人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖试验
血管内皮细胞不仅参与调节血管通透性和凝血过程，在免疫调节，移植排斥，肿瘤转移，炎症等许多过程中也具有重要作用。内皮细胞培养是体外研究内皮细胞功能的重要手段。70年代Eric等建立了内皮细胞分离及体外培养的方法。人脐带静脉是人血管内皮细胞最易获取的来源，在人内皮细胞的研究中被普遍采用。 ㈠ 原理在体外，内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖，并可传代，可作为内皮细胞增殖，细胞因子分泌、表型等研究的模型。 ㈡ 方法 1. 脐带内皮细胞的分离 试剂与器材 ⑴ 胶原酶(Sigma)：I型((C-0130),用无血清RPMI 1640配成0.1％(W/V),分装、-20℃保存。⑵ Cord Buffor： NaCl 0.14M 8.182克 KCl 0.004M 0.298克 glucose 0.01M 2.180克 NaHPO４.12H2O 0.030克 0.001M ......阅读全文
人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖试验
血管内皮细胞不仅参与调节血管通透性和凝血过程，在免疫调节，移植排斥，肿瘤转移，炎症等许多过程中也具有重要作用。内皮细胞培养是体外研究内皮细胞功能的重要手段。70年代Eric等建立了内皮细胞分离及体外培养的方法。人脐带静脉是人血管内皮细胞最易获取的来源，在人内皮细胞的研究中被普遍采用。 ㈠ 原理在体
人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验
实验方法原理 在体外，内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖，并可传代，可作为内皮细胞增殖，细胞因子分泌、表型等研究的模型。 实验材料 胶原酶
人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验
实验方法原理在体外，内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖，并可传代，可作为内皮细胞增殖，细胞因子分泌、表型等研究的模型。实验材料胶原酶血清试剂、试剂盒Cord Buffor硫酸链霉素生埋盐水EDTA-Na明胶仪器、耗材插管止血钳注射器手套丝线饭盒匀浆机离心机振荡器培养瓶CO孵箱显微镜超净
人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验
实验方法原理 在体外，内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖，并可传代，可作为内皮细胞增殖，细胞因子分泌、表型等研究的模型。 实验材料 胶原酶
血管内皮细胞的分离和培养_分离人脐静脉内皮细胞
实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸铝箔塑料
内皮细胞培养以人脐带静脉灌流消化法的简介
1、产后新鲜脐带，无菌剪取 10—15 厘米长一段，如不能立即培养，可于 12 小 时内保存于 4℃。 2、用三通注射器吸取温 PBS 液注入脐静脉中洗去残血，在入口处用线绳扎紧， 以防液体返流。 3、用血管钳夹紧脐带一端，从另一端向脐静脉中徐徐注入浓度为 0.1%的粗制胶原酶，充满血管，消
血管内皮细胞原代培养（人脐带静脉灌流消化法）
内皮细胞易于从大血管分离培养成单层细胞，对于研究内皮细胞再生、肿瘤促血管生长因子（tumor angiogenesis factor,TAF）等有很大价值。研究人内皮细胞培养以人脐带静脉灌流消化法最为简便，其法如下：1、产后新鲜脐带，无菌剪取10—15厘米长一段，如不能立即培养，可于12小时内保存于
人脐静脉内皮细胞分离培养仪器试剂和操作步骤
溶液以及器材：1、用RPMI-1640配I型胶原酶 0.1g/100ml2、配三抗：青霉素：100ku/L链霉素：100ku/L庆大霉素：100ku/L3、培养液（M199＋ECGS[3ug/ml]＋15％胎牛血清）有EGF可以适当加点10ng/ml4、大瓶生理盐水5、广口瓶（脐带数＋1）6、止血钳
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
实验材料 新生儿脐带试剂、试剂盒 PBS胶原酶M199培养基胰酶EDTADMEM培养基仪器、耗材 针头手术钳离心管低温离心机弯管明胶恒温培养箱显微镜实验步骤1. 将15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的PBS 溶液中储存。（注：4℃下最多贮存24 小时，室温下不超过6 小时，否则废弃）2. 用一个
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养1 ). 将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。（注：4℃下最多贮存24小时，室温下不超过6小时，否则废弃）2 ). 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的PBS溶液冲洗3-5次，将污血冲洗干净为止。3 ). 用手术钳夹紧脐带下端，加入15m
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养 1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。（注：4℃下多贮存 24 小时，室温下不超过 6 小时，否则废弃） 2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次，将污血冲洗干净为止。 3. 用手术钳夹紧脐带
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）可用于：（1）作为体外实验模型细胞；（2）研究血管内皮细胞的生物学特性及其与各种疾病的关系。实验方法原理本实验采用新鲜的健康产妇新生儿脐带，采用胶原酶Ⅰ型用消化分离得到脐静脉内皮原代细胞。胶原酶是最理想的血管内皮细胞分离酶，对细胞间质有较强的消化作用，能使上皮细胞与胶原
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。（注：4℃下最多贮存 24 小时，室温下不超过 6 小时，否则废弃）2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次，将污血冲洗干净为止。3. 用手术钳夹紧脐带下端，加入 15ml 的胶原酶（1mg
分离和培养人角膜内皮细胞实验——分离人角膜内皮细胞
实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’s慑子 10cm(4
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年，HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现，HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时，24-27代的倍增时间为67个小时，27-30代的倍
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年，HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现，HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时，24-27代的倍增时间为67个小时，27-30代的倍
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年，HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现，HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时，24-27代的倍增时间为67个小时，27-30代的倍
人脐静脉内皮细胞的介绍
人脐静脉内皮细胞（英Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC）在进行血管内皮细胞实验时，通常选用的细胞模型为人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells，简称HUVECs)。而不是直接采用静脉血管内皮细
血管内皮细胞的分离和培养_分离小鼠心脏内皮细胞
实验方法原理本方法是由 Marelli-Berg 等 [ 2000 ] 的方法改写的。实验材料小鼠心脏胶原蛋白酶A无关对照抗体大鼠抗小鼠内皮糖蛋白（endoglin)(CD105)抗体山羊抗大鼠IgG微珠试剂、试剂盒MCEC生长培养液非内皮细胞培养液HBSS PSHHSS FBCMF胰蛋白酶和EDT
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_从脐静脉分离干细胞
实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶培养基仪器、耗材导管实验步骤(a)在正常分娩后6〜12h内收集和处理脐带。(b)在脐静脉内插入导管，用PBSA完全地洗2次。(c)夹住远端脐带。(d)用0.1%胶原酶溶液充满静脉。(e)夹住近端脐带。(f)将脐带在37℃孵育20min。(g)轻轻按摩脐带，收集含有内皮和
分离和培养人角膜内皮细胞实验——培养内皮细胞球
实验材料角膜内皮细胞试剂、试剂盒ESM胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材未经组织培养处理的24孔板实验步骤(a)胰蛋白酶消化细。(b)将分离出的细胞用培养基以10个细胞/μL的密度重悬，并接种于未经组织培养处理的24孔板中。(c)7天后用胰蛋白酶消化细胞并离心收集细胞，继续接种。
血管内皮细胞的分离和培养_分离人心脏内皮细胞（HCEC)
实验方法原理根据 McDouall 等 [ 1996 ] 的方法可以分离人的 CEC。实验材料Ⅱ型胶原蛋白酶试剂、试剂盒HCEC生长培养液仪器、耗材磁珠实验步骤1. 按分离小鼠心脏内皮细胞的步骤操作。2. 在步骤 7 用 Ⅱ 型胶原蛋白酶（1 mg/ml）消化组织。3. 按照方案23.28C 的步骤
脐带间充质干细胞的分离培养
脐带间充质干细胞的获取主要有组织块贴壁法与酶消化法，由于酶对细胞的损伤较大，且细胞得率较低，费用昂贵，因此大多数实验室采取了组织块贴壁法进行培养。 取新鲜健康脐带，用PBS冲洗干净后，用剪刀镊子剔去血管，剥出里面的华氏胶组织，将所得组织充分剪碎至1 mm3大小，加入α-MEM培养液置于37℃，
上皮细胞类培养实验_内皮细胞培养实验
实验方法原理内皮细胞易于从血管分离进行培养成单层细胞，对研究内皮细胞再生生、肿瘤促血管生长因子（TAF）等有很大应用价值。人内皮细胞培养可应用人脐带脐静脉、动物大动脉等，用灌流消化法获取细胞最为简便。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液PBS仪器、耗材注射器离心管培养基实验步骤1. 取产后的新鲜脐
脐静脉内皮细胞培养方法1
一、试剂和缓冲液配制1、胎牛血清（氯化十六烷基吡啶）（1）解冻胎牛血清（2）在56℃加热30分钟（脱补体作用，盖上瓶）（3）取25ml上述液体放在无菌的50ml的falcon里分馏（4）在-20℃冰冻馏份2、磷酸盐缓冲液（PBS）（1）无钙镁离子的100ML的PBS（10×）（生命技术）（2）900
脐静脉内皮细胞培养方法2
（2）术前准备取一根脐带（离体3个小时内，平均1小时，剪去夹伤部位）2个50ML注射器，1个30ML注射器和1个10ML注射器1个止血钳，2根插管，14号线2CM长，消毒巾，消毒手术刀和无菌手套手术区域准备：一块床单和无菌手套封套3 脐带手术操作和培养（1）用手术刀整齐切断脐带两端（2）静脉（口径最
分离和培养人角膜内皮细胞实验—角膜内皮细胞常规培养
实验材料 角膜内皮细胞 试剂、试剂盒 CECM胰蛋白酶 EDTA 仪器、耗材 6孔板 实验步骤 (a)将细胞接种于包被有FNC的6孔板中。 (b)每3天换液一次。 (c)当细胞90%汇合时用胰蛋白酶消化传代。
正常人脐静脉内皮细胞的培养
正常人脐静脉内皮细胞的培养 实验材料： 1. 婴儿脐带； 2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 培养用液：M199培养液（含20%小牛血清）；0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA（1:
正常人脐静脉内皮细胞的培养
实验材料：1. 婴儿脐带；2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2；3. 培养用液：M199培养液（含20%小牛血清）；0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA（1:1，V：V）混合消化液；D-Hanks液、100IU/ml青霉素和1
血管内皮细胞的分离和培养_分离牛主动脉内皮细胞
实验方法原理本方法是由 Bravery 等 [ 1995 ] 的方法改写的。实验材料HBSS PSGA新鲜猪主动脉胶原蛋白酶HFBS试剂、试剂盒PAEC生长培养液实验步骤1. 将铝箔铺在软木板上。2. 将主动脉（新鲜猪主动脉：如条件允许，需无菌取材。放入 HBSS/PSGA 中转运）放于 70 %