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M13噬菌体单链DNA的制备

M13 噬菌体单链 DNA 是从感染细胞分泌至周围培养液中的病毒颗粒中制备的,首先在高盐存在下,丝状病毒被聚乙二醇(PEG) 沉淀浓缩,然后用酚抽提释放单链 DNA,最后乙醇沉淀收集单链 DNA。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理M13 噬菌体单链 DNA 是从感染细胞分泌至周围培养液中的病毒颗粒中制备的,首先在高盐存在下,丝状病毒被聚乙二醇(PEG) 沉淀浓缩,然后用酚抽提释放单链 DNA,最后乙醇沉淀收集单链 DNA。实验材料M13 单链噬菌体载体感染 M13 噬菌体的大肠杆菌培养物未感染的大肠杆菌的培养试剂、试剂盒氯仿乙醇酚聚乙二醇 8000乙酸钠蔗糖凝胶上样缓冲液TE仪器、耗材琼脂糖凝胶多管振荡器实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液氯仿乙醇酚聚乙二醇 8000 ( 20%,m/V,PEG 8000 ) 溶于 2.5 mol/L NaCl。乙酸钠(3 mol/L, pH 5.2)蔗糖凝胶上样缓冲液T......阅读全文

M13噬菌体

·         M13 Phage (Michael Blaber)Very useful background information about M13: its infection, replication, packing, cloning. If you are new to phag

M13噬菌体铺平板

M13 噬菌斑是由单个病毒感染单个细菌后形成的。子代病毒颗粒感染邻近细菌, 然后又产生下一代病毒颗粒,细菌在半固体培养基(如含琼脂或琼脂糖)上生长时,子代病毒颗粒的扩散受到一定限制。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理M13 噬菌斑是由单个病毒感染单个细菌后形成的。子代病毒颗

M13噬菌体铺平板

            实验方法原理 M13 噬菌斑是由单个病毒感染单个细菌后形成的。子代病毒颗粒感染邻近细菌, 然后又产生下一代病毒颗粒,细菌在半固体培养基(如含琼脂或琼脂糖)上生长时,子代病毒颗粒的扩散受到一定限制。

M13噬菌体铺平板

实验方法原理 M13 噬菌斑是由单个病毒感染单个细菌后形成的。子代病毒颗粒感染邻近细菌, 然后又产生下一代病毒颗粒,细菌在半固体培养基(如含琼脂或琼脂糖)上生长时,子代病毒颗粒的扩散受到一定限制。实验材料 M13 噬菌体原种噬菌斑大肠杆菌 F' 菌株制备的主培养物试剂、试剂盒 IPTG 溶液

M13噬菌体与其他噬菌体相比的优点

噬菌体展示技术的应用中,M13噬菌体与其他噬菌体比有什么优点?M13噬菌体和与其密切相关的丝状噬菌体fd和f1均为非裂解性噬菌体,它们在增殖期间均不裂解宿主菌。这就极大地简化了每轮淘选过程之间的中间噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法就足以将噬菌体与其他所有污染的细胞蛋白分开。而其他用于噬菌体展

重组M13噬菌体克隆分析

实验方法原理 在本方案中,当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时,用重组 M13 噬菌体克隆感染细菌后释放至周围培养基中的单链 DNA 进行凝胶电泳分析即可鉴定。实验材料 重组 M13 噬菌体单链 DNAM13 噬菌体重组噬菌斑M13 噬菌体非重组载体噬菌斑大肠杆菌 F' 菌株试剂

M13噬菌体液体培养

            实验方法原理 M13 噬菌体原种通常采用液体培养,感染细胞并不裂解而是缓慢生长形成稀悬液。接种几乎总是用一个新挑取的噬菌斑或单个噬菌斑获得的噬菌体颗粒悬液。感染细胞含 200 拷贝以上双链 RF DNA,每代分泌数百个噬菌体颗粒。

重组M13噬菌体克隆分析

在本方案中,当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时,用重组 M13 噬菌体克隆感染细菌后释放至周围培养基中的单链 DNA 进行凝胶电泳分析即可鉴定。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理在本方案中,当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时,用重组 M13 噬菌

M13噬菌体液体培养

实验方法原理 M13 噬菌体原种通常采用液体培养,感染细胞并不裂解而是缓慢生长形成稀悬液。接种几乎总是用一个新挑取的噬菌斑或单个噬菌斑获得的噬菌体颗粒悬液。感染细胞含 200 拷贝以上双链 RF DNA,每代分泌数百个噬菌体颗粒。实验材料 M13 噬菌斑大肠杆菌 F' 菌株仪器、耗材 LB

M13噬菌体载体的克隆

实验方法原理 虽然理论上 M13 重组噬菌体所能携带的外源 DNA 片段没有限制,但实际上是有限的:长片段的外源 DNA 比短片段的更易发生缺失和重排。因此如果可能,最好克隆至 M13 噬菌体的 DNA 片段不要大于 1000 碱基。而且,当用“正向”或“反向”通用测序引物进行 DNA