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外切核酸酶Ⅲ消化产生多组嵌套缺失突变体

逐步地从靶 DNA 的一端或另一端删除多个寡核苷酸的嵌套式缺失突变方法被用来确定功能性顺式调控元件的边界,早先曾作为指导 DNA 测序的模板。该方法依赖于核酸酶,这些核酸酶均以可预测的方式消化 DNA, 其中外切核酸酶 HI 是目前最好的。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒dNTP 溶液乙醇外切核酸酶Ⅲ缓冲液核酸酶 S1 停止反应混合液酚氯仿醋酸钠外切核酸酶ⅢKlenow 混合物连接混合物核酸酶 S1 反应混合物限制性内切酶凝胶靶 DNA仪器、耗材微量离心管或带 U-型孔的微量滴定板水浴装置实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的成分清参阅附录 1。将贮存液稀释到合适的浓度。dNTP 溶液中含有 dATP、dGTP 和 dTTP, 每种 dNTP 浓度为 0.5 mmol/L,溶在 25 mmol/L Tris-Cl(pH8.0) 中乙醇(100%, 冰......阅读全文

外切核酸酶的介绍

  一、核酸外切酶  有些核酸酶能从DNA或RNA链的一端逐个水解下单核苷酸,所以称为核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶称为脱氧核糖核酸外切酶,只作用于RNA的核酸外切酶称为核糖核酸外切酶;也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶从3′端开始逐个水解核苷酸,称为3′→5′外切酶,例

外切核酸酶的种类

20世纪70年代,在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶,能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序,称为限制性核酸内切酶(restrictionendonuclease,简称限制酶)。当外源DNA侵入细菌后,限制性内切酶可将其水解切成片段,从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达,而细菌本身的DNA

外切核酸酶的种类

  为限制性核酸内切酶(restrictionendonuclease,简称限制酶)。当外源DNA侵入细菌后,限制性内切酶可将其水解切成片段,从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达,而细菌本身的DNA由于在该特异核苷酸顺序处被甲基化酶修饰,不被水解,从而得到保护。  限制性核酸内切酶的研究和应用发展

外切核酸酶的基本介绍

  核酸分解的第一步是水解核苷酸之间的磷酸二酯键,在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的核酸酶。不同来源的核酸酶,其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA,称为核糖核酸酶(RNase),有些核酸酶只能作用于DNA,称为脱氧核糖核酸酶(DNase),有些核酸酶专一性较低,既能作用于RNA

外切核酸酶的基本介绍

一、核酸外切酶有些核酸酶能从DNA或RNA链的一端逐个水解下单核苷酸,所以称为核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶称为脱氧核糖核酸外切酶,只作用于RNA的核酸外切酶称为核糖核酸外切酶;也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶从3′端开始逐个水解核苷酸,称为3′→5′外切酶,例如,蛇毒

关于外切核酸酶的种类介绍

  20世纪70年代,在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶,能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序,称为限制性核酸内切酶(restrictionendonuclease,简称限制酶)。当外源DNA侵入细菌后,限制性内切酶可将其水解切成片段,从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达,而细菌本身的D

外切核酸酶的基本信息

核酸分解的第一步是水解核苷酸之间的磷酸二酯键,在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的核酸酶。不同来源的核酸酶,其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA,称为核糖核酸酶(RNase),有些核酸酶只能作用于DNA,称为脱氧核糖核酸酶(DNase),有些核酸酶专一性较低,既能作用于RNA也能

外切核酸酶的基本信息

核酸分解的第一步是水解核苷酸之间的磷酸二酯键,在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的核酸酶。不同来源的核酸酶,其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA,称为核糖核酸酶(RNase),有些核酸酶只能作用于DNA,称为脱氧核糖核酸酶(DNase),有些核酸酶专一性较低,既能作用于RNA也能

外切核酸酶Ⅲ的基本信息

中文名称外切核酸酶Ⅲ英文名称exonuclease Ⅲ;exoⅢ定  义编号:EC 3.1.11.2。沿3′→5′方向催化脱氧核糖核酸外切,产生5′-磷酸单核苷酸的酶。此酶优先水解双链DNA,对DNA链上无嘌呤核苷酸附近的位点具有核酸内切酶的活性。大肠杆菌外切脱氧核糖核酸酶Ⅲ是其中一种。应用学科生物

外切核酸酶Ⅲ的基本信息

中文名称外切核酸酶Ⅲ英文名称exonuclease Ⅲ;exoⅢ定  义编号:EC 3.1.11.2。沿3′→5′方向催化脱氧核糖核酸外切,产生5′-磷酸单核苷酸的酶。此酶优先水解双链DNA,对DNA链上无嘌呤核苷酸附近的位点具有核酸内切酶的活性。大肠杆菌外切脱氧核糖核酸酶Ⅲ是其中一种。应用学科生物