广东检验检疫局生物安全三级实验室开展检学研合作纪实
2月4日，在广东检验检疫局生物安全三级实验室内，一场别开生面的研讨会正在举行。就在同一天，“呼吸疾病国家重点实验室高致病性病原微生物研究室”挂牌运作，该高致病性病原微生物研究室的成立，是检验检疫部门与社会著名研究所合作共建、互利双赢、强强合作的一项创新举措。 “小实验室也能办大事” 广东局生物安全三级实验室是质检系统唯一资质齐全、正常运行的生物安全三级实验室。“检验检疫生物安全实验室的工作已超出了单纯的检测范畴，做了大量扎实有效的工作，为政策制定和新药研发等提供了依据，为‘探索未知’打下了坚实基础。”在研讨会现场，钟南山院士用“执着可贵、精神可贵、协作可贵”高度评价广东局生物安全三级实验室从无到有、从量到质的奋斗历程，称赞其“小实验室也能办大事”。为充分利用现有资源，实现跨领域发展，发挥检验检疫服务社会、服务民众的作用，广东局将目光投向了系统外。 “我们在合作过程中坦诚务实，不存私心，能够设身处地为对方着想。因此，虽然......阅读全文
新型冠状病毒实验室生物安全指南
（一）病毒培养： 指病毒的分离、培养、滴定、中和试验、活病毒及其蛋白纯化、病毒冻干以及产生活病毒的重组实验等操作。上述操作应当在生物安全三级实验室内进行。使用病毒培养物提取核酸，裂解剂或灭活剂的加入必须在与病毒培养等同级别的实验室和防护条件下进行，裂解剂或灭活剂加入后可比照未经培养的感染性
美“生物战实验室”参与对抗埃博拉病毒
一个美国顶级生物战部门正在研发致命病毒埃博拉的治疗措施，并可能将于两年内投入临床使用。 截至8月4日，埃博拉病毒已经在西非导致800多人死亡。美国疾病控制中心将其与炭疽、肉毒中毒、黑死病以及天花一同列为“一类生物恐怖病毒”。埃博拉病毒在几内亚肆虐期间，忙碌的医务工作者 该生物战部门位于马里兰
病毒中和实验
实验方法原理 病毒的复制需要宿主细胞供应原料、能量和复制场所，因此病毒必须在活的细胞内复制增殖。病毒进入机体后，吸附于敏感细胞的表面，然后通过穿入，脱壳，侵入细胞，进行病毒复制和装配，并引起机体感染。特异性的抗病毒抗体（中和抗体）与病毒结合之后，使病毒失去吸附、穿入宿主细胞的能力，从而阻止了病毒在宿
什么是病毒？病毒是不是微生物？
病毒是生物界中最小的一类生物,没有完整的细胞结构、必须寄生在活细胞内、并且繁殖方式是“复制”的非细胞型生物,它依靠掠夺别人的营养生存,危害大。病毒的直径在10～300nm,因而大多数病毒只能在电子显微镜下看到，所以病毒是微生物的一种。
病毒RNA提取实验
病毒RNA提取可以：（1）用于RNA病毒复制机制研究；（2）用于反向遗传学研究；（3）用于分子病毒学其他研究。实验方法原理大多植物病毒RNA 为单链RNA ，并且其极性与mRNA 极性相同，植物病毒RNA 提取较为简单，一般使用酚氯仿即可获得满意结果。实验材料TMV病毒液试剂、试剂盒TE-饱和酚:氯
病毒RNA提取实验
TE-饱和酚/氯仿提取法 实验方法原理 大多植物病毒RNA 为单链RNA ，并且其极性与mRNA 极性相同，植物病毒RNA 提取较为简单，一般使用酚氯仿即可获
慢病毒实验程序
含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化，提取慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。 3） 培养 48hrs - 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。 4） 病毒的纯化和浓缩。 5） 分装、- 80 ℃保存。 6） 滴度测定目的基因检定，并出具检测报告。
病毒的分离实验
实验步骤 标本的采集：病毒分离常用的标本有血液，脑脊液，粪便，直肠拭子，咽喉含漱液，咽拭子，尸检组织等。所取标本的种类视疾病性质而异。如呼吸道疾病常取咽喉洗液，咽拭子；消化道疾病取粪便，直肠拭子；神经系统疾病取脑脊液，粪便等。采取标本时应避免污染，有些标本如粪便，咽喉洗液，虽本身含有大量杂菌，但为保
痘苗病毒纯化实验
大规模纯化 实验方法原理 对于很多研究，部分纯化的病毒就足够了（进行到本实验步骤 14）， 如果是纯化 MVA 病毒，则不能用胰酶消化，也不能用 CEF 细胞
痘苗病毒纯化实验
实验方法原理 对于很多研究，部分纯化的病毒就足够了（进行到本实验步骤 14）， 如果是纯化 MVA 病毒，则不能用胰酶消化，也不能用 CEF 细胞或 BHK-21 细胞代替 HeLa 细胞。实验材料 痘苗病毒储液HeLa S3 细胞（悬浮培养）试剂、试剂盒 胰酶Tris • Cl蔗糖仪器、耗材 旋转
慢病毒包装实验
慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后，可用于：（1）感染原代培养细胞；（2）制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株；（3）in vivo的基因操作、转基因动物，特别是转基因大鼠的制备。实验方法原理慢病毒是反转录病毒的一种，具有反转录病毒的基本结构和特性：整合入宿主细胞基因组，长期表达，可用于转基因动
病毒RNA提取实验
实验方法原理 大多植物病毒RNA 为单链RNA ，并且其极性与mRNA 极性相同，植物病毒RNA 提取较为简单，一般使用酚氯仿即可获得满意结果。实验材料 TMV病毒液试剂、试剂盒 TE-饱和酚:氯仿氯仿NaAc乙醇TE缓冲液双菌水仪器、耗材 冷冻台式离心机低温真空干燥仪电泳仪电泳槽实验步骤 一、实验
病毒的滴定实验
1. 以维持液（0.5% 水解乳蛋白Hank's 液）将病毒作连续10 倍稀释（每一稀释度换一新吸管）。2. 如选择滴定的稀释度为l0-6～10-8，则于试管架上排列8 支试管。l0-1～10-5共5 支管，每管如入1.8 毫升维持液；l0-6～10-8共3 管，每支加入4.5
慢病毒包装实验
实验材料 病毒试剂、试剂盒 无血清培养基脂质体胰酶含血清的培养基DMEM仪器、耗材 EP管6孔板CO2培养箱高速离心机-80°C冰箱实验步骤 以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293T细胞。 1. 取1.5ml灭菌EP管，加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血
痘苗病毒纯化实验
痘苗病毒通常采用蔗糖密度梯度离心的方法纯化。纯化的病毒可用于制备痘苗病毒 DNA ，用于不允许存在感染细胞蛋白污染的研究中，同时也可以用作高滴度的病毒储液。对于大规模的纯化（至少 1 L 的培养物），最好的方法是用 HeLa 细胞悬液作为感染的对象，而不要用单层培养的细胞。内容来源于《精编分子生物学
病毒的保存实验
实验方法原理 含水物质首先经过冷冻，然后在真空中使水分升华，干燥，在这种低温、干燥和缺氧环境下，微生物的生长和代谢暂时停止，因而保存期较长，便于运输。该法需要冻干机等设备，并需保护剂。保护剂一般采用脱脂牛奶或血清等。保护剂的作用机理是在冷冻干燥的脱水过程中稳定病毒结构，防止细胞膜受冷冻或干燥而造成损
慢病毒包装实验
慢病毒包装实验 实验方法原理 慢病毒是反转录病毒的一种，具有反转录病毒的基本结构和特性：整合入宿主细胞基因组，长期表达，可用于转基因动物制备；但也有不同于反转
生物安全实验室避免病毒空气传染空间干雾灭菌系统
【概述】生物安全实验室应用于涉及具有传染可能性的微生物实验。实行生物安全的目的是在研究各种对人或动物有致病货生命危险的病源微生物时，保护工作者、合作者和实验室支持人员不受传染，同时保护产品和环境不受污染。洁净室内空气传染是不可忽视的一个重要传播环节，就算在严格的生物安全柜里操作也难以避免病毒气溶胶以
美国家生物安全实验室一瓶致命病毒神秘失踪
美国得克萨斯州大学医学院26日发表声明证实，一小瓶可导致出血热的致命病毒从加尔维斯顿国家生物安全实验室不翼而飞，官方称其具有潜在危害。 失踪的小瓶里有不到四分之一茶匙的具有传染性的瓜纳里多(Guanarito)病毒，由其引发的出血热已在委内瑞拉造成致命案例。 该实验室科学主任韦弗(S
关于生物病毒的概念简介
狭义的生物病毒是1种独特的传染因子，它是能够利用宿主细胞的营养物质来自主地复制自身的DNA或RNA、蛋白质等生命组成物质的微小生命体。而广义的病毒复杂得多，包括拟病毒、类病毒和病毒粒子（virion），其中拟病毒和类病毒仅是1条简单的ssRNA链，virion是一种类似酶的蛋白分子。因此生物病毒
病毒包装技术——病毒包装实验经验总结
第一，细胞状态、载体系统、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等）是三个主要影响病毒质量的因素。第二，细胞状态需要有丰富的细胞培养经验来判断，比如包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立体感是否好、铺板均匀细胞密度适中否等性状。另外转染时细胞的密度要十分注意，一般在
病毒中和实验_固定抗血清－稀释病毒法
实验材料已知标准的抗病毒血清 (20抗体单位 0. 1 ml)试剂、试剂盒已知阴性血清 (56℃ 30 min 灭活）宿主：敏感细胞、敏感动物、鸡胚仪器、耗材细胞培养板水浴锅细胞培养箱实验步骤（以细胞培养为例）：①用细胞维持液连续 10倍稀释病毒分离物10-1~10-8);②取 0. 6ml不同浓度
病毒中和实验_固定病毒－稀释抗血清法
中和试验 (neutralization test)是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物，使病毒与抗体相互反应，再将混合物接种到敏感的宿主体内，然后测定残存的病毒感染力的一种方法。凡是能与病毒结合，并使其失去感染力的抗体称为中和抗体。因为病毒要依赖于活的宿主系统复制增殖，因此，中和试验必须
保存有埃博拉病毒的美国顶级生物防御实验室安全失效
据Science8月6日报道，美国最顶级的生物防御实验室——美国陆军传染病研究所，因未能通过安全检查，而被暂停工作。埃博拉、天花、鼠疫、炭疽杆菌等等这个星球最恐怖的病菌，都保存在这个实验室中。 美国亚特兰大疾病控制和预防中心于今年6月份进行的一项检查发现，美国陆军传染病研究所未能对其生物防御实
日本启用生物安全四级实验室－可处理埃博拉病毒
据日媒报道，日本厚生劳动大臣盐崎恭久本月7日依据《感染症法》将东京都武藏村山市的国立感染症研究所村山厅舍内的实验室指定为生物安全四级实验室(BSL-4)。该实验室能处理埃博拉病毒等高危病原体。 日媒称，是日本国内唯一一处被指定为四级的实验室。盐崎当天在内阁会议后的记者会上称“运营
美实验室生物安全事件：工作人员接触埃博拉病毒
北京时间12月25日消息，据国外媒体报道，美国疾病控制与预防中心的一位技术人员有可能暴露于埃博拉病毒中，当时他将一份本应用于研究的病毒样本送到了错误的实验室，之后又出现了一系列不当的处理。 美国疾病控制与预防中心(CDC)在一份声明中说，当时，有一份埃博拉实验的病毒材料从高安全性的生物安全实验
重磅！欧洲新冠病毒来自美国德特里克堡生物实验室！
本月稍早时间，英美媒体报道称，意大利和荷兰的两个实验室对少量在新冠疫情暴发前采集的血液样本进行了重新检测，发现了通常在新冠病毒感染者体内出现的抗体。意大利米兰国家肿瘤研究所科学主管乔瓦尼·阿波洛内认为，这个结果说明，在意大利新冠病毒“很有可能”早在公认的时间点之前，就已在“一定限度内”传播了。
痘苗病毒DNA提取实验
如果提取的痘苗病毒DNA用于转染，则应在蛋白酶 K 消化和苯酚抽提后分离。具体方法见本实验。实验材料纯化的痘苗病毒试剂、试剂盒Tris•Cl 溶液SDS蔗糖溶液蛋白酶 K用 50 mmol／L Tris • Cl 溶液平衡的苯酚1：1苯酚氯仿1 mol／L 乙酸钠乙醇仪器、耗材分光光度计Sorval
EB病毒的实验诊断
EBV分离培养困难，一般用血清学方法辅助诊断。 在有条件实验室可用核酸杂交和PCR等方法检测细胞内EBV基因组及其表达产物。
病毒免疫荧光实验
实验方法原理 实验材料 待检测病毒试剂、试剂盒 丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯仪器、耗材 玻片实验步骤 1. 培养细胞小玻片标本的制备 根据所检测病毒种类，选择敏感细胞进行培养，如乙型肝炎病毒用乳地鼠肾细胞 (BHK21 细胞）培养，森林脑炎病毒用绿猴肾细胞 (Vero 细胞）培养