RAPD分析的原理及操作技术

1 目的分子标记是一类建立在分子水平上的遗传标记,它同样具有遗传标记的两个特点,即可遗传性和可识别性。广义的分子标记包括同工酶和DNA分子标记两类,狭义的分子标记则仅指后者。DNA分子标记通常是一些小分子量的DNA片段(几十到2000bp左右),它们大量存在于真核生物的基因组内,能够通过特定的技术和方法进行检测。多数情况下,这些DNA片段(即分子标记)本身并不是基因,也不是基因的一个部分,但它们往往与目的基因(目的性状)有连锁关系。利用这种连锁关系(越紧密越好),就可以对目的基因进行识别和分离、对目的性状进行早期预选、对优良基因进行聚合,从而大大促进园艺植物的育种工作。DNA分子标记的种类很多,常用的有RAPD(随机扩增多态性DNA)、RFLP(限制性片段长度多态性)、AFLP(扩增片段长度多态性)、SSR(简单序列重复)等,本实验主要介绍RAPD分析的实验方法,通过实验了解RAPD分析的基本原理,认识和掌握RAPD分析在园艺育......阅读全文

RAPD

一、 材料  不同来源的DNA(50ng/ul)。二、设备  PCR仪,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,电泳装置。三、试剂  1、随机引物(10mer) (5umol/L):购买成品。  2、Taq酶:购买成品。  3、10xPCR 缓冲液:配方见第八章。  4、MgCl2 :25

RAPD技术

实验概要RAPD(Random  Amplified Polymorphic  DNA,随机扩增的多态性DNA)是建立于PCR实验基础上的检测基因组DNA多态性的实验技术。从1990年Williams首次应用该技术到今,短短几年间,该技术由于具有快速、简便、耗资相对较少,所需设备较少的特点,因此发展

RAPD操作要点

一、 材料  不同来源的DNA(50ng/ul)。   二、设备   PCR仪,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,电泳装置。   三、试剂   1、随机引物(10mer) (5umol/L):购买成品。   2、Taq酶:购买成品。   3、10xPCR 缓冲液:配方见第八章。  4

RAPD和ISSR技术

DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(Random amplified polymorphic DNA ,随机扩增的多态性DNA)。尽管RAPD技术诞生的时间很短, 但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及

RFLP和RAPD技术

RFLP和RAPD技术概 述   DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种(个体)基

RAPD标记技术

实验概要运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly  amplifiled polymorphic  DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上,它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体)

RAPD分析技术2

(2)扩增结果差,条带模糊或难以辨认。――更换Taq聚合酶缓冲液。――检查引物(使用另外一个引物,或者将引物末端标记,在 16% 6mol/L尿素聚丙烯酰胺胶上电泳检测)。――检查Taq聚合酶活性(与不同批量的酶作比较)。――改变DNA浓度。(3)高相对分子质量产物弥散状分布>4kb。――降低DNA

RAPD和ISSR技术

DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(Random amplified polymorphic DNA ,随机扩增的多态性DNA)。尽管RAPD技术诞生的时间很短, 但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及快

RAPD和ISSR技术

DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为 RAPD(Random amplified polymorphic DNA ,随机扩增的多态性DNA)。尽管RAPD技术诞生的时间很短, 但由于其独特的检测DNA多态性的

植物RAPD分析技术

RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA),意为随机扩增多态性DNA,是利用PCR技术进行随机扩增,把扩增的DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳,根据DNA条带的多态性来反应模板DNA序列上的多态性。RAPD同AFLP、SSR等分子标记一样都基于PCR扩增,只是RAPD

RAPD分析技术1

1 导论聚合酶链式反应(PCR)以其优越性极大地影响到了分子生物学的几乎所有领域,并以其基本程序和DGGE(denaturing gradient gel electrophoresis),开发出多种检测核苷酸变异的方法。 RAPD(Random Amplifed Polymorphic D

RFLP技术和RAPD技术3

一个较为详细的遗传连锁图谱不仅对该物种的遗传学基础研究有重要意义,同时对该物种的育种研究也很有帮助。Potlethwait和Stephen 等用RAPD技术进行斑马鱼遗传连锁图谱的制作。Liu把RAPD技术应用到鲶鱼基因图谱研究中。孙效文等建立了鲤鱼的遗传连锁图谱。图谱有RAPD分子标记56个,

RFLP技术和RAPD技术1

第一节 概 述DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切

RFLP技术和RAPD技术2

第三节 RAPD技术一、 材料不同来源的DNA(50ng/ul)。二、设备PCR仪,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,电泳装置。三、试剂1、随机引物(10mer) (5umol/L):购买成品。2、Taq酶:购买成品。3、10xPCR 缓冲液:配方见第八章。4、MgCl2 :25mm

RAPD标记技术的原理

RAPD标记(Random amplifiedpolymorphim DNA , RAPD)是由美国人Williams和Welsh等于1990年利用PCR技术发展起来的一种DNA多态性标记。它是利用随机引物对目的基因组DNA进行PCR扩增,产物经电泳分离后显色,分析扩增产物DNA片段的多态性,此即反

RAPD分析的原理及操作技术

1 目的分子标记是一类建立在分子水平上的遗传标记,它同样具有遗传标记的两个特点,即可遗传性和可识别性。广义的分子标记包括同工酶和DNA分子标记两类,狭义的分子标记则仅指后者。DNA分子标记通常是一些小分子量的DNA片段(几十到2000bp左右),它们大量存在于真核生物的基因组内,能够通过特定的技术和

RFLP和RAPD技术原理和操作步骤

原理:DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切酶的酶切位点

RAPD分子标记的实验原理及操作流程

RAPD标记RAPD技术的全称是随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA),此技术建立于PCR基础之上,使用一系列具有10个左右碱基的单链随机引物,对基因组的DNA全部进行PCR扩增,以检测多态性。由于整个基因组存在众多反向重复序列,因此须对每一随机

RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术

聚合酶链式反应(PCR)以其优越性极大地影响到了分子生物学的几乎所有领域,并以其基本程序和DGGE,开发出多种检测核苷酸变异的方法。RAPD(Random Amplifed Polymorphic DNA)是其中一种,可用于(1)遗传图谱的构建(2)系统学研究(3)目的基因的标记和定位(4)纯度和外

分子实验方法7:-RFLP和RAPD技术

第七章 RFLP和RAPD技术第一节 概 述  DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同

RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术

实验方法原理RAPD作为单引物的PCR扩增产物,其产生机理是引物首先结合到模板链,沿模板5’端方向延伸而产生不同长度的DNA片段,然后以这些片段为模板继续大量扩增。由于RAPD反应中,在3’端没有相应引物和模板互补,这样必然存在一个由引物沿模板DNA 5’端方向延伸后再在3’端形成同一引物互补序

RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术

RAPD分析技术             实验方法原理 RAPD作为单引物的PCR扩增产物,其产生机理是引物首先结合到模板链,沿模板5'端方向延伸而产生不同长度的DNA片段

植物RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术

RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA),意为随机扩增多态性DNA,是利用PCR技术进行随机扩增,把扩增的DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳,根据DNA条带的多态性来反应模板DNA序列上的多态性。RAPD同AFLP、SSR等分子标记一样都基于PCR扩增,只是RA

RAPD(randomly-amplifiled-polymorphic-DNA,随机扩增的多态性DNA

一、 原理运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly amplifiled polymorphic DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上,它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体

RAPD技术应用中的一些问题及对策

摘要:综述了RAPD技术的一些理论性问题,包括RAPD与其它分子标记技术相比的优点,影响结果重复性的因素,显性标记产生的原因,条带取舍的标准等。提出在实验中解决这些问题的一些方法:严格控制反应条件,采用单倍体和单剂量标记,系统学研究中要结合其它方法进行分析,定位基因时要选用合适的群体等。 1 RAP

随机引物的PCR标记的相关内容

  所用引物的核苷酸序列是随机的,其扩增的 DNA 区域事先未知。随机引物PCR扩增的 DNA 区段产生多态性的分子基础是模板 DNA 扩增区段上引物结合位点的碱基序列的突变,不同来源的基因组在该区段上表现为扩增产物有无差异或扩增片段大小的差异。随机引物PCR标记表现为显性或共显性。  ①随机扩增多

基因型分析

Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPD)Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPD) by  (DNA KAFFE)RAPD analysis has been successfully used in mapping

新生儿B链球菌感染的感染途径

  早发型GBS肺炎母婴配对的GBS菌株的血清型均一致,血清型为III/R;核酸杂交结果表明,其毒力因子ScaA、ScpB、glnA、α和β基因片段大小均相同;RAPD检测结果证明,GBS菌株RAPD的DNA指纹图完全一致。晚发型GBS脑膜炎患儿脑脊液和血中分离的GBS菌株血清型、毒力因子基因片段大

随机扩增多态性DNA的简介

  随机扩增多态 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美国学者Williams和Welsh于1990年首先提出的该技术是通过分析DNA的PCR产物的多态性来推测生物体内基因排布与外在性状表现的规律的技术。RAPD技术是以8-lObp的随机寡

Multiplex-PCR-Method-to-Discriminate-Artemisia-iwayomogi-from-Other-...

Some plants in the genus Artemisia have been used for medicinal purposes. Among them, Artemisia iwayomogi , commonly referred to as “Haninjin,” is o