电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038, China 摘 要 电穿孔技术利用电场造成细胞膜的改变从而将DNA导入细胞内，同时还可用于细胞融合以及动物克隆等。基因电转移的效率通常比化学法提高1-2个数量级，主要与脉冲波形、长度、缓冲液等有关。方波直流电脉冲应用广泛，在有关细胞核移植的多项研究报告中均指出其重要作用。关键词 基因转移，胚胎克隆，电穿孔 过去十年中，关于基因功能的研究取得了丰硕的成果，并因此带动了基因......阅读全文
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Insti
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038
电穿孔技术的应用
当细胞置于非常高的电场中，细胞膜就变得具有通透性，能让外界的分子扩散进细胞内，这一现象称为电穿孔。运用这一技术，许多物质，包括DNA、RNA、蛋白质、药物、抗体和荧光探针都能载入细胞。作为一种基因转导方法，电穿孔已被广泛用于各种细胞类型，包括细菌、酵母、植物和动物细胞；而且，它还能作为注射方法（称为
电穿孔技术医疗应用
不可逆的电穿孔在Gustave Roussy研究所，由Lluis M Mir领导的第一批研究医疗应用的电穿孔。在这种情况下，他们研究了使用可逆电穿孔与不可渗透的大分子。东弗吉尼亚医学院和奥多明尼昂大学的研究人员首先研究了如何在人类细胞上使用纳秒脉冲，并于2003年出版。关于不可逆的电穿孔，2007年
转基因技术在工业领域的应用
工业领域的应用主要指在食品工业中的应用,主要包括:(1)对工业发酵食品菌种如酵母菌和乳酸菌的改良;(2)生产食品添加剂和加工助剂;(3)制造有益于人类健康的保健成分或有效因子,携带不同目的基因的转基因动植物可以成为人类治疗各种疑难杂症的资源丰富的药库。例如,目前广泛使用的啤酒酵母、食品酶制剂、奶酪等
转基因技术在医学领域的应用
医学中转基因技术的应用范围很广。动物转基因技术可以创造诊断和治疗人类疾病的动物模型,可克服单纯依靠自然突变体的局限。转基因技术还应用于蛋白质多肽药物的生产,如生产胰岛素、干扰素、免疫球蛋白、促红细胞生成素、尿激酶、人血红蛋白、人表皮生长因子、粒细胞等等珍稀药物;还可利用动植物生产疫苗,主要包括乙肝表
电穿孔技术的医学应用特点
不可逆的电穿孔在Gustave Roussy研究所，由Lluis M Mir领导的第一批研究医疗应用的电穿孔。在这种情况下，他们研究了使用可逆电穿孔与不可渗透的大分子。东弗吉尼亚医学院和奥多明尼昂大学的研究人员首先研究了如何在人类细胞上使用纳秒脉冲，并于2003年出版。关于不可逆的电穿孔，2007年
显微注射法在转基因动物上的应用
以显微注射法转外源基因没有长度上的限制，已证明数百kb之DNA片段均可以成功产制出转基因动物。其缺点是设备精密而昂贵、操作技术需要长时间的练习，以及每次只能注射有限的细胞。这些操作中所使用的微量移液管是用毛细管拉针器(pipettepuller)来制作的，先将玻璃毛细管加热到其熔化的温度，再将其
转基因动物技术
从20世纪70年代中期开始，就有人尝试用各种办法向动物体内转移外源基因。如将牛奶成分中特有的基因转移到白鼠体内，这些外来基因在白鼠体内重组后，白鼠分泌的乳汁便含有牛奶成分。这种通过人工方法获得外来基因的白鼠，称为转基因鼠。 转基因动物技术的核心，是把遗传的功能单位──基因转移到动物体内，
转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用
自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来，我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式：针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用，从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展，迫切地需要
转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用
自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来，我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式：针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用，从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展，迫切地需要
转基因技术在农牧业的应用
转基因生物技术可以加快农作物的生长速度、增强抗病性、增加产量、增强对环境的适应能力、增强抵抗除草剂和杀虫剂的能力。全世界进入田间试验的转基因植物已超过500种,但国内转基因食品的范围还比较小。①将抗除草剂基因转入到栽种的作物里面,能有效地防治田间杂草,保护作物免除药害。从植物和微生物中已克隆出多种不
动物转基因技术的过程介绍
动物转基因就是基因组中含有外源基因的动物。它是按照预先的设计，通过细胞融合、细胞重组、遗传物质转移、染色体工程和基因工程技术将外源基因导入精子、卵细胞或受精卵，再以生殖工程技术，有可能育成转基因动物。 通过生长素基因、多产基因、促卵素基因、高泌乳量基因、瘦肉型基因、角蛋白基因、抗寄生虫基因、抗
转基因动物技术(一)
转基因动物自1980--1981年产生后，迅速发展。它克服了物种之间的生殖隔离，实现了动物物种之间遗传物质的交换和重组，这不仅为遗传物质的研究提供了新的手段，丰富了物种的基因库，也扩大了生命科学的视野，由于转基因动物技术具有分子及细胞水平操作、整体表达的特点，使得人们能从更完整的系统中去认识生物分子
转基因动物技术概述
从20世纪70年代中期开始，就有人尝试用各种办法向动物体内转移外源基因。如将牛奶成分中特有的基因转移到白鼠体内，这些外来基因在白鼠体内重组后，白鼠分泌的乳汁便含有牛奶成分。这种通过人工方法获得外来基因的白鼠，称为转基因鼠。 转基因动物技术的核心，是把遗传的功能单位──基因转移到动物体内，使它成为动物
转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用（二）
体细胞核移植是近些年来新出现的一种转基因技术。该方法是先把外源基因与供体细胞在培养基中培养，使外源基因整合到供体细胞上，然后将供体细胞细胞核移植到受体细胞——去核卵母细胞，构成重建胚，再把其移植到假孕母体，待其妊娠、分娩，便可得到转基因的克隆动物。在这一技术中，外源基因的稳定表达和重建胚的良好发育是
转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用（一）
转基因技术的发展自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来，我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式：针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用，从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展
转基因动物的临床应用特点
转基因动物（transgenicanimal）在目前生物及医学研究方面的应用极为广泛，转基因小鼠一直是研究外源基因构筑型态、染色体嵌插、转基因表现及调节的最佳模式，也是建立转基因技术最好的工具，尤其是在转基因家畜之前，先以小鼠进行预备试验是求事半功倍不可或缺的过程。 转基因动物应用的领域可以包括研
转基因动物的肿瘤学应用
肿瘤基因的发现是近10年来肿瘤学研究的重大突破，现已发现乳腺癌基因等100多个肿瘤基因。实验证明，各种脊椎动物都携带肿瘤基因，在通常情况下并不引起细胞癌变，只有在某些条件下才能被激活使癌细胞增生而导致癌变。建立带有肿瘤基因的转基因动物可了解哪些组织对肿瘤基因转化活性敏感、肿瘤形成与其基因的关系、肿瘤
转基因动物的改良培育应用
经典的遗传育种方法要在同种或亲源关系很近的种间才能进行，并且受到变异或突变的限制，而使用重组DNA技术在短时间内就可使亲缘关系很远的种间遗传信息进行交换和重组。另外由于转基因动物可以稳定地整合外源基因，并在合适的组织表达，还能将这种性状遗传给后代，这样就可以生产出生长快、产肉、产毛、产奶更多而耗料极
转基因动物的研制生产应用
将在医学领域中有价值的生物活性蛋白基因导人家畜或家禽的受精卵，在发育成的转基因动物体液或血液、乳、尿、腹水中收获基因产物，便可获得大量有价值的生物活性蛋白，通常将此动物称为“动物生物反应器”。其中以乳汁为最理想的分泌部位。tPA（组织型纤溶蛋白元激活因子）已在转基因小鼠的乳汁中得到了表达，成为治疗血
转基因技术的具体技术应用
转基因技术已广泛应用于医药、工业、农业、环保等领域。医学医学中转基因技术的应用范围很广。动物转基因技术可以创造诊断和治疗人类疾病的动物模型，可克服单纯依靠自然突变体的局限。转基因技术还应用于蛋白质多肽药物的生产，如生产胰岛素、干扰素、免疫球蛋白、促红细胞生成素、尿激酶、人血红蛋白、人表皮生长因子、粒
电穿孔技术应用与药物和基因传递
电穿孔还可以用于通过施加瞬时透化细胞膜的短且强烈的电脉冲来帮助将药物或基因递送到细胞中，从而允许运输分子，否则不能通过细胞膜运输。当待输送的分子是DNA时，这个过程被称为电化学疗法，当待输送的分子是化学治疗剂或基因电转移时。来自卡罗林斯卡研究所和牛津大学的科学家使用外来体的电穿孔在全身注射（在血液中
转基因动物的遗传学应用
利用自然突变或人为修饰的基因作为外源基因，构建转基因动物，研究导人的异常基因的表型效应，可以了解基因结构和功能的关系，还可用于基因组印迹分析、遗传缺陷的矫正等。
转基因动物的免疫学应用
巴宾耐特（Babinet）发现虽然转基因小鼠产生HBsAg，但在6个月内没有任何病理变化，表现为一种持续的带病毒状态。这些结果表明：乙型肝炎患者的肝细胞损伤不是由HBV的HBsAg表达直接引起，而是通过对肝细胞膜上的病毒抗原发生免疫反应造成的。因此，可以用转基因小鼠模型来研究免疫耐受与肝细胞损伤的关
转基因动物的遗传病应用
通常是将功能正常的外源基因导入动物体的靶细胞内，用来弥补缺陷的基因，改变患病细胞的遗传物质，进行基因治疗。相反的将显性疾病基因或一个、甚至多个外源基因人为地导入动物体内，就可制备遗传性疾病的转基因动物模型，研究和治疗人类遗传性疾病。例如亨廷顿（Hungtington）将舞蹈病基因导入小鼠，建立了舞蹈
转基因技术的发展与转基因动植物
1.转基因技术的发展 自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来，我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式：针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用，从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大
转基因技术的发展与转基因动植物
1.转基因技术的发展 自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来，我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式：针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用，从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大