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多色荧光原位杂交实验

实验方法原理 试剂、试剂盒 DAPI 复染液乙醇SSC盐酸HClNP-40胰酶NaCl柠檬酸钠Spectra Vysion探针M-FISH 探针实验步骤 一、染色体标本制备1.标本制备:不同标本来源的样品(血液、羊水、成纤维细胞培养物或骨髓)用其相应的标准程序进行制备。2.用相差显微镜找到合适的中期染色体分裂相,将杂交区域标记出来。3.将标本立在 37°C 装有 40 mL 胰酶工作液的染色缸中作用 2 min。4.在一个 HYBrite(Vysis) 装置中人工老化片子,90°C、2 min。5.在 HYBrite(Vysis) 装置中用 2XSSC 冲洗片子 2 min。6.将标本在分别盛有 40 mL70%、85% 和 100% 乙醇系列的染色缸中室温下依次脱水 lmin,风干。二、杂交和洗脱1.将 M-FISH 探针混合液(Vysis) 加到标记的杂交区域上。2.将每张标本的杂交区域上覆以盖片,用橡皮泥在盖片周......阅读全文

消减杂交实验

试剂、试剂盒 稀释缓冲液杂交缓冲储存液基三乙基溴化铵矿物油核酸和寡核苷酸 仪器、耗材 热循环仪 实验步骤 一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 稀释缓冲液(20 mmol/L HEPES>HCl、pH8.3,50 mmol/LNaCl,0.2 mmol/L ED

消减杂交实验

消减杂交实验             试剂、试剂盒 稀释缓冲液 杂交缓冲储存液 基三乙基溴化铵 矿

消减杂交实验

试剂、试剂盒 稀释缓冲液杂交缓冲储存液基三乙基溴化铵矿物油核酸和寡核苷酸仪器、耗材 热循环仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂稀释缓冲液(20 mmol/L HEPES>HCl、pH8.3,50 mmol/LNaCl,0.2 mmol/L EDTA)4X 杂交缓冲储存液:4mol/L NaC

体细胞杂交的杂交实验

不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合,所产生的杂种细胞,即异核体经过培养可再生新壁,分裂形成愈伤组织,进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞,故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组,因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究

杂交实验的实验目的

了解用聚乙二醇PEG方法诱异同种植物原生质体融合的技术,并能根据新本原生质体的形态樗来鉴别杂种细胞。

杂交实验的实验原理

不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合,所产生的杂种细胞,即异核体经过培养可再生新壁,分裂形成愈伤组织,进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞,故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组,因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究

Southern杂交实验-1

[实验原理] Southern 杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。

酵母双杂交实验

实验概要本实验构建了Bait载体和prey载体,酵母双杂交后,应用CPRG法定量测试了蛋白质相互作用。实验步骤1. Bait载体的构建将高保真PCR扩增的OsCCTlb(引物为OsCCT1bEcoRI5'和OsCCTlbXhoI3')和OsCNTlb(引物为OsCNTlb   Eco

Southern杂交实验-2

③转移按凝胶的大小剪裁NC膜或尼龙膜并剪去一角作为标记,水浸湿后,浸入转移液中5min。剪一张比膜稍宽的长条Whatman 3mm滤纸作为盐桥,再按凝胶的尺寸剪3-5张滤纸和大量的纸巾备用。按下图所示进行转移。(转移过程一般需要8-24hr,每隔数hr换掉已经湿掉的纸巾。转移液用20×SSC。注

RNA点杂交实验

实验概要了解RNA点杂交实验,包括纯化的RNA的点杂交和狭线杂交,RNA斑点印迹。实验步骤纯化的RNA的点杂交和狭线杂交:1. 安装印迹装置   1) 切一张合适大小的带正电荷尼龙膜。用铅笔标上表示方向的记号。用水把膜简单弄湿,在20×SSC中室温泡1 h。   2) 在膜浸泡期间,先用0.1 mo