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MTT实验的一些细节问题

一、细胞:1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低,太少观察不到差异。2.药物浓度的设定。一定要多看文献,参考别人的结果再定个比较大的范围先初筛。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记!否则,可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。3. 时间点的设定。在不同时间点的测定OD值,输入excel表,最后得到不同时间点的抑制率变化情况,画出变化的曲线,曲线什么时候变得平坦了(到了平台期)那个时间点应该就是最好的时间点(因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显)。4.培养时间。200 ul的培养液对于1......阅读全文

分子对接技术研究D715-2441 抑制剂与PB2蛋白的结合模式

  从本期起,小编将带领大家使用殷赋云计算平台(http://cloud.yinfotek.com/)来做一系列计算“文章”。这一期咱们来重现一篇2018年文献[1]的计算结果,看看作者是如何运用分子对接技术来阐明机理、升华文章的。该文献影响因子4.6,是典型的“实验+计算”模式,比较接近大多数科研

分子对接技术研究D715-2441 抑制剂与PB2蛋白的结合模式 一

【前言】从本期起,小编将带领大家使用殷赋云计算平台(http://cloud.yinfotek.com/)来做一系列计算“文章”。这一期咱们来重现一篇2018年文献[1]的计算结果,看看作者是如何运用分子对接技术来阐明机理、升华文章的。该文献影响因子4.6,是典型的“实验+计算”模式,比较接近大多数

为什么细胞养不好?你可能忽略了这些细节

  上一期我们为大家详细介绍了实验中的肿瘤细胞的基本知识,不管是从ATCC购买,亦或朋友惠赠,当细胞不远万里到达咱们手里,最重要的事就是如何让它们茁壮成长。这看似简单,然而却因细胞长不起来或者污染等因素,折磨得不少英雄豪杰意欲“自挂东南枝”。今天小编就结合多年实践经验和ATCC的动物细胞培养指南,为