 mol/L)与乙酸(2 mol/L)等量混合,此溶液pH为4. 7左右。用二硫腺一四氯化碳溶液(0. 1 g/L)提取数次,每次10 mL,除去其中的锌,至四氯化碳层绿色不变为止,弃去四氯化碳层,再用四氯化碳提取乙酸一乙酸盐缓冲液中过剩的二硫踪,至四氯化碳无色,弃去四氯化碳层。
5. 1:1氨水
6.甲基橙指示液(2 g/L):称取0.2 g甲基橙,用乙醇(20%)溶解并稀释至100 Ml
7.盐酸(2 mol/L):量取10 mL盐酸,加水稀释至60 mL,
8.锌标准使用液(1.0ug):
10. 二硫踪一四氯化碳溶液(0.01g/L)。
吸取5.0~10.0mL定容的消化液和相同量的试剂空白液, 分别置于25mL比色管中;
吸取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL锌标准使用液(相当0、1、2、3、4、5μg锌),分别置于25mL比色管中。
于样品消化液、试剂空白液及锌标准液中各加1滴甲基橙指示液,用氨水调至由红变蓝,再各加5mL乙酸-乙酸盐缓冲液及1mL硫代硫酸钠溶液混匀后, 各加10.0mL0双硫腙-四氯化碳溶液,定容至25ml.剧烈振摇4min,静置分层,经脱脂棉将四氯化碳层滤入25px比色杯中,以四氯化碳调节零点,于可见分光光度计波长530nm处测吸光度,绘制标准曲线比较。
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