实验概要
间充质干细胞的传代
主要试剂
DPBS、0.05%的Trypsin、间充质干细胞培养液
主要设备
15 mL离心管、培养皿、离心机、培养箱、倒置显微镜
实验步骤
(1)37℃预热间充质干细胞培养液和0.05%胰蛋白酶胰蛋白酶。
(2)弃掉旧培养液,加入室温放置的DPBS洗一遍,尽可能将残留的培养液洗净,吸去DPBS。
(3)加入适量(盖住皿底即可)0.05%胰蛋白酶,37℃培养箱内孵育消化2~3 min。
(4)倒置显微镜下观察细胞变圆、漂起,可加等量间充质干细胞培养液终止消化。
(5)轻柔吹打细胞,收集细胞悬液到15 mL离心管中,室温1000 r/min离心3 min,弃上清。
(6)加入新鲜间充质干细胞培养液重悬细胞,轻柔吹打均匀,视细胞量按每10 cm培养皿1×106个细胞的密度接种到新皿中。
(7)放入37℃、5% CO2、饱和湿度的培养箱中培养。
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