DNA抽提

DNA抽提(主要内容如下)· Working with DNA· DNA Extraction from Bacteria and Other Organisms· DNA Extraction from Cell and Tissue· Mitochondria DNA Isolation· DNA Extraction from Plants, Fly, Fungal· DNA Precipitation and Purification· DNA Extraction from Agarose Gel· DNA Extraction from Acryla......阅读全文

DNA抽提

DNA抽提(主要内容如下)·   Working with DNA·   DNA Extraction from Bacteria and Other Organisms·   DNA Extraction from Cell and Tissue·   Mitochondria DNA Isola

DNA抽提指南(TRIZOL)

按照RNA 分离操作方案在完全移去水样层后,匀浆中的DNA 存在于中间层和苯酚层中也可以被分离出来。在沉淀和多次洗脱后,DNA 溶解在8 mM NaOH中。用TRIZOL试剂从组织和培养细胞中完全回收的DNA 可以用来做样品中DNA 含量的测定。同时抽提的基因组DNA 可以用于对Northern a

质粒DNA的抽提与纯化

目的 : 采用碱变性法,学习小规模制备质粒DNA的技术原理 : 碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH值高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完

乙醇固定样品DNA-抽提和直接PCR

实验概要本实验从乙醇浸泡的鱼苗中提取DNA,并利用直接PCR进行了鉴定。实验原理在实际的研究工作中,野外取样的地点一旦较为偏远,受条件的限制,很难保证得到的样品活体或能够快速冷冻;另外,对一些稀有物种和濒危种,鲜活样品的采集十分困难,一般为了解决这些问题,常采用乙醇和甲醛固定的方法来处理样品,再对样

植物总DNA的快速少量抽提实验

CTAB法             实验方法原理 CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的

植物总DNA的快速少量抽提实验

实验方法原理 CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的处理下,结合65 °C水浴使细胞裂解、蛋白质变性、DNA被释放出来。CTAB与核酸形成复合物,此复合物在高盐(>0.7 mM)浓度下可溶,并稳

植物总DNA抽提方法和优缺点

1、植物DNA的CTAB提取法:经典方法。效果较好,污染少。多用于核基因组提取。2、SDS提取法:较为简易,提取的为全基因组,但有蛋白污染可能。3、简易“一管法”提取方法:4、PCR研究的快速提取法:以上两者方法简单,快速,但污染多,不适合做酶切等操作。5、酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法:多

核酸抽提

mRNA的分离 与rRNA和tRNA不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制

核酸抽提

最糟糕的心态 - 实验失败了,抱怨试剂不好。实验人员本来是应该拥有修正主义、机会主义、怀疑论等诸多“不完美的”意识,所以一定要用“完美的”自我批评意识来平衡。我为什么没有一双慧眼选择可靠的供应商?我为什么不做预实验检测所购试剂?最糟糕的知识 - RNase A 的作用。RNase A 是内切酶,内切

血与泪的RNA抽提抽提经验

对大部分实验人员来说,RNA 抽提比基因组 DNA 抽提要困难得多。事实上,现有的 RNA 抽提方法/试剂,如果用于从培养细胞中抽提 RNA,比抽提基因组 DNA 更方便,成功率也更高。那为什么同样的方法用于组织 RNA 的抽提,总会碰到问题呢?组织 RNA 抽提失败的两大现象是: RNA 降解和组

小鼠基因组DNA抽提操作规程

一、原理与意义先用细胞裂解液对已制备好的组织匀浆充分裂解,然后用蛋白酶去除其中的蛋白,再用氯仿一次抽提(无需用酚抽提)、预备液沉淀、RNase去除RNA、乙醇再沉淀即可得到完整DNA。该方法适用于从人或动物的各种组织、血液、培养细胞、G+/G-细菌中快速抽提基因组DNA。抽提出来的DNA能用于几乎所

水稻总DNA的快速少量抽提CTAB法

DNA分子是分子生物学研究的基本材料,依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的 DNA 。 实验目的:了解植物  DNA 抽提的主要方法,掌握 CTAB 法快速抽提水稻 DNA 。 实验材料及试剂: 水稻  叶片,1.5 × CTAB ,氯仿 / 异戊醇 (24:1) ,

RNA抽提经验

对大部分实验人员来说,RNA 抽提比基因组 DNA 抽提要困难得多。事实上,现有的 RNA 抽提方法/试剂,如果用于从培养细胞中抽提 RNA,比抽提基因组 DNA 更方便,成功率也更高。那为什么同样的方法用于组织 RNA 的抽提,总会碰到问题呢?   组织 RNA 抽提失败的两大现象是: RNA 降

细胞系的-DNA-STR-谱_细胞团抽提

实验方法原理 用 Qiagen®QIAamp®迷你试剂盒从细胞团提取 DNA;抽提到的 DNA 用SGMPlius®扩增,然后用 ABI377 DNA 测序仪进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,用GeneScan®和Genotyper®软件进行分析。 实验材料 Qiagen®DNA迷你试剂盒

plasmid-DNA的抽提•纯化试剂盒MagExtractor®Plasmid

  产品索引   5870   中文名称:   plasmid DNA的抽提•纯化试剂盒   英文名称:   MagExtractor®-Plasmid-   产品编号:   NPK -300   产品类别:   分子生物学   生产厂家:   TOYOBO   产品价格:

植物总DNA的快速少量抽提实验——CTAB法

DNA分子是分子生物学研究的基本材料,依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的DNA。实验目的是了解植物DNA抽提的主要方法,掌握CTAB法快速抽提水稻DNA。实验方法原理CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,

脂肪抽提仪开展脂肪抽提的四个步骤

脂肪抽提仪是 基于索氏抽提法原理研发生产的一款脂肪测定仪器。由于索氏抽提具有方便快捷的特点,因此脂肪抽提仪采用该原理来测定食品中的脂肪含量等,会更有优势,应用 会更加广泛。脂肪抽提仪的工作过程是通过在适当的温度下试剂对样品的浸提,最终实现目标物(如脂肪)的分离。应用脂肪抽提仪开展脂肪抽提,主要可以为

抽提萃取法展望

展望编辑萃取作为分离和提纯物质的重要单元过程,今后还会得到进一步的发展,其主要发展方向是:(1)研究新的萃取体系和新的萃取工艺;(2)合成和筛选高效萃取剂;(3)研究与发展新型萃取设备,重点应放在设备的自动化、连续化上;(4)开展萃取机理及理论的研究。 [2] 

抽提萃取的特点

  提取亲水性强的皂甙则多选用正丁醇、异戊醇和水作两相萃取。不过,一般有机溶剂亲水性越大,与水作两相萃取的效果就越不好,因为能使较多的亲水性杂质伴随而出,对有效成分进一步精制影响很大。

CTAB法抽提核酸

CTAB 法 ①取0. 2g 各中药材样品分别用液氮( Ⅰ) 、玻璃砂( Ⅱ) 、氧化铝( Ⅲ) 研磨。②加入56 ℃ 10 倍预热的缓冲液C 于56 ℃温育30 min , 离心, 取上清液加入等体积氯仿- 异戊醇(24∶1) 抽提(室温, 不能低于15 ℃, 否则CTAB 会沉淀) , 10 0

细菌的核酸抽提

DNA Extraction·         DNA Extraction from Bacteria (Julie B. Wolf,UMBC)Phenol/chloroform method·         DNA Extraction From Bacteria (Triton Method

醇化办法核酸抽提

醇化办法核酸抽提       PC 抽提/醇沉淀办法,是一个永不陈旧办法。牢稳、靠得住、经济、便捷。PC 抽提可以彻底去除氨基酸,醇沉淀可以去除盐,对于普通的整洁的样品(杂质为氨基酸),该办法足以取得高品质的核酸。固然每每PC 抽提都会亏损一小批核酸(由于没可能将水相所有移取),以及低液体浓度核酸的

抽提萃取的分类

  萃取的机理既有物理的溶解作用,又有化学的配合作用,是一个复杂的物理溶解过程 。一般而言,萃取那些简单的不带电荷的共价分子时为物理溶解过程。但在大多数情况下,被萃取物与有机相中一种或多种组分发生化学变化,生成新的化学物种后被萃入有机相,这便属于化学过程。按照萃取机理的不同,可分为五种类型:  (1

裂解办法抽提核酸

裂解办法抽提核酸含蛋白酶的裂解办法,还是可以觉得是抽提基因组DNA 的首选。裂解涵盖膜蛋白的游离和与基因组DNA 衔接接的氨基酸的游离。蛋白酶的效用是使氨基酸变小,因而对氨基酸的游离有很大的增进效用;同时,很大的基因组DNA 是很容易“缠”住大分子的物品的,氨基酸被蛋白酶克化变小后,则不由得易被基因

抽提萃取的概念

  利用化合物在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。经过反复多次萃取,将绝大部分的化合物提取出来。萃取时如果各成分在两相溶剂中分配系数相差越大,则分离效率越高、如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质,一般多用亲脂性有机溶剂,如苯、氯仿或乙

蛋白抽提指南(TRIZOL)

在用酒精沉淀出DNA(DNA抽提中的步骤一)后剩余的苯酚—乙醇上清中可以抽提出蛋白。沉淀的蛋白可通过蛋白[质]印迹法对样品中某一特殊的蛋白质进行分析。试剂所需,但没有随同提供的物品:* 异丙醇* 0.3M盐酸胍(用95%酒精配制)* 无水乙醇* 1% SDS1.蛋白质的沉淀用异丙醇从苯酚—乙醇上清中

质粒DNA的抽提、沉淀及琼脂糖凝胶电泳

一、实验目的·学习酚、氯仿抽提去除蛋白质的基本方法·了解质粒DNA的抽提方法·学习掌握琼脂糖凝胶电泳的方法·熟练取液枪的使用方法二、实验原理·在DNA的粗提液或其他的DNA反应体系中,一般都混有蛋白质、寡糖苷酸等杂质。酚和氯仿可以使蛋白质变性,离心后变性蛋白质存在于有机相和水相之间的界面,吸取上层含

植物DNA的提取实验中吸收样品、抽提应注意什么

抽提时应缓慢摇匀,不能太用力,时间要适当长一点。离心后吸取上清要慢,枪头最好用蓝枪头或是剪过的黄枪头,注意千万不能触到蛋白膜。原因就是DNA链容易断裂,所以要轻,要用口大的枪头。为了抽提效果好所以延长时间。

全自动核酸抽提仪

  全自动核酸抽提仪是一种用于基础医学、临床医学领域的分析仪器,于2016年10月25日启用。  技术指标  1.采用QIAGEN硅胶膜离心柱技术,2.针对多种生物样本(包括全血、血浆、血清、尿液、粪便、细胞和FFPE组织或新鲜组织等),可以实现对基因组DNA,病毒核酸,质粒DNA,microRNA

RNA抽提指南(TRIZOL法)

RNA抽提指南(TRIZOL法)注意事项:* 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌,可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。* 使用灭菌的,一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA,避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。例如,使用RNA探针的实验室