沙门氏菌多克隆酶免疫分析筛选方法
本方法由酶免疫分析方法（EIA）测得的阳性样品的增菌肉汤和 M 肉汤必须依照常规标准方法中所指示的，在选择性培养基上做划线接种，并必须将典型或可疑菌落按标准方法进行生化和血清学鉴定。 对于阳性结果的确定 ①可借助比色计卡进行视觉检查，当判断阴性和阳性对照符合卡上所描述的标准时，阳性结果才有效。 ②还可以通过仪器的方法，用带有414nm 滤光片的光度计进行检测，只有当阴性和阳性对照具有可接受的光密度值时，阳性结果才有效。 1、原理 沙门氏菌抗原的检测是依据与沙门氏菌抗原具高特异性的高纯化的抗体所进行的酶免疫分析来完成的。把沙门氏菌抗原的多克隆抗体吸附于96孔微量滴定板的小孔内表面上，把待检样品也放到板的小孔里。如果样品中含有沙门氏菌抗原，它就与孔内附着的特异性抗体结合，样品中的其他物质都会被冲洗掉。加入接合剂，如果沙门氏菌抗原与吸附在孔内表面的抗体相结合，那么可以进一步与接合剂结合，冲洗孔以洗去未......阅读全文
沙门氏菌多克隆酶免疫分析筛选方法
本方法由酶免疫分析方法（EIA）测得的阳性样品的增菌肉汤和 M 肉汤必须依照常规标准方法中所指示的，在选择性培养基上做划线接种，并必须将典型或可疑菌落按标准方法进行生化和血清学鉴定。 对于阳性结果的确定 ①可借助比色计卡进行视觉检查，当判断阴性和阳性对照符合卡上所描述的标准时，阳性结
多克隆酶免疫分析筛选方法检测沙门氏菌
多克隆酶免疫分析筛选方法本方法由酶免疫分析方法(EIA)测得的阳性样品的增菌肉汤和 M 肉汤必须依照常规标准方法中所指示的,在选择性培养基上做划线接种,并必须将典型或可疑菌落按标准方法进行生化和血清学鉴定。对于阳性结果的确定①可借助比色计卡进行视觉检查,当判断阴性和阳性对照符合卡上所描述的标准时,阳
沙门氏菌单克隆酶免疫色度分析筛选方法
单克隆酶免疫色度分析筛选方法 AOAC 方法：986.35，987.11，993.0均为单克隆酶免疫色度分析筛选方法。现以 AOAC 公定方法 AOAC993.08《SalmonelIa-Tek）》为例做一介绍。 该方法阳性的检测结果应是客观的，必须用配有450nm 滤光片的光度计来进行测试
单克隆酶免疫色度筛选法分析沙门氏菌
单克隆酶免疫色度分析筛选方法AOAC 方法:986.35,987.11,993.0均为单克隆酶免疫色度分析筛选方法。现以 AOAC 公定方法 AOAC993.08《SalmonelIa-Tek)》为例做一介绍。该方法阳性的检测结果应是客观的,必须用配有450nm 滤光片的光度计来进行测试。只有当阴性
单克隆酶免疫色度分析筛选方法
单克隆酶免疫色度分析筛选方法 AOAC 方法：986.35，987.11，993.0均为单克隆酶免疫色度分析筛选方法。现以 AOAC 公定方法 AOAC993.08《SalmonelIa-Tek）》为例做一介绍。 该方法阳性的检测结果应是客观的，必须用配有450nm 滤光片的光度计来
单克隆酶免疫色度分析筛选方法
（1）原理 沙门氏菌抗原的检测是基于用特异性单克隆抗体进行的酶免疫分析（EIA）用抗沙门氏菌抗原的单克隆抗体包被于聚苯乙烯微量小孔的内表面，将样品和对照加入中。样品中如有沙门氏菌抗原存在，则将被吸附在孔上的特异性抗体吸收。冲洗小孔后，加入接合剂与被抗体吸收的沙门氏菌抗原结合。再冲洗小孔，
沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂
①吸附有抗体的微量孔板 为8行带有沙门氏菌单克隆抗体的12个孔的试验板。打开后于2～8℃贮存，可稳定28天。 ②微量板托架 足以固定单个孔杯或测试条。 ③对照抗原 阳性对照:1瓶（煮沸后冻干的鼠伤寒沙门氏菌悬液）可与沙门氏菌抗体反应；阴性对照：1瓶（煮沸后冻干的奇异变形杆菌悬液）不
沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程酶免疫检测
①FS法 a.接通荧光计和打印机电源，至少预热1h。 b.从铝箔袋中取出所需数量的微孔测试板每个食品样品一个孔，另加4个孔做对照用。将板稳固地卡入托架中。各移取100μL 阴性对照抗原于A-1，A-2和A-3的每个孔中。移取100μL 阳性对照抗原于A-4中。移取每100μL 加热的M肉汤样
单克隆酶免疫色度分析筛选方法需要哪些仪器？
①微量条板架 能放置1～8个微量条板的聚苯乙烯框架。 ②条板密封纸 覆盖微量板的粘合纸。 ③内嵌式包装物 （用于固定放置试剂）。 ④培养箱 能于35.0℃±0.1℃～37.0℃±0.1℃恒温。 ⑤水浴箱 a.能于42.0℃±0.5℃和35.0℃±1.0℃恒温。 b.能于100.
沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂介绍
荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂 所用试剂均可购自 Dynatech Laboratories Inc。Q-Trol Salmonella MICRO -ELISAK 检验盒（ME）法和Q-Trol目测检验盒（VI和VR法）包括①～⑦，⑧a.和⑩。 ①吸附有抗体的微量孔板 为8行带有沙
酶标仪沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程
一、实验准备 以下试剂都必须在开始分析之前准备好。 ①PBS 吐温溶液。 ②对照抗原 移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中，充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。 ③酶接合剂10mL（1瓶）接合剂稀释液于接合剂瓶中，混合并使其在室温下再水化。 ④
荧光酶免疫分析筛选方法检测沙门氏菌的原理
一、简介荧光酶免疫分析筛选方法是在 EIA 基础上加入荧光标记的酶底物,用荧光计检测荧光度值来判断结果。AOAC989.15方法食品中沙门氏菌单克隆酶免疫荧光和比色筛选法(Q-Trol)》即为此方法。AOAC 公定方法 989.15是用于对存在于所有食品中沙门氏菌的推定方法,因为试验中使用的单克隆
沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程实验准备
以下试剂都必须在开始分析之前准备好。 ①PBS 吐温溶液。 ②对照抗原 移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中，充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。 ③酶接合剂10mL（1瓶）接合剂稀释液于接合剂瓶中，混合并使其在室温下再水化。 ④终止液不需要复原。如果出现结晶可在35
荧光酶免疫分析筛选方法检测沙门氏菌的实验过程
一、实验准备 以下试剂都必须在开始分析之前准备好。①PBS 吐温溶液。②对照抗原 移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中,充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。③酶接合剂10mL(1瓶)接合剂稀释液于接合剂瓶中,混合并使其在室温下再水化。④终止液不需要复原。如果出现结晶可在35℃
荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂
①吸附有抗体的微量孔板 为8行带有沙门氏菌单克隆抗体的12个孔的试验板。打开后于2～8℃贮存,可稳定28天。②微量板托架 足以固定单个孔杯或测试条。③对照抗原 阳性对照:1瓶(煮沸后冻干的鼠伤寒沙门氏菌悬液)可与沙门氏菌抗体反应;阴性对照:1瓶(煮沸后冻干的奇异变形杆菌悬液)不与沙门氏菌抗体反
荧光酶免疫分析筛选方法所用样品制备过程
一、仪器①微量孔板的洗孔器或移液器 有12个管可以洗整个的板。②微量移液器 能够吸移5～200μL 液体。③水浴 能够于100℃恒温,亦可用调至100℃的高压灭菌器代替作为流动蒸汽发生器。④荧光计 用于 FS 检测。测量微量孔内容物的相对荧光量(MicroFLUOR Reader Dynat
荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂有哪些？
所用试剂均可购自 Dynatech Laboratories Inc。Q-Trol Salmonella MICRO- ELISAK 检验盒（ME）法和Q-Trol目测检验盒（VI和VR法）包括①～⑦，⑧a.和⑩。①吸附有抗体的微量孔板 为8行带有沙门氏菌单克隆抗体的12个孔的试验板。打开后于2～
重组克隆筛选（酶切鉴定）
【实验目的】1.掌握质粒提取的基本方法的原理；2.学习和掌握限制性内切酶的使用方法。【实验原理】重组克隆的筛选和鉴定是基因工程中的重要环节之一。不同的克隆载体和相应的宿主系统，其重组克隆的筛选和鉴定方法不尽相同。从理论上说，重组克隆的筛选是排除自身环化的载体、未酶解完全的载体以及非目的DNA片断插入
沙门氏菌自动酶联荧光免疫检测系统（VIDAS）筛选法
自动酶联荧光免疫检测系统（VIDAS）筛选法 VIDAS 和 mini-VIDAS 是一种全自动免疫分析仪，如下图所示，它集合计算机、键盘、打印机于一身，应用酶联免疫分析原理，应用夹心技术，最终检测蓝色荧光（4-甲基伞形基磷酸盐，ELFA），所测的荧光与抗原成正比。此方法已通过 AOAC
阳性克隆筛选方法汇总
——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法近几年来，基因重组的技术层出不穷，包括TALEN和CRISPR/Cas9在内的重组技术给基础研究提供更为方便和快捷的分子生物学工具。关于这些技术的具体原理和操作细节，这里不做展开介绍，主要谈一谈在用这些技术进行细胞株构建的过程中，如何做才
阳性克隆筛选方法汇总
阳性克隆筛选方法汇总 ——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法 近几年来，基因重组的技术层出不穷，包括TALEN和CRISPR/Cas9在内的重组技术给基础研究提供更为方便和快捷的分子生物学工具。 关于这些技术的具体原理和操作细节，这里不做展开介绍，主要
单克隆酶联免疫分析筛选方法检测大肠杆菌O157:H7的介绍
该方法是对所有食品E.coliO157:H7的存在进行筛选，不是确证试验，因为试验中所用的单克隆抗体可能与少部分的非E.coliO157:H7有交叉反应。 阳性的检疫结果应是客观的，必须配有450nm滤光片的光度计来进行测试。只有当阴性和阳性对照均有可接受的光密度读数时，阳性结果才是有效的。
单克隆筛选的几种方法
单克隆筛选是新一代细胞克隆筛选和挑取技术，细胞克隆筛选系统能够更少时间里，自动化筛选并挑取更高水平表达的细胞克隆，拥有5组荧光通道，可以同时使用3组，细胞克隆筛选系统避免有限稀释，快速高效筛选挑取杂交瘤克隆，建立稳定细胞株，干细胞及特殊表面标记细胞挑取及昆虫细胞筛选挑取。 单克隆筛选方法有有限
酶联免疫吸附法的原理和操作办法
1、原理 对 E.coli O157：H7 抗原具有高度特异性的多克隆酶联免疫专有抗体被绑在酶标板的微孔内，加入增菌后的测试样品和阳性质控后，如有 E.coli O157：H7 ，抗原存在则与微孔内的抗体结合形成抗体抗原复合物，没参加反应的物质被冲洗掉。加入碱性磷酸酶抗体接合剂，使 E.
转化克隆的筛选和鉴定——酶切鉴定法
利用转化后宿主菌所获得的抗菌素抗性性状筛选出获得质粒的菌落克隆。再从这些菌落中鉴定出质粒上带有外源基因插入片断的克隆菌落。实验材料重组大肠杆菌试剂、试剂盒LB培养基氨苄青霉素乙醇质粒提取试剂盒限制性内切酶缓冲液甘油硫酸镁Tris盐酸琼脂糖仪器、耗材试管记号笔酒精灯冰箱牙签旋涡混合器镊子微量移液取样器
纯合克隆筛选
纯合克隆筛选 1．融化杂合突变ES细胞，ES/LIF培养液培养，每2～3天传代，实验开始把细胞接种到三个100mm铺有凝胶碟皿中，每皿接种1～2×106细胞。为筛选需用一个以上的ES杂合突变细胞系，因不同细胞系的转化效率不全相同，另外对检测细胞表型也需如此。 2．每皿细胞分别加入1.0～2.0
纯合克隆筛选
1．融化杂合突变ES细胞 ，ES/LIF培养液培养，每2～3天传代，实验开始把细胞 接种到三个100mm铺有凝胶碟皿中，每皿接种1～2×106 细胞 。为筛选需用一个以上的ES杂合突变细胞系，因不同细胞系的转化效率不全相同，另外对检测细胞表型也需如此。 2．每皿细胞分别加入1.0～2.0m
大量细菌克隆的杂交方法筛选实验
这一方法由 Hanahan 和 Meselson (1980, 1983)报道，主要用来处理由质粒 cDNA 文库转化的细菌。将转化菌的混合物或者一份扩增的 cDNA 文库直接置于不含洗涤剂的硝酸纤维素膜或尼龙膜上，复制膜用膜-膜接触的方法制备。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方
大量细菌克隆的杂交方法筛选实验
实验方法原理 这一方法由 Hanahan 和 Meselson (1980, 1983)报道，主要用来处理由质粒 cDNA 文库转化的细菌。将转化菌的混合物或者一份扩增的 cDNA 文库直接置于不含洗涤剂的硝酸纤维素膜或尼龙膜上，复制
大量细菌克隆的杂交方法筛选实验
实验方法原理 这一方法由 Hanahan 和 Meselson (1980, 1983)报道，主要用来处理由质粒 cDNA 文库转化的细菌。将转化菌的混合物或者一份扩增的 cDNA 文库直接置于不含洗涤剂的硝酸纤维素膜或尼龙膜上，复制膜用膜-膜接触的方法制备。采用这一方法，每块 150