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树突细胞的分离实验

实验步骤基 本 方 案 1 塑 料 黏 附 和E A 玫 瑰 花结 富 集DC此种技术用于分离DC已经使用了很多年,其间只经过了微小的修改(Steinman衫aZ., 1979)材 料(带V 项 目 见 附 录 1)胶原酶消化的脾脏细胞悬液(见辅助方案)高密度牛血清白蛋白(BSA) 溶液R P M I 1640 培 养 基(如 Life Technologies) , 4℃和 37°CR P M I - 5 完全培养基, 4°C和 37°C抗体偶联的绵羊红细胞(EA)用于流式细胞分析的一抗(表 2. 3. 2)用 于 流 式 细 胞 分 析 的 二 抗(突 光 结 合 的 小 鼠 抗 大 鼠 I g G 和 I g M ; 如 BoehringerMannheim)Beckman G H -3. 7 和 Sorvall HS-4 转子15m l和 50m l聚丙烯锥底管填充棉花和未填充棉花的高压灭菌的9in (约23c m ) ......阅读全文

多篇文章解读癌症等疾病的疫苗研究进展

  近年来,科学家们在开发诸如癌症等多种疾病的疫苗上取得了重要的进展,本文中,小编整理了多篇文章来解读当前癌症、艾滋病等疫苗开发的研究进展,分享给大家!【1】Nature:特殊抗体或能帮助开发出广谱高效性的HIV疫苗  doi:10.1038/s41586-018-0517-0  大约1%感染HIV

一文了解12月HIV研究亮点进展

  人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV),即艾滋病(AIDS,获得性免疫缺陷综合征)病毒,是造成人类免疫系统缺陷的一种病毒。1983年,HIV在美国首次发现。它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒(lentivirus),属逆转录病毒的一种。HIV通过

2017年6月9日Science期刊精华

  本周又有一期新的Science期刊(2017年6月9日)发布,它有哪些精彩研究呢?让小编一一道来。  1.Science:针对药物BIA 10-2474的神经毒性提出一种潜在的新解释  doi:10.1126/science.aaf7497  如今,在一项新的研究中,来自荷兰、美国和意大利的一个

血细胞分离培养方法和步骤-2

收集浑浊带分离获得的淋巴细胞,用无钙、镁离子的PBS洗3次后,再用培养基洗1次后计数,分瓶培养。此法分离获得淋巴细胞纯度高。分离液的制备:9% Ficoll(20℃下相对密度约1.020)24份与33.4%泛影葡胺(用泛影钠或Conray400也可,在20℃下相对密度约1.200)10份混合后,

细胞增殖检测

细胞增殖检测:3H同位素渗入法实例             实验方法原理 树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来源

细胞增殖检测

细胞增殖检测:3H同位素渗入法实例             实验方法原理 树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来源

细胞增殖检测:3H同位素渗入法实例

树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来源的、具有迁移能力的免疫细胞,是目前发现的功能最强大的抗原递呈细胞(APC)。 DC 是机体适应性 T 细胞免疫应答的始动者,主要在(1)肿瘤免疫反应(2)在疫苗生产过程中分别起着至关重要的作用。实验方法原理树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来

2014美国癌症年会:聚焦肿瘤免疫治疗

  肿瘤免疫治疗是通过激活体内的免疫细胞,特意性地清除癌变的细胞。这种治疗方法具有特异性强,作用期长和副作用小等优点,一直以来被认为是治愈肿瘤的终极手段。然而,直到最近几年,这个梦想才开始被实现,科学杂志把肿瘤免疫治疗列为2013年的重大科学突破。于此相呼应,2014美国癌症年会的主题是:利用肿瘤基

探究分泌和摄取用于细胞间通讯的外泌体和其他胞外囊泡

  尽管在20世纪60年代后期首次描述了在哺乳动物组织或液体中,有囊泡在细胞周围存在,但是直到2011年才提出通用术语“胞外囊泡(extracellular vesicle, EV)”来定义所有的由脂质双层包围的胞外结构,如图1所示。在1980年代,人们描述了EV可以通过质膜向外出芽或通过细胞内内吞

清华大学专家:魏则西之死背后的免疫疗法

  最近两天,西安电子科技大学大学生魏则西之死引发滔滔舆论。这位21岁的滑膜肉瘤患者经历了漫长痛苦的放疗和化疗后,于2016年4月12日安静辞世。  滑膜肉瘤是一种恶性肿瘤,转移性强,目前难以治疗。魏则西生前在传统的治疗手段无望的时候,通过百度搜索找到武警北京总队第二医院,接受一种号称为“最先进技术

CIK/DC-CIK及其在细胞治疗上的应用(二)

【细胞制备】 1.外周血单个核细胞的采集 1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞50-100mL; 1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC); 1.3 无血清培养液洗涤2次,获得纯度在90%以上的PBMC。 2.CIK细胞的培养及鉴定 2.1 将PBMC按1

神经元原代培养方法

从孕17-18天的雌鼠的胎儿分离神经元细胞。孕雌鼠麻醉然后解剖,胎儿收集到HBSS-1中然后快速断头。剥离脑膜和白质后,大脑皮质收集入 HBSS-2 液中机械磨碎。皮质碎片移到有0.025%胰酶的HBSS-2液中37°C消化15分钟。胰酶消化后,细胞用含有10%胎牛血清的HBSS-2液冲洗两

盘点:Nature杂志5月亮点研究速览

  【1】合成生物学:一个用来控制转基因生物的内置毁灭开关  Nature Communications DOI:10.1038/ncomms7989  Nature Communications在线发表的一篇论文介绍了一个基于CRISPR的内置器件,它设计用来专门破坏转基因生物的特定DNA序列。控

酶联免疫斑点实验(ELIspot)

实验材料 血液样品细胞样品试剂、试剂盒 70%乙醇PBS脱脂奶粉链霉亲和素检测抗体包被抗体仪器、耗材 PVDF膜96孔培养板硝基纤维素底板免疫斑点板酶标板实验步骤 一、包被96孔板 用70%乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30 s 加入捕获抗体(PBS稀释),4℃过夜 倒

对外周血中人自然杀伤(NK)细胞群的表型表征分析

概述:制定 10 色免疫表型 Panel,以鉴定人自然杀伤细胞(NK)。用于量化 NK 细胞群子集的设门策略。介绍:NK 细胞属于固有免疫系统的一部分,并与肿瘤监测和病毒感染细胞的杀伤相关。最近,有研究表明,NK 细胞在自身免疫病方面也发挥着作用,其方式为调节适应性免疫反应,即 T 细胞,或

2016年外泌体研究进展

  外泌体是一种存在于细胞外的多囊泡体,可通过细胞内吞泡膜向内凹陷形成多泡内涵体,内涵体与细胞膜融合后释放其中的小囊泡。外泌体的直径在40-110 nm之间,其中包含RNA、蛋白质、microRNA、DNA片段等多种物质,存在于血液、唾液、尿液、脑脊液和母乳等多种体液中。外泌体从发现至今已有30多年

酶联免疫斑点实验(ELIspot)——酶联免疫斑点实验(ELIspot)

实验材料血液样品细胞样品试剂、试剂盒70%乙醇PBS脱脂奶粉链霉亲和素检测抗体包被抗体仪器、耗材PVDF膜96孔培养板硝基纤维素底板免疫斑点板酶标板实验步骤一、包被96孔板 用70%乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30 s 加入捕获抗体(PBS稀释),4℃过夜 倒空板中包

《Cell》封面故事:重要神经元分泌途径

来自加州大学旧金山分校,霍华德休斯医学院的研究人员通过遗传筛选发现了树突和轴突是如何形成截然不同构造的,这个问题是神经生物学的基本问题,但是之前科学家们了解的并不多。这一研究成果公布在《Cell》封面上。 原文检索:Cell, Vol 130, 717-729, 24 August 2007Gro

华裔伉俪最新《Cell》文章解开神经研究未解之谜

来自加州大学旧金山分校的詹裕农(Yuh-Nung Jan) 和 叶公杼(Lily Yeh Jan)夫妻是一对有名的华裔科学家伉俪,他们的主要研究方向是神经系统的功能和发育,在本期《Cell》杂志上,他们通过遗传筛选发现了树突和轴突是如何形成截然不同构造的,这个问题是神经生物学的基本问题,但是之前科学

维生素B6 缺乏对大鼠学习记忆的影响及有关机制的探讨

【摘要】 目的 观察维生素B6(VB6) 缺乏对生长期大鼠学习记忆功能的影响, 并从脑发育、神经递质方面探讨有关机制。方法 用避暗法检测大鼠学习记忆行为, 用荧光法测定脑组织核酸和单胺类神经递质含量。结果 VB6 缺乏组大鼠学习记忆能力明显下降, 同

外泌体中评估mTBI患者神经退行性病变和细胞毒性标志物

  创伤性脑损伤(TBI)是全球性的公共卫生问题。由于缺乏良好的诊断工具和干预手段,TBI患者数量被严重低估,尤其是在体育运动员和军人群体中。目前TBI的诊断方式只有昂贵的神经影像技术和脑脊液(CSF)检测。轻度创伤性脑损伤(mTBI)更是难以诊断,目前还没有一种可以基于血液诊断的生物标志物。因此迫

免疫细胞化学在神经科学中的应用

免疫细胞化学的发展对许多领域的研究起到很大的推动作用,在神经科学的研究中尤为突出。本章 仅就免疫细胞化学在神经科学的基础研究方面的应用做一简要介绍。  一、确定神经递质的性质、定性和分布  早期的神经科学工作者应用传统的神经解剖学研究方法如甲基蓝染色法、镀银染色法等对中枢及外周神经系统的结构做了大量

单细胞技术让这些研究成为现实

  生物通报道 如今,细胞群体的平均值数据已不再能够满足研究的需求。研究人员开始转向单细胞来探索基本的生物学。在这一期的《BioTechniques》上,Jeffrey Perkel博士介绍了让单细胞实验成为现实的技术。  2015年底,巴西卫生部门和世界卫生组织报告,新生儿中小头症的发病率急剧增加

单细胞技术让这些研究成为现实

  如今,细胞群体的平均值数据已不再能够满足研究的需求。研究人员开始转向单细胞来探索基本的生物学。在这一期的《BioTechniques》上,Jeffrey Perkel博士介绍了让单细胞实验成为现实的技术。  2015年底,巴西卫生部门和世界卫生组织报告,新生儿中小头症的发病率急剧增加。没过多久,

膜片钳技术的应用进展(三)

4  膜片钳技术的主要用途     膜片钳技术广泛用于研究细胞离子通道,已经成为研究细胞水平生理功能的常用技术。归纳其主要用途包括[4] :1)可分辨单通道电流,直接观察通道开启和关 闭的全过程。通过测得的单通道特征参数可鉴别通道类型,

培养单神经元的光学记录技术实验2

五、信号处理方法即使选用最好的指示剂和最佳的仪器,有些光学信号仍然很弱,伴有或只有噪声。另一方面,所用探测器的灵敏度可能很差,或所测生理指标性质上为量子性信号。无论怎样,都要格外注意从背景噪声中提取出所需要的信号。噪声可能包括:系统噪声和随机噪声。在某些情况下,系统噪声能被检测出来,进而能用减法或除

神奇的大脑记忆是如何形成的?

  长期以来,很多科学家对大脑的研究非常痴迷,有些研究试图去解析引发多种大脑相关神经变性疾病的发病机理,比如阿尔兹海默氏症、帕金森疾病、精神分裂症等等,而有些研究人员则从更深层次对大脑结构和功能区域进行了探秘研究,从而来解读我们大脑记忆的形成机制。  很多人都有着快乐的童年记忆,当然也有着那些痛苦不

4月9日《自然》杂志精选

   封面故事:  103号元素“第一电离电位”的首次测定  门捷列夫元素周期表现代最大的一次修正发生在1944年,当时Glenn T. Seaborg在镧系元素之下插入了一个新系列的元素——锕系元素(原子序数89-103)。在本期《自然》上,Yuichiro Nagame及同事报告了103号元素(

《Nature》5月最受关注的十篇论文

  英国著名杂志《Nature》周刊是世界上最早的国际性科技期刊,自从1869年创刊以来,始终如一地报道和评论全球科技领域里最重要的突破。其办刊宗旨是“将科学发现的重要结果介绍给公众,让公众尽早知道全世界自然知识的每一分支中取得的所有进展”。近期《Nature》下载论文最多的十篇文章(2015年4月

关于2011年度教育部科学技术研究重点项目立项通知

教技司[2011]95号 各省、自治区、直辖市教育厅(教委)、新疆生产建设兵团教育局,国家民族事务委员会教科司、国务院侨办文教宣传司:   2011年度教育部科学技术研究重点项目评审工作已经结束。经专家评审并公示,共有212个项目获准立项(具体名单见附件)。为做好项目实施工作,现将有关