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实验方法原理 试剂、试剂盒 甲酸铵寡核苷酸杂交溶液寡核苷酸预杂交液TE噬菌体T4多核苷酸激酶限制性内切核酸酶琼脂糖凝胶诱变寡核苷酸[γ-32P]ATP2XYT 顶层琼脂和 2xYT 琼脂平皿仪器、耗材 钝端镊子皮下注射用针头（18 号）和印度墨水孵箱硝酸纤维素膜或尼龙膜真空烤箱68°C 水浴Whatman DEAE 滤纸实验步骤 材料缓冲液和溶液各种贮存液，缓冲液的成分及相关试剂请参见附录1将贮存液稀释至所需的浓度。甲酸铵（0.2mol/L)寡核苷酸杂交溶液6XSSC5XDenhardt's溶液106至107dpm/ml放射性标记的寡核苷酸寡核苷酸预杂交液6xSSC5xDenhardt's溶液0.1%(m/V)SDS6XSSC6XSSC应在所需要的温度下顸热，请见步骤 11，12和 13。TE(pH7.6)酶和缓冲液噬菌体T4多核苷酸激酶限制性内切核酸酶请见步骤 18 和 19。凝胶琼脂糖凝胶请见步骤 18。核酸......阅读全文
目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977）提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭，但这两种方法都是同样生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸，每组寡核苷酸都有固定的起点，但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA上的每一个碱