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人造锌指蛋白的设计和合成实验

实验材料 寡核苷酸引物试剂、试剂盒 氨苄青霉素磷酸缓冲生理盐水Tris-氯化氢SDS-PAGE仪器、耗材 DNA 测序仪色谱设备实验步骤 本节描述的方法大概包括:( 1 ) 设计的锌指蛋白的表达和纯化。( 2 ) 人工锌指设计技巧。( 3 ) 人工锌指构建步骤。( 4 ) 锌指结构和金属配位的确认。3.1 人工锌指蛋白的表达和纯化设计的人工锌指蛋白的表达和纯化方法在 3.1.1 和 3.1.6 节描述,包括:( 1 ) 表达载体 pEV-3b 的构建;( 2 ) 蛋白质以可溶和不可溶形式表达;( 3 ) 用阳离子交换和凝胶过滤色谱纯化蛋白;( 4 ) 失活结构的再折叠;( 5 ) 锌指结构和金属配位的确认。3.1.1 pEV-3b 表达载体pEV-3b 表达载体是基于 pET3b 表达载体(Novagen;图 5.1 )。这个载体被改造过,以生成有用的多克隆位点,用于研究锌指基因。( 1 ) 从 pET3b 中切除 EcoRI/......阅读全文

有机合成人员在美国做有机化学实验的经历分享

  本文来自论坛网友自述,小编摘此文只为给大家提供一种视角,看看在中国、在美国有机合成人员是怎样的一种人生体验。相比自己现在的工作状态是怎样的一种影响呢?是否有一些值得借鉴的东西?从实验记录、如何定量反应、探讨对照实验的设计、优化工艺的顺序这四个个方面开始说起...  我在美国做有机化学实

多肽合成仪选购指南

  一、科研单位选型考虑因素  1、多肽合成仪对实验研究的帮助  对于多肽合成化学反应,使用多肽合成仪可避免人手工操作对人体的伤害(伤害来源有试剂腐蚀)  由于程序化设定,可保证每步骤偶合反应的充分性以及实验整体的稳定性  可以合成难肽以及超长肽(制造商需要提供其使用研究型多肽合成仪合成多肽的检测报

实验室滴定液配制时有哪些注意事项

一、滴定液的配制注意事项 1.所用溶剂“水”,系指蒸馏水或去离子水,在未注明有其他要求时,应符合中国药典“纯化水”项下的规定; 2.采用间接配制法时,溶质与溶剂的取用量均应根据规定量进行称取或量取,并使制成后滴定液的浓度值应为其名义值的0.95~1.05; 3.采用直接配制法时,其

碳家族迎来新成员:预言的T—碳在实验室诞生

  T—碳是中国科学院大学教授苏刚团队6年前通过理论计算预言的一种新型三维碳结构。日前,该碳结构被西安交大和新加坡南洋理工大学联合团队在实验上成功合成,证实了苏刚团队的理论预言,使T—碳成为可与石墨和金刚石比肩的碳的另一种三维新结构,从而为碳家族增加了新成员。   T—碳  2011年,苏刚指导博士

cDNA文库构建技术-cDNA链的反转合成

实验概要构建cDNA文库是一种获得目标基因并进一步进行基因重组,基因克隆的重要方法,而在该文库构建中有mRNA 逆转录出cDNA是一步极为关键的操作。mRNA的逆转录主要由MMLV、AMV两种逆转录酶催化合成cDNA,在这个逆转录过程中,模板mRAN及逆转录酶是两个最重要的影响因素。对于mR

DNA合成:你应该知道的秘密

  说起DNA合成,几位前辈师兄师姐们犹会提起上世纪90年代世行贷款买仪器,好些单位甚至医院都赶时髦买了DNA合成仪,买回来才发现自己那点合成需求和费用,委实买得起用不起,那昂贵的设备成了摆设。彼时国外DNA合成虽然质量好纯度高,可寄回来海关不好过,时间上实在伤不起,幸亏国内迅速崛起的几家

可燃冰的发现历程

  可燃冰的发现   19世纪30年代初,人们开始注意到天然气输气管线中形成的可燃冰(天然气水合物)。因为水合物造成的天然气输气管道堵塞问题给天然气工业带来许多麻烦。1934年,前苏联在西伯利亚地区被堵塞的天然气输气管道里首先发现了天然气水合物。同年,美国学者Hammerschmidt发表了水合物

国内外多肽合成仪主要品牌及选购指南(四)

ACT    美国ACT公司(ADVANCED CHEMTECH),在2007年推出了106通道多肽合成仪,是全球唯一一款全自动多通道异步多肽合成仪,相比其它公司的多通道多肽合成仪,这款合成仪添加氨基酸和各种试剂不需要任何管路和电磁阀,仪器设计更加简单合理,是目

化学合成反应器

化学合成反应器取代圆底烧瓶用直观的化学合成反应器取代圆底烧瓶、夹套玻璃反应器、冰浴、油浴及冷却器。 创新型加热和冷却技术可精确控制和保持反应温度,从而避免杂质并确保一致的工艺开发。 实验室反应器平台通过触摸屏进行操作,并可记录整个实验过程中的所有数据,因此研究人员能够做出更明智的决策。

一个山东教授5个亿的创富神话

  在中国要想发家致富,干哪一行好?经商、金融或者IT?少有人会说,搞科研也能赚大钱。  2017年3月,山东理工大学毕玉遂教授研究团队的无氟氯聚氨酯发泡剂专利,以5亿人民币的价格授权给了一家国内企业,创了记录。  在今年2月28日发布的科技成果合同金额排名中,凭借一己之力,毕玉遂让山东理工大学在所

学术文献/多肽合成仪

1. “Amino Acid Analogs of an Insect Neuropeptide Feature Potent Bioactivity and Resistance 

GCH1基因、BH4对疼痛的作用机制研究进展

  疼痛是一种由组织损伤产生的令人不愉快的感觉和情绪体验。药物治疗疼痛,存在长期服药、疗效有限及副作用大等问题。研究表明,疼痛是遗传和环境因素相互作用的结果,疼痛反应具有遗传学特征和复杂性。  疼痛敏感性增加和慢性疼痛患病率下降由部分基因调控。其中,四氢生物蝶呤(tetrahydrobiopteri

RNAi 实验介绍

1. RNAi 介绍 RNA 干扰(RNAi:RNA interference)是由诺贝尔生理学/医学奖得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello(1)在线虫实验中发现的,2001 年 Elbashir 等人发现哺乳类的 siRNA 可以进行 RNAi 诱导

RNAi 实验介绍

1. RNAi 介绍RNA 干扰(RNAi:RNA interference)是由诺贝尔生理学/医学奖得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello(1)在线虫实验中发现的,2001 年 Elbashir 等人发现哺乳类的 siRNA 可以进行 RNAi 诱导。这个方法与常规方

cDNA文库构建技术-cDNA链的反转合成

构建cDNA文库是一种获得目标基因并进一步进行基因重组,基因克隆的重要方法,而在该文库构建中有mRNA 逆转录出cDNA是一步极为关键的操作。mRNA的逆转录主要由MMLV、AMV两种逆转录酶催化合成cDNA,在这个逆转录过程中,模板mRAN及逆转录酶是两个最重要的影响因素。对于mRNA来讲,一

天大化学再造酵母走向应用 自然通讯 研究长文同期发表

  本站讯 2018年5月22日,天津大学元英进教授带领的合成生物学研究团队在《自然通讯》期刊同期发表三篇研究长文,文中介绍了精确控制基因组重排技术等一系列研究成果。该成果填补了基因组结构变异的技术空白,提高了细胞工厂的生产效率,加速了微生物的进化和生物学知识的发现。这是继人工合成酵母染色体打破非生

俄科学家将合成第117号新元素

  7月27日夜间,位于莫斯科郊外的杜伯纳国际联合核研究所的专家们启动新元素合成实验,如果顺利的话,实验结束时将会合成门捷列夫元素周期表上第117号新元素。   该所专家对媒体表示,他们的实验是在重离子加速器中用钙48原子轰击锫249,以获得新元素。该所核反应实验室主任谢尔盖·德米特里耶夫表示:“

实验室通风柜的选择及导购

第一步:通风柜的主要功能通风柜的功能中最主要的是排气功能,在化学实验室中,实验操作时产生各种有害气体、臭气、湿气以及易燃、易爆、腐蚀性物质,为了保护使用者的安全,防止实验中的污染物质向实验室扩散,在污染源附近要使用通风柜,以往通风柜使用台数较少,只在特别有害且危险的气体及产生大量热的实验中使用。通风

微生物所在kinamycin的生物合成研究方面取得进展

  Kinamycin类抗生素,包括kinamycin、fluostatin和lomaiviticin,具有显著的抑菌以及抗肿瘤活性。从结构上看这类化合物包括三个典型特征:高度氧化的A环、苯并芴的B环,以及B环的重氮基团取代。据报道这三个官能团都与其药物活性有关,但合成机制未知。  中国科学院微生物

如何正确选择通风柜?

通风柜的简介 通风柜是实验室设备中必不可少的一种。在实验室中起到排风和换气的功效。透视窗采用钢化玻璃,可左右或上下移动。供人操作。下柜采用实验边台样式,上面有台面,下面是柜体。台面可安装小水杯和龙头。通风柜的材料由多种的,全钢、钢木、全木、铝木、塑钢、PVC结构等,其台面是直接与操作者接触的地方

实验室通风设备的设计

新建的实验室设计有空调,因此通风柜的使用台数必须纳入空调系统的计划。由于通风柜在生化实验室中占有非常重要的位置,从改善实验室环境、改善劳动卫生条件,提高工作效率等方面考虑,通风柜的使用台数日益增多。随之而来的是通风管道,配管、配线、排风等都成为实验室建设的重要课题。使用通风柜的最大目的是排出实验中产

实验室通风柜里那些你不知道的事

  主要功能  通风柜的功能中最主要的是排气功能,在化学实验室中,实验操作时产生各种有害气体、臭气、湿气以及易燃、易爆、腐蚀性物质,为了保护使用者的安全,防止实验中的污染物质向实验室扩散,在污染源附近要使用通风柜,以往通风柜使用台数较少,只在特别有害且危险的气体及产生大量热的实验中使用。通风柜只担负

实验室通风柜可能存在的安全隐患!

通风柜的功能中zui主要的是排气功能,在化学实验室中,实验操作时产生各种有害气体、臭气、湿气以及易燃、易爆、腐蚀性物质,为了保护使用者的安全,防止实验中的污染物质向实验室扩散,在污染源附近要使用通风柜,以往通风柜使用台数较少,只在特别有害且危险的气体及产生大量热的实验中使用。通风柜只担负实验台的辅助

实验用通风柜的使用注意事项

通风柜的主要功能:通风柜的功能中最主要的是排气功能,在化学实验室中,实验操作时产生各种有害气体、臭气、湿气以及易燃、易爆、腐蚀性物质,为了保护使用者的安全,防止实验中的污染物质向实验室扩散,在污染源附近要使用通风柜,以往通风柜使用台数较少,只在特别有害且危险的气体及产生大量热的实验中使用。通风柜只担

通风柜分类有哪些?如何选择适合的实验室通风设备?

常用的实验室通风设备主要有:通风柜、原子吸收罩、万向排气罩、桌面式通风罩等。             (1)通风柜是安全处理有害、有害气体或蒸汽的通风设备,作用:用来捕捉、密封和转移污染物以及有害气体,放置其逃逸到实验室内,这样通过吸入工作区域的污染

生化实验室通风柜的选择及使用注意事项

  建设现代化的生化实验室是个综合的系统工程。在装备各种仪器设备及其配套设施的同时,既要考虑供电、给水、排水、送风、排风净化排污等要求,还要考虑到对人员、物体、周边环境的安全性,噪音、异味、视觉环境的舒适性,仪器设备的可操作性、功能性,以及信息处理的便捷性。因此,现代化的生化实验室必须有最

生化实验室通风柜的选择及使用注意事项

建设现代化的生化实验室是个综合的系统工程。在装备各种仪器设备及其配套设施的同时,既要考虑供电、给水、排水、送风、排风净化排污等要求,还要考虑到对人员、物体、周边环境的安全性,噪音、异味、视觉环境的舒适性,仪器设备的可操作性、功能性,以及信息处理的便捷性。因此,现代化的生化实验室必须有最佳的设计和高品

浅谈实验室通风的目的和要求有哪些?

实验室通风与舒适性空调系统的通风设计要求不同,主要目的是提供安全、舒适的工作环境,减少人员暴露在危险空气下的可能。通风主要解决的是工作环境对实验人员的身体健康和劳动保护问题。实验室通风要求新风全部来自室外,然后100%排出室外,通风柜的排气不在室内循环。化学实验室换气要求每小时大于10次,物理实验室

通风柜的功能与安全性

通风柜的功能与安全性 通风柜的功能与安全性 建设现代化的生化实验室是个综合的系统工程。在装备各种仪器设备及其配套设施的同时,既要考虑供电、给水、排水、送风、排风净化排污等要求,还要考虑到对人员、物体、周边环境的安全性,噪音、异味、视觉环境的舒适性,仪器设备的可操作性、功能性,以及信息处理的

多肽合成仪设备对科研研究的应用价值

  世界上diyi台真正意义上的多肽合成仪出现在1960年代末至1970年代初期,它是利用氮气鼓泡来对反应物进行搅拌,用计算机程序控制来实现有限度的自动合成。即为后来总结归纳出的diyi代多肽合成仪。多肽合成仪的问世大大促进了多肽科学的发展。   多肽固相合成技术的发明同时促进了肽合成的自动化。