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用新RACE法扩増cDNA的5末端

这一实验方案分为 6 个阶段。第 1 阶段:降解 RNA 的去磷酸化; 第 2 阶段:完整 RNA 去帽; 第 3 阶段:RNA 寡核苷酸的制备; 第 4 阶段:RNA 寡核苷酸与细胞 RNA 的连接; 第 5 阶段:反转录; 第 6 阶段:扩增。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒缓冲液、溶液和试剂酶和酶缓冲液核酸和寡核苷酸仪器、耗材特殊设备实验步骤第 1 阶段:降解 RNA 的去磷酸化一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙酸钠,3mol/L,pH5.2乙醇二硫苏糖醇(DTT)(0.1mol/L)苯酚/氯仿(1:1,体积比)2. 酶和酶缓冲液磷酸酶缓冲液,10X蛋白酶 KRNasin牛小肠碱性磷酸酶(CIP)3. 核酸和寡核苷酸RNA 样品4. 特殊设备预设为 37°C、50°C 的水浴或加热仪5. 其他琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备,包括溴化乙锭二、方法一般来说,应该按照生产商的说明使用磷酸......阅读全文

PCR技术 PCR技术的应用

一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合