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柠檬酸柠檬酸钠缓冲液的配制方法

柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1M) PH 0.1M柠檬酸ml 0.1M柠檬酸钠ml PH 0.1M柠檬酸ml 0.1柠檬酸钠ml 3.0 18.6 1.4 5.0 8.2 11.8 ......阅读全文

免疫组化实验原理和步骤

  实验原理:   抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原

各种常见缓冲液的配制方法(在线计算)

磷酸盐缓冲液,Tris缓冲液和柠檬酸缓冲液等是生物学实验中常用的缓冲液,也是PeproTech重组细胞因子和蛋白溶解所需的常用缓冲液。然而,这些缓冲液的配制比较麻烦,尤其当要获得特定pH值的缓冲液时,调节pH值是费力、费时的事情。对于Tris等缓冲液等,pH计是无法准确测量其pH值的。那么,有没有简

免疫组化实验原理和步骤(五)

(6)结果判断免疫组化的结果判断有两种方法:一是对以检测结果阳性细胞指数来定性(如核抗原的标记),判断方法是以一个规野中阳性细胞数不总细胞癿百分比,再取10个相同视野算取平均指数。另一种方法以染色阳性强度和阳性检出率相结合而定,一般阳性细胞数在0-25为阴性,25-50为十,50-75为十十,75以

血凝抑制试验

1.适用范围本标准规定了禽流感的血凝试验、血凝抑制试验。本标准适用于禽流感抗体的检测(主要适用于血清样品)。 2  血凝试验2.1  材料与试剂2.1.1  器材:普通天平、分析天平、普通离心机、微型振荡器、注射器、冰箱、高压灭菌器、微量移液器及96孔V形血凝

IHC 实验操作步骤

            免疫组化方法(石蜡切片)*重要提示:参考抗体说明书选用合适的抗体稀释液和抗原修复处理方法。IHC 方法:抗原修复缓冲液/抗体稀释液A.     所需溶液和试剂1.

糖尿病动物模型原理及方法

STZ 诱发糖尿病动物模型原理如下:STZ对一定种属动物的胰岛β细胞有选择性破坏作用,能诱发许多动物产生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。国外有学者报道选用雄性大鼠制造模型的成模率明显高于雌性大鼠。1型糖尿病与2型糖尿病动物模型的制备与STZ注射的剂量有关系:大剂量注射时,由于直接引

免疫组化实验原理和步骤(一)

实验原理:抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部

糖尿病动物模型原理及方法

StzSTZ 诱发糖尿病动物模型原理如下:STZ对一定种属动物的胰岛β细胞有选择性破坏作用,能诱发许多动物产生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。国外有学者报道选用雄性大鼠制造模型的成模率明显高于雌性大鼠。1型糖尿病与2型糖尿病动物模型的制备与STZ注射的剂量有关系:大剂量注射时,由于

凝集素去除半抗原糖

  蛋白质糖基化的检测实验  实验方法原理  用酶或化学脱糖基化、通过选择性标记或通过凝集素亲和层析法是检测蛋白糖基化常用方法。  实验材料  蛋白样品  试剂、试剂盒  磷酸钠缓冲液 蛋白溶液 β-巯基乙醇 NP-40 溶液  仪器、耗材  SDS-PAGE 玻璃器皿 植物凝集素柱  实验步骤  

蛋白质糖基化位点检测实验步骤

  用酶或化学脱糖基化、通过选择性标记或通过凝集素亲和层析法是检测蛋白糖基化常用方法。 一、用 PNGaseF(N-多糖酶)处理。  1. 以 0.1 mol/L 磷酸钠(或 Tris-HCl,而不用柠檬酸)缓冲液,pH 7.4 ( 7.0~8.0 ) 配制高达 2 mg/ml 的蛋白溶液,并含 5

蛋白质糖基化的检测实验——酶脱糖基化

实验方法原理用酶或化学脱糖基化、通过选择性标记或通过凝集素亲和层析法是检测蛋白糖基化常用方法。实验材料蛋白样品试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液蛋白溶液β-巯基乙醇NP-40 溶液仪器、耗材SDS-PAGE玻璃器皿植物凝集素柱实验步骤一、用 PNGaseF(N-多糖酶)处理1. 以 0.1 mol/L 磷酸钠

蛋白质糖基化的检测

试剂、试剂盒 磷酸钠缓冲液蛋白溶液β-巯基乙醇NP-40 溶液仪器、耗材 SDS-PAGE实验步骤 一、用 PNGaseF(N-多糖酶)处理1. 以 0.1 mol/L 磷酸钠(或 Tris-HCl,而不用柠檬酸)缓冲液,pH 7.4 ( 7.0~8.0 ) 配制高达 2 mg/ml 的蛋白溶液,并

酸水解—全自动氨基酸分析仪测定蜂蜜中17种氨基酸

  蜂蜜是蜜蜂采集花蜜酿制的,而花是植物的生殖器官,植物的精华大部分聚集于此,蜜蜂采集植物的“精华”,含有多种分解酶的唾液与其融合酿造而成的,是大自然奉献给人类的天然保健食品,味道甜蜜且营养丰富。蜂蜜主要成分除葡萄糖和果糖外,还富含人体必需的多种氨基酸营养成分[1]。不同产地、不同花种蜂蜜主要成分基

原子吸收分光光度法测定食品中的镉(法2)

(双硫腙-乙酸丁酯法)5 原理样品经处理后,在pH6左右的溶液中, 镉离子与双硫腙形成络合物, 并经乙酸丁酯萃取分离, 导入原子吸收仪中, 原子化以后, 吸收228.8nm共振线, 其吸收量与镉量成正比,与标准系列比较定量。6 试剂要求使用去离子水, 优级纯或高级纯试剂。6.1 混合酸: 同2.4。

免疫组化实验

实验方法原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水

免疫组化

免疫组织化学又称免疫细胞化学,可以用于:(1)显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应;(2)是对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。实验方法原理带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的

动物染色体标本的制备与观察

实验原理凡细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂的任何动物组织,均可用于染色体分析。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。本方法简便、可靠,不

如何制作动物染色体标本

 细胞处于活跃的增值状态或者通过人工的各种处理后,细胞进入分裂的动物组织科用于染色体的分析。由于在正常的动物骨髓内,细胞是处于不断分裂的,给其注射一定的秋水仙碱可以让许多细胞处于分裂的细胞停在细胞分裂中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。 &nb

细胞组分的分析方法——核酸序列的原位杂交

一.基本原理  核酸分子杂交技术是目前分子生生物学、细胞生物学和生物化学研究中应用最广泛的技术之一,是定性、定量和定位检测两条来源不同的聚核苷酸链上碱基顺序同源性的一种手段。DNA分子是高度有序的双键分子。一条链的碱基与另一条链的碱基以氢键配对相连.形成腺嘌呤与胸腺嘧啶(A.T),鸟嘌呤与胞嘧啶(G

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

纯化DNA实验

从哺乳动物细胞或组织分离DNA 基因组DNA的快速纯化 纯化质粒(碱裂解法)             实验材料

纯化DNA实验

从哺乳动物细胞或组织分离DNA 基因组DNA的快速纯化 纯化质粒(碱裂解法)             实验材料

纯化DNA实验_从哺乳动物细胞或组织分离DNA

基因纯化,可以用于(1)对大量提取的质粒DNA进行纯化;(2)常用的方法有柱层析法和氯化铯梯度离心法。实验材料细胞试剂、试剂盒TBS抽提缓冲液仪器、耗材离心管实验步骤1. 根据样品类型,从下列方法中选一个作为步骤 1 进行操作。(1) 细胞样品① 单层培养的细胞以用冰预冷的 TBS 将单层细胞洗涤

常用溶液的配制

一、常规溶液 (一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution,PBS) 甲液:1/15mol/L Na2 HPO4 溶液 Na2 HPO4                

常用溶液的配制

一、常规溶液(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution,PBS)甲液:1/15mol/L Na2HPO4溶液Na2HPO4          &nb

石蜡切片的酶免疫组化注意事项

一. 石蜡切片在染色过程中出现脱片现象?一般来说,如果用多聚赖氨酸包被过的片子做正常免疫组织化学染色的话是不会掉片子的。但如果要做抗原修复的话,如果片子处理不好的话是有可能掉片子的。你可以试试一下的方法:1.一般用APES:丙酮=1:50的处理液来处理片子,处理5min左右,然后水洗,烘干既可用于贴

细胞组分的分析方法-2

4.rDNA片段的制备 (1)对所得重组质粒DNA进行SacⅠ酶切,反应体系如下:SacⅠ 4μl(约20单位),质粒DNA 50μl(20μg),10×缓冲液(0.5mol/L Tris-HCl,pH7.5,50mmol/L MgCl2)10μl,灭菌重蒸水36μl。 (2)将反应后

细胞组分的分析方法

实验概要本文介绍了细胞组分分析方法的原理及操作流程等。实验原理核酸分子杂交技术是目前分子生生物学、细胞生物学和生物化学研究中应用最广泛的技术之一,是定性、定量和定位检测两条来源不同的聚核苷酸链上碱基顺序同源性的一种手段。DNA分子是高度有序的双键分子。一条链的碱基与另一条链的碱基以氢键配对相连.形成

Southern blot对动物细胞基因组DNA中小卫星多态性的检测

实验概要本实验介绍了动物细胞基因组DNA中小卫星多态性Southern blot检测的原理和操作步骤。掌握核酸杂交检测技术(Southern blotting技术)、核酸探针的标记技术、小卫星DNA多态性检测分析技术(DNA 指纹图谱技术)和化学发光检测技术。实验原理Southern印迹杂交技术包括