常规培养细胞计数、保存、运输等法

细胞悬液制备后,要计算所含的细胞数量。一般以细胞数/毫升表示。用品:细胞悬液 培养液 计数板程序用酒精冲洗计数板后 擦净,将盖片覆在计算板上,微微移向一侧,以便滴加细胞悬液.取一吸管伸入培养瓶,轻轻吸打细胞悬液混匀。从盖片边缘滴加细胞悬液,使其充满计数板和盖片间的空隙中注意:勿使液体漫过盖片或出现气泡。镜下观察计数 计算计数板的四角大格内的细胞数,压线者只计算左侧和上方的,右和下的不计算在内。按下式计算:细胞数/毫升源液= 注意:镜下计数,有时偶尔有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算如细胞团占10%以上,说明消化不充分,或细胞数少于200个/10平方毫米或多于500个/10平方毫米时,均说明稀释不当.需重新置备细胞悬液,再计算。培养细胞的冻存在培养液中添加保护剂,如二甲亚砜(Dimeethylsulfoide,DMSO)甘油,可使细胞免受低温冰晶形成及渗透压改变而导致的物理损伤,培养细胞......阅读全文

常规培养细胞计数、保存、运输等法

 细胞悬液制备后,要计算所含的细胞数量。一般以细胞数/毫升表示。用品:细胞悬液 培养液 计数板程序用酒精冲洗计数板后 擦净,将盖片覆在计算板上,微微移向一侧,以便滴加细胞悬液.取一吸管伸入培养瓶,轻轻吸打细胞悬液混匀。从盖片边缘滴加细胞悬液,使其充满计数板和盖片间的空隙中注意:勿使液体漫过盖片或出现

常规培养细胞计数、保存、运输等法

程序用酒精冲洗计数板后 擦净,将盖片覆在计算板上,微微移向一侧,以便滴加细胞悬液.取一吸管伸入培养瓶,轻轻吸打细胞悬液混匀。从盖片边缘滴加细胞悬液,使其充满计数板和盖片间的空隙中注意:勿使液体漫过盖片或出现气泡。镜下观察计数 计算计数板的四角大格内的细胞数,压线者只计算左侧和上方的,右和下的不计算在

细胞运输保存与使用

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1ml细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输:收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80C的条件下保存1个月。2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输

细胞运输保存与使用

视天气状况和运输距离远近。 1)1ml细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输:收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80C的条件下保存1个月。2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶

常规细胞培养初代消化培养法

1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切:用眼科剪把

常规细胞培养初代消化培养法

1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切:用眼科剪把

细胞生物基本方法:常规组织培养法

常规组织培养法1)初代消化培养法1.      准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.      布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3.      处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染

常规组织培养法

一、初代消化培养法1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3、 处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分

脑脊液常规脑脊液细胞计数(CST)

脑脊液细胞计数(CST)介绍: 指对脑脊液中的全部细胞进行计数。脑脊液不含红细胞,无白细胞或含极少量的白细胞。脑脊液细胞计数(CST)正常值: 红细胞:无。单个核细胞计数:成人,腰椎穿刺少于10×106个/L,脑室穿刺少于5×106/L;儿童,少于15×106/L;新生儿,少于30×106/L。脑脊

脑脊液常规脑脊液细胞分类计数

脑脊液细胞分类计数介绍: 脑脊液的显微镜常规检查,一般以细胞计数和白细胞分类为主。脑脊液不含红细胞,无白细胞或含极少量的白细胞。有中枢神经系统疾病时,脑脊液中的细胞数增多,白细胞升高的种类发生变化。因此做脑脊液显微镜检查可以反映疾病的不同性质。脑脊液细胞分类计数正常值: 细胞分类计数:淋巴细胞40%

血球计数板细胞计数法

细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板(血球计数板)进行。即可用于分离(散)细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何,均须制备分散的细胞悬液。一、步骤1、制备细胞悬液:对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(

血球计数板细胞计数法

细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板(血球计数板)进行。即可用于分离(散)细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何,均须制备分散的细胞悬液。一、步骤1、制备细胞悬液:对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(

细胞培养常规方法

. 冻存细胞的复苏应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37。5度,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内,约5ml左右,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。2. 传代:对于贴壁细胞

细胞培养常规操作

常规操作(主要内容如下)·         Aseptic Technique·         Culture Vessels·         Cell Counting·         Primary Culture·         Maintenance of Cell Line ·  

常规细胞培养方法

原理 1  将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。   仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱

血清的保存及运输

(1)长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内

抗体保存及运输指南

抗体保存与运输得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果!如果抗体保存得当,大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年。 本指南以abcam抗体保存方法为主,同样也可以应用到其他绝大部分公司的抗体产品!请谨记!无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确保存抗体!1. 收到抗体后请务必在12000rpm离心1分钟

样品的运输及保存

1采样结束后应尽快将样品检验或送往留样室,需要复检的应送往实验室。2疑似急性细菌性食物中毒样品应无菌采样后立即送检,一般不超过四小时;气温高时应将备检样品置冷藏设备内冷藏运送,不得加入防腐剂。3 需要冷藏的食品,应采用冷藏设备在0℃~5℃冷藏运输和保存,不具备冷藏条件时,食品可放在常温冷暗处,样品保

昆虫细胞的保存培养实验

基本方案 实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞                                                           试剂、试剂盒 70%乙醇                          

昆虫细胞的保存培养实验

实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞试剂、试剂盒 70%乙醇0.4%(m V)台盼蓝仪器、耗材 无血清昆虫细胞培养基60 mm 培养皿或 25 cm2 培养瓶 27℃ 培养箱旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台离心机带螺口盖的冻存管液氮罐实验步骤 1. 将 3 ml 含 10% 胎牛血清的昆虫细

昆虫细胞的保存培养实验

实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞试剂、试剂盒70%乙醇0.4%(m V)台盼蓝仪器、耗材无血清昆虫细胞培养基60 mm 培养皿或 25 cm2 培养瓶 27℃ 培养箱旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台离心机带螺口盖的冻存管液氮罐实验步骤1. 将 3 ml 含 10% 胎牛血清的昆虫细胞培养基 TNM-FH

昆虫细胞的保存培养实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞

血细胞计数器计数法

通过血细胞计数分析可以用于:(1)了解患者血液的基本信息;(2)了解患者有无感染、有无贫血、是否有凝血功能障碍等。一般是必做的检查。实验方法原理血细胞计数器含有 2 个室,每个室充满并盖上盖玻片后总体积为 9x10-3 ml, 每室有 9 个大方格,因此盖上盖玻片后每个大方格的容积为 0.1 mm3

血细胞计数器计数法

            实验方法原理 血细胞计数器含有 2 个室,每个室充满并盖上盖玻片后总体积为 9x10-3 ml, 每室有 9 个大方格,因此盖上盖玻片后每个大方格的容积为 0.1 mm3 或 1.0x10-4 ml,对计数来讲,9 个大方格再进行分隔没有必要

冬眠为细胞冷藏保存和低温运输打开“利剑”?

动物如何进入低体温冬眠降低体温可减缓身体的新陈代谢活动,温度每下降1摄氏度,身体活动量就会减少5 %~7%,同时身体消耗氮气等基本营养素的速度也会相应降低,由于失血或心脏骤停导致缺氧的身体组织由此得到一定的保护。从理论上讲,如果体温一直下降,终生物过程会完全停止,人体开始进入一种假死状态。此时的人体

血常规检查白细胞计数标准(WBC)

 血常规:白细胞计数(WBC)  正常参考值:4×109~10×109/L  生理性升高:运动、体力劳动、疼痛刺激、极度恐惧、冷水浴、怀孕期间等。  病理性升高:相当多的疾病均可引起白细胞升高,大部分细菌引起的炎症,各种创伤、刺激引起的应激状态,白血病、传染性单核细胞增多症、类白血病反应等(可高达几

血常规检测项目红细胞计数(RBC)

红细胞计数(RBC)介绍: 红细胞计数,是指单位体积血液中所含的红细胞数目,对于提示累及红细胞系统的疾病有重要意义。  正常情况下,红细胞的生成和破坏处于动态平衡,因而血液中红细胞的数量及质量保持相对稳定。无论何种原因造成的红细胞生成与破坏的失常,都会引起红细胞在数量上或质量上的改变,从而导致疾病的

血常规中的白细胞计数和细胞计数是什么意思

细胞悬液细胞数/ml=4个大格细胞总数/4×10,000。如计数前已稀释,可再乘稀释倍数。计数时,只计数完整的细胞,若聚成一团的细胞则按一个细胞进行计数。在一个大方格中,如果有细胞位于线上,一般计下线细胞不计上线细胞,计左线细胞不计右线细胞。二次重复计数误差不应超过±5%。镜下观察,凡折光性强而不着

传代培养法/组织块培养法/初代消化培养常规组织培养法

一、初代消化培养法 1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的

细胞冷冻保存、冷冻细胞活化以及细胞计数与存活测试

一、细胞冷冻保存 1、材料: 生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等