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实时定量PCR探针概述

实时定量PCR (qPCR)的优势•实时检测PCR反应过程•精确计算出每个循环的PCR产物量•扩增和检测同时进行•消除后续PCR的干扰在实时定量PCR反应中,杂交探针与插入染料如SYBR Green相比是更好的选择。荧光标记探针可以提高实时定量PCR结果的效率、灵敏度和特异性。而且定量PCR可以在一个反应里同时检测多个目标基因。实时定量PCR的应用•基因表达分析•转基因检测和定量•病原体检测和定量•基因型/ SNP分析•突变检测多重PCR分析的优点•省钱省时省力•所需样品量少•消除移液误差•可以在一个反应里设置内部对照•便于筛选双标探针的原理PCR 扩增时,在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针。该探针为一线性的寡核苷酸,两端分别标记一个荧光报告基团和一个荧光淬灭基团,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收, PCR 仪检测不到荧光信号; PCR 扩增时(在延伸阶段), Taq 酶的 5' - ......阅读全文

荧光定量PCR仪技术及其在医学中的应用

刘向国 谢国明 (重庆医科大 重庆市 400016)摘 要 荧光定量PCR仪技术是一种新的核酸定量技术,该技木在PCR仪反应系统中引人了荧光标记探针,具有可实时监测,高灵敏性,高特异性和高精确性的特点,极大地克服了原有PCR仪技术的不足,扩大了PCR仪的应用范围。关键词 定量pcr;荧光;基因Flu

西安交大最新综述:第三代PCR技术

  自1985年 Mullis 发明了体外多聚酶链反应(PCR)至今, PCR在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用.今天的第三代PCR技术, 即绝对定量的数字化 PCR也备受关注。来自西安交通大学生命科学与技术学院等处的研究人员近期发表综述,介绍了 PCR 技术的发展

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用(一)

 (张蓓,沈立松  上海第二医科大学附属新华医院上海儿童医学中心实验诊断中心)摘要:多聚酶链反应飞速的发展使其成为了分子生物学实验室重要的工具,实时荧光定量PCR(real-timequantitative PCR)技术以其敏感性高、重复性好、速度快和污染少使PCR技术又

转基因食品的检测

摘要:本文论述了转基因农产品、食品的安全性问题以及对转基因食品从基因、基因转录、基因翻译表达三个层面的检测技术做了概述。 关键词:转基因食品 转基因农产品 食品安全 生物技术 检测技术 Abstract: discuss on the question Genetically modifi

转基因食品的检测(二)

(1) 定性PCR法定性PCR可直接检测启动子、终止子、标记基因片断、目的基因片断。为使目的基因很好的进行表达,在构建基因表达载体时常在目的基因的5’和3’端分别加上启动子和终止子。当前大约75%的转基因植物中使用Ca MV( Cauliflower mosaicvirus) 3 5 S启动

荧光定量PCR仪技术及其在医学中的应用(一)

 1 概述        荧光定量多聚酶链式反应是一种新的核酸定量技术。该技术将荧光能量传递技术(fluorescence resonance energy transfer,FRET)应用于常规多聚酶链式反应(poly

转基因食品的检测

     摘要:本文论述了转基因农产品、食品的安全性问题以及对转基因食品从基因、基因转录、基因翻译表达三个层面的检测技术做了概述。      关键词:转基因食品 转基因农产品 食品安全 生物技术 检测技术      Abstract: discuss on the question Gen

第三届中国食品与农产品安全检测国际论坛大会报告(一)

  2014年5月7-8日,第三届中国食品与农产品质量安全检测技术国际论坛暨展览会在北京国际会议中心盛大召开。本届中国食品与农产品质量安全检测技术国际论坛暨展览会由中国仪器仪表学会分析仪器分会、中国仪器仪表行业协会分析仪器分会和中国仪器仪表学会检验检

实时荧光定量PCR

Real Time PCR实时荧光定量PCR   其定量的基本原理是在 PCR 反应体系中加入非特异性的荧光染料(如: SYBR GREEN I )或特异性的荧光探针(如: Taqman 探针),实时检测荧光量的变化,获得不同样品达到一定的荧光信号(阈值)时所

食品检测中的生物技术分析

  摘要:近年来,食品安全问题得到了全社会的关注,食品检测技术得到了更多的重视,生物技术等新兴的食品检测技术也因此而得到了广泛的应用。文章在简要介绍生物技术的基础上,详细阐述了生物技术在食品检测中的应用,以期为生物技术的发展与应用提供新的思路。   食品安全问题是由于食品中含有毒、有害物质

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用(二)

1.3定量方法在real-timeQ-PCR中,模板定量有两种策略:相对定t和绝对定。相对定t指的是在一定样本中靶序列相对于另一参照样本的f的变化。绝对定t指的是用已知的标准曲线来推算未知的样本的to1.3.1标准曲线法的相对定f由于在此方法中f的表达是相对于某个参照物的f而官的,因此相对定f的标准

乙型肝炎的实验室诊断及质量控制

2005年12月我国第一部《慢性乙型肝炎防治指南》颁布,2006年1月卫生部颁布了《2006-2010年全国乙型病毒性肝炎防治规划》。其目的在于科学、规范和有效开展我国乙型肝炎防治工作。卫生部计划在未来3~4年内逐步建立全国乙型肝炎实验室检测网络,制定《全国乙型肝炎实验室检测工作技术规范》,加强实验

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用(二)

1.3 定量方法 在real-time Q-PCR中,模板定量有两种策略;相对定量和绝对定量。相对定量指的是在一定样本中靶序列相对于另一参照样本的量的变化。绝对定量指的是用已知的标准曲线来推算未知的样本的量。 1.3.1 标准曲线的法的相对定量 由于在此方法中量的表达是相对于某个参照物的量而言的

食品检测方面生物技术的应用

摘要:随着食品工业持续、快速地发展,传统的方法已经不能够 满足当前对食品检测的更高要求了,人们要求更为简便快捷、灵活 性强、特异性高的先进的检测方法,而现代的生物技术的快速发展 使食品的检测方法更加多样、准确、迅速及安全,也就是说生物技 术的应用满足了现代食品检测的更高要求。 关键词:食品检测;生物

实质等同性(转录组学)实验

实验材料:小麦  试剂、试剂盒:β-巯基乙醇                                   &nb

实质等同性(转录组学)实验2

3.9 芯片数据介绍对简单的实质等同性实验来说,一个比较转基因系与对照之间基因表达的散点图就已足够了。文献 [ 5 ] 中参与两个实验的样品都标注在图15. 2中。结果用 GeneSpring 软件包显示,绘制了每组比较小麦系之间每个基因成对的平均强度,并突出显示少数感兴趣的基因(统计上显著差异表达

Digital PCR 技术的发展与应用(一)

dPCR发展历史1992年,Sykes等从非淋巴细胞和正常体细胞背景中鉴定突变的白血病细胞,检测了复杂背景下低丰度的IgH重链突变基因。该研究中提出了三个重要的原则:有限稀释、终点信号的有或无及对数据泊松分布的统计处理,为以后dPCR的发展奠定了基础。1997年,有研究利用玻璃毛细管作为载体进行PC

化学发光分析仪知识大全

 瞬稳静态注射化学发光分析仪主要特点1、 浓度直读和发光强度两种测定模式;2、 大容量存储器,可存储128组测定信息;3、 瞬稳静态注射化学发光分析仪内置打印机,实时打印测定的图形和数据;4、 开始进样信号提示功能;5、 大屏幕液晶显示器,实时显示测定的图形和数据。瞬稳静态注射化学发光分析

革命性传感器PixelSensor在聚合酶链反应 (PCR) 中的应用

概述近几年来,在检验医学和临床领域,point-of-care-testing (POCT) 成为一个比较热门的词汇。它最早出现在美国,意思是在发病或者发生事件的地点进行诊断、监控和治疗,能快速地获得检验结果并及时做出正确的处理。POCT的发展使得紧凑型光学和检测技术的需求不断增

高通量测序技术的原理及各平台优势和实践应用的分析

  随着人类基因组计划(human genome project )在2003年顺利完成,基因组测序技术取得了长足的进步,这直接导致了每兆基因组成本的大幅下降以及检测的基因组数量越来越多。人们对基因组的复杂性深感震惊,这也引导着测序技术的进一步发展。最近的一些突破性技术使得测序技术在更短的时间内可以

高通量测序技术的原理及各平台优势和实践应用的分析

  随着人类基因组计划(human genome project )在2003年顺利完成,基因组测序技术取得了长足的进步,这直接导致了每兆基因组成本的大幅下降以及检测的基因组数量越来越多。人们对基因组的复杂性深感震惊,这也引导着测序技术的进一步发展。最近的一些突破性技术使得测序技术在更短的时间内可以