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乙醇脱氢酶的测定

实验方法原理 ADH 反应:乙醛 + NADPH + H+ ⇌ 乙醇 + NAD+此反应是可逆的,并且可以从两个位点检测出来,平衡常数是 8×1012 mol/L。乙醇的生成是人们希望看到的,由此可以更为简单地检测这个方向的反应进程。但是也有极为不利的因素,即乙醛的毒性以及此反应速度过快。实验材料 乙醇脱氢酶试剂、试剂盒 磷酸钾BSA 溶液NADH乙醛仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 的实验混合物0.02 ml ADH(0.02 IU)25 ℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低。为了方便量化,经常使用 NADH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。收起 注意事项 其他 试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.50.1 g BSA 溶于 100 ml 0.1 mol/L 磷酸钾溶液中,pH 7.5(BSA 溶液)0.01 mol/L NADH(71......阅读全文

人 乙醇脱氢酶 (ADH )elisa试剂盒标本要求

  人 乙醇脱氢酶 (ADH ) 酶联免疫 分析   本试剂盒仅供研究使用。   96T   使用目的 :   本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中乙醇脱氢酶(ADH)表达。   实验原理   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人乙醇脱氢酶(ADH)表达。用纯化的人乙醇脱氢  

乙醇脱氢酶活性测定对各类肝细胞损伤的诊断价值研究

    肝脏是人体内最重要的消化器官之一,同时人体摄入的绝大多数物质都要通过肝脏代谢.保证肝脏的正常工作和对肝 脏疾病的早期诊断及治疗需要对肝脏的功能进行实时监测.血清中常用来反映肝细胞损伤以及判断损伤程度的酶有丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)、乳酸脱

ELISA技术综述

  ELISA原理   ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性,对标本进行检测;由于结合与固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性,因此设计 其结合 机制後,配合酵素显色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同,ELI

活性微生物乙醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒使用说明

活性微生物乙醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物

ELISA技术综述(六)

其他内容:酶联免疫测定技术的多酶级联放大系统: 一、AP底物放大系统substrate ampiification systemAP可催化底物NADP+脱磷酸而生成NAD+(辅酶1),以乙醇作还原剂,在醇脱氧酶催比下,乙醇脱氢,NAD+还原为NADH,NADH在黄递酶的催 化下脱氢

酶联免疫测定技术的多酶级联放大系统

一、AP底物放大系统(sutrate ampiification system)AP可催化底物NADP+脱磷酸而生成NAD+(辅酶1),以乙醇作还原剂,在醇脱氧酶催比下,乙醇脱氢,NAD+还原为NADH,NADH在黄递酶的催化下脱氢,同时四唑盐(tetrazoliim)被还原成有色的甲蜡(fo

大规模基因组分析揭示酒量高低的根本原因

  酒,是人类文明的产物,酒文化伴随着整个人类文明的发展而不断壮大。位于河南的贾湖遗址曾出土多个陶罐,残留物检测表明这些陶罐曾装过用大米、蜂蜜和水果制成的酒,贾湖遗址处于石器时代早期(约公元前7000—前5600年),也就是说8000年前我国人民就开始酿酒了。  何以解忧?唯有杜康。  人生得意须尽

乙醇脱氢酶的测定实验——还原反应测定

根据酶的来源,有许多种的乙醇脱氢酶(ADH),通常使用的酶是由酵母或马的肝脏中提取出来的。它们的结构和专一性都截然不同。酵母的 ADH 展现出醇的高活性,它是一个相同四聚体的酶,相对分子质量约为 148 000。哺乳动物的乙醇脱氢酶是一个 Mr=79000 的二聚体,并且比较偏好较高浓度的乙醇。该酶

常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——检测

实验方法原理常规聚丙烯酰胺凝胶电泳后的检测,对于不同的目的,应采用不同的检测方法。由于这种电泳方法不破坏蛋白质的生物活性,所以可选用的检测方法很多。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、早期染色方法用染料和生物大

大鼠乙醇脱氢酶1(ADH1)ELISA试剂盒

大鼠乙醇脱氢酶1(ADH1)ELISA试剂盒说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被乙醇脱氢酶1(ADH1)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用

植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验

实验材料黄化苗                                         &n

植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验

实验材料黄化苗试剂、试剂盒匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材分光光度计实验步骤在选好植物材料和匀浆缓冲液后,接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等(见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方法,或者

植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验(二)

3.5 纯度鉴定可以通过各种细胞器标志性酶的活性来确定线粒体的污染程度。过氧化物酶体可以鉴定过氧化氢酶、羟基丙酮酸还原酶或者乙二醇氧化酶的活性;叶绿体可以用叶绿素含量,白色体可以用类胡萝卜素的含量或碱性焦磷酸酶的活性;乙二醛循环体可以用异柠檬酸裂解酶的活性;内质网可以用对抗霉素 A 不敏感的细胞

葡萄根部低氧和缺氧忍耐对代谢活性和K+流速的影响

植物通常要提高在低氧环境中对氧气的忍耐能力以应对氧气不足的情况。低氧前处理(HPT)可以提高植物的糖酵解能力、更高的ATP水平和能量交换。离子转运   ATPase是主要的ATP的消耗过程,这个过程是细胞为下调ATP的需求和对氧气短缺的反应,影响细胞代谢和整个植物的营养状况。然而,在低氧前

临床常用血清酶同工酶及其亚型分析(2)

二、γ-谷氨酰转移酶及其同工酶(一)生物化学特征g-谷氨酰转移酶(γ-GT或GGT)又称γ-谷氨酰转肽酶(γ-GTP或GGTP),是一种含巯基的线粒体酶。组织分布以肾脏含量最多,其次为胰、肺、肝等。血清中的γ-GT则主要来自肝胆,红细胞中几乎无γ-GT,因此溶血对其测定影响不大。(二)测定方法目前国

生物传感器及其应用(二)

2  研究现状及主要应用领域 2.1  食品工业         生物传感器在食品分析中的应用包括食品成分、食品添加剂、有害毒物及食品鲜度等的测定分析。   &

青岛能源所合作开发出新型木糖脱氢酶细菌表面展示系统

  木糖是纤维素经酶水解或化学水解的主要戊糖,可作为糖尿病、肥胖病等富贵病病人的良好食疗添加剂和食品的无热量甜味剂。开发快速、灵敏、选择性高的木糖检测手段对于监控开发纤维素乙醇等第二代生物燃料的生物过程,发展医药、营养品和食品技术等都具有重要意义。   近日,中国科学院青岛生物能源与过程研究所“百

心肌酶谱和肌钙蛋白I联合检测对诊断急性心肌梗死

[摘要] 目的:探讨心肌酶谱和肌钙蛋白I联合检测在急性心肌梗死早期诊断的临床应用价值。方法:对2009年1月~2010年1月本院就诊的205例就诊的急性胸痛患者同时联合检测心肌酶谱(AST、LDH、CK、CK-MB、HBDH、Mg2 )和肌钙蛋白I(cTnI),比较其检测结果对于诊断急性心肌梗死的特

多维气相色谱法检测酒中甲醇的方法

甲醇是一种挥发性有机物,很容易通过饮食、呼吸和皮肤接触被生物体吸收。甲醇在人体内可以被乙醇脱氢酶代谢成甲醛,还可能被醛脱氢酶转化为甲酸,从而造成代谢性酸中毒。甲醇可以造成恶心、呕吐、眩晕、头疼、呼吸困难、腹部疼痛和视物模糊,严重的可能导致死亡。      甲醇

着床前小鼠胚胎线粒体功能障碍胚胎与胎盘发育的影响

实验概要本研究利用线粒体功能高度被抑制的体外胚胎模型,直接研究线粒体功能损伤对着床前后胚胎以及胎盘发育的影响。实验步骤1. 胚胎培养基用含4mg/ml BSA的MOPS-G1工作液收集受精卵。胚胎培养液分对照组培养液与试验组培养液(G1.2/G2.2,注:G1.2为对照组培养液;G2.2为试验组

蛋白质提取与制备(Protein Extraction and Preparation)-3

水溶液提取:大部分蛋白质均溶于水、稀盐、稀碱或稀酸溶液中。因此蛋白质的提取一般以水为主。稀盐溶液和缓冲溶液对蛋白质稳定性好、溶度大,也是提取蛋白质的最常用溶剂。盐溶液提取:以盐溶液及缓冲液提取蛋白质进常注意下面几个因素。盐浓度等渗盐溶液尤以0.02~0.05mol/L 磷酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液常用

淋巴细胞转化试验(MTT)

(一)原理:四甲基偶氯唑盐(MTT)可作为线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成紫兰色的甲臢,将结晶的甲臢溶解释放后,可根据所测的OD值反映活细胞的数量和活性,从而推知待测样品的水平。 (二)材料: MTT、电子天平、PBS液、二甲基亚砜、

淋巴细胞转化试验(MTT)原理=材料和方法

(一)原理:四甲基偶氯唑盐(MTT)可作为线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成紫兰色的甲臢,将结晶的甲臢溶解释放后,可根据所测的OD值反映活细胞的数量和活性,从而推知待测样品的水平。(二)材料:MTT、电子天平、PBS液、二甲基亚砜、无菌针头过滤

乙醇脱氢酶的测定实验

还原反应测定 氧化反应测定             实验方法原理 ADH 反应:乙醛 + NADPH + H+

细胞诱导型一氧化氮合成酶活性比色法定量检测试剂盒...

细胞诱导型一氧化氮合成酶活性比色法定量检测试剂盒使用说明主要用途YIJI细胞诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过诱导型一氧化氮合成酶、硝酸还原酶和乳酸脱氢酶反应系统,在诱导型一氧化氮合成酶特异性抑制剂存在与否的情况下,由底物L-精氨酸

工业微生物产生菌的分离筛选(三)

经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡.富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种.例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢杆菌,有的不产芽孢,有的生产能力强,有的生产

工业微生物产生菌的分离筛选(三)

经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡.富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种.例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢杆菌,有的不产芽孢,有的生产能力强,有的生产

工业微生物产生菌的分离筛选(3)

第三节   微生物的分离经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡。富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种。例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢

工业微生物产生菌的分离筛选(3)

第三节   微生物的分离经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡。富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种。例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢

关于分析试验中中生物大分子离心分离实验分享

  仪器设备网导读:生物大分子离心分离实验以它的部分优势存在着:分别范围广,容量大;可以研讨自然生物大分子的流体动力学特性;可以在电离介质中中止生物大分子的片段分别;对缓冲剂限制很小(在电泳技术中由于电流的热效应而限制了缓冲剂的运用)等等。另外在各种实验方法的前处置阶段,离心法还是被普遍的运用着。