细菌转化
实验概要本实验介绍了细菌转化的两种方法：电击法和热击法。主要试剂LB培养基主要设备电击杯，电击仪，1.5 mL的离心管，摇床，恒温水浴锅实验材料DNA样品或者连接产物，细菌感受态细胞实验步骤1. 电击转化 1) 加DNA样品或者连接产物于融化的细菌感受态细胞中，混匀后加入冰预冷的电击杯中。 2) 将电击杯放入电击仪中，以2.2KV电压电击。 3) 立即加入适量的液体培养基，混匀后并转移至1.5 mL的离心管中，37℃ 培养1小时(大肠杆菌)或者28℃ 培养2-3小时(农杆菌和假单胞杆菌)。 4) 取适量菌液涂在相应的选择平板上，37℃ 培养过夜(大肠杆菌)或28℃ 培养2天(农杆菌和假单胞杆菌)。 5) 筛选阳性转化子。2. 热激转化 ......阅读全文
细菌转化
实验概要本实验介绍了细菌转化的两种方法：电击法和热击法。主要试剂LB培养基主要设备电击杯，电击仪，1.5 mL的离心管，摇床，恒温水浴锅实验材料DNA样品或者连接产物，细菌感受态细胞实验步骤1. 电击转化 1) 加DNA样品或者连接产物于融化的细菌感受态细胞中，混匀后加入冰预冷的电击杯中。
细菌的转化的转化效率
同一种细菌也可以由于基因型的改变而改变转化效率。细菌的限制性核酸内切酶能够分解外来的DNA，所以如果用限制酶失活的突变型菌株作为转化受体时可以提高转化效率。通过筛选也可以得到转化效率显著下降的突变型，包括吸附能力、吸收能力和整合能力下降的突变型。某些转化效率降低的突变型对于紫外线格外敏感，这一性质也
细菌转化的发展
例如，把肺炎双球菌RⅡ型无毒株和加热至60℃被杀死的SⅢ型有毒株，混合注射至小鼠体内，结果在小鼠体内出现了生活的SⅢ型有毒株，使小鼠患病死亡。并且这种具荚膜的有毒株能世代相传保持其特性。细菌转化现象最初由英国细菌学家格里菲斯（F．Griffith）于1928年发现，直至1944年美国科学家埃弗里
细菌转化的简介
细菌转化是指某一受体细菌通过直接吸收来自另一供体细菌的含有特定基因的脱氧核糖核酸（DNA）片段，从而获得了供体细菌的相应遗传性状，这种现象称为细菌转化。细菌转化是细菌的融合的一种形态，亦即某一菌株（供体菌）的一部分遗传性状移到另一菌株（变体菌）的一种遗传杂交形态。转化是指外源DNA，即从供体菌抽
革兰氏阳性细菌的转化
一、革兰氏阳性细菌，转化过程的几个阶段： 1.细菌感受态的形成 由于分泌一种称为感受态因子的小蛋白而导致细菌感受态的形成。 2.转化因子的吸收双链DNA片段与感受态受体菌的细胞表面特定位点结合，并激活临近的核酸酶。DNA双链中的一条单链逐步降解，同时另一条单链逐步进入细胞 3.整合复合物前体的形成
革兰氏阳性细菌的转化
一、革兰氏阳性细菌，转化过程的几个阶段： 1.细菌感受态的形成 由于分泌一种称为感受态因子的小蛋白而导致细菌感受态的形成。 2.转化因子的吸收 双链DNA片段与感受态受体菌的细胞表面特定位点结合，并激活临近的核酸酶。DNA双链中的一条单链逐步降解，同时另一条单链逐步进入细胞。 3.整合复合物前体的
细菌的转化与平板筛选
[实验原理]感受态是指细菌处于容易吸收外源DNA的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导人细菌的过程。其原理是细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经42℃短时间热击处理，促进细胞吸收DNA复合物。将细
细菌的转化的影响因素
许多因素可以影响转化效率。受体细菌和供体细菌的亲缘关系愈远则转化效率愈低，这主要是受吸附位点专一性和染色体的同源程度的影响。DNA分子的联会是供体DNA整合到受体DNA上的先决条件，联会一般只发生在同源染色体之间，而亲缘关系愈远则同源性愈低，所以转化效率也愈低。但细菌间染色体的某些部位如核糖体基因部
细菌的转化与平板筛选
实验概要本实验介绍了细菌的转化与平板筛选的原理及操作步骤。实验原理 感受态是指细菌处于容易吸收外源DNA的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导人细菌的过程。其原理是细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面
研域细菌转化的操作步骤
细菌转化操作步骤 （1）事先将恒温水浴的温度调到42℃。 （2）从-70℃ 超低温冰柜中取出一管（100μl）感受态菌，立即用手指加温融化后插入冰上，冰浴5~10min。 （3） 加入5μl连接好的质粒混合液（DNA含量不超过100ng），轻轻震荡后放置冰上20min。
细菌转化（bacterial－transformation）原理和操作
1．目的学会质粒DNA转化感受态受体菌的技术。2．原理质粒DNA粘附在细菌细胞表面，经过42°C短时间的热击处理，促进吸收DNA。然后在非选择培养基中培养一代，待质粒上所带的抗菌素基因表达，就可以在含抗菌素的培养基中生长。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微
质粒DNA导入细菌细胞实验——电转化法
实验方法原理高压电转化简单，快捷可靠，而且是目前效率最高的质粒DNA转化大肠杆菌方法。不过该方法需要电转化装置。实验材料菌落试剂、试剂盒LB甘油SOC仪器、耗材平板离心瓶聚丙烯管电阻器电转化池实验步骤1. 接种一个单菌落于5 ml LB培养液，37°C温和振摇培养5 h或过夜。2. 将2.5 m
感受态细菌转化时需要多大的质粒浓度
100-500ng/uL。质粒转化不少于10的5次方，连接产物不少于10的6次方。两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的，比如构建腺病毒载体时。但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞，转化效率非常低，一般需要电转或者其他的特殊处理。增加收菌次数，相对提高了质粒的量，这样的话裂解液的量可以适当增加；裂
麻风病细菌可将成熟细胞转化为干细胞
据《自然》网站1月18日(北京时间)报道，英国爱丁堡大学科学家在研究麻风分支杆菌(Mycobacterium leprae)在体内的传播时，无意中发现这种麻风细菌能对细胞进行重编程，使之逆转成类似干细胞的状态，再次发育变成不同类型的细胞。研究人员指出，虽然麻风细菌“绑架”细胞的机制尚不清
转化后细菌菌落的快速裂解及质粒大小的检查
一般情况下，可以根据质粒的大小来确定它是否带有插入片段。以下方法足以产生在琼脂糖凝胶的单个泳道上加样所需的DNA量。操作方法如下：1. 使转化得到的细菌在含有氨卞青霉素的琼脂培养基(LB)上生长至菌落直径达1mm左右。2. 用灭菌的牙签挑取单菌落的一小部分，在含氨卞青霉素的LB琼脂平板上划线。至少挑
提高自制酵母细菌电转化效率最重要的两点
一:生长期重要性无庸置疑,比如外源DNA基因组整合时,酵母通常选取OD600值为1-2左右.这是因为其时酵母分裂旺盛,细胞核膜较易被攻入(处于有丝分裂的前几期);同理,基因组DNA松散暴露,电转入的外源DNA较易整合; 细胞生命力也较强. 多种因素组合,使得转化率得以提高.二:将你的细胞洗干净些很多
怎样用一个实验区分细菌的转化和转导
转化：是DNA和受体菌进行转化转导：是缺陷噬菌体和受体菌进行DNA的重组。Transformation 中文翻译为 “转化”Certain prokaryotes are able to take up free DNA released by other bacteria. This proces
质粒DNA导入细菌细胞实验——CaCl2转化法
实验材料菌落质粒DNA试剂、试剂盒CaCl2仪器、耗材培养基平板实验步骤1. 接种一个单菌落于50 ml LB培养液中，于37°C中速摇床培养过夜（250 r/min)。2. 往一个2 L的烧瓶中加人400 ml LB培养液，再加入4 ml过夜培养液，于37°C摇床（250 r/min）培养至
乌克兰细菌拆弹技术可让爆炸物转化为有机肥
乌克兰科学家用细菌拆解炸弹 据新加坡《联合早报》10月17日报道，乌克兰研究员研发出一项使用细菌拆除炸弹的独特技术。研究员透露，只要把他们以秘密配方研发的细菌倾倒在炸弹上，细菌就能在15天至115天内把爆炸物质“转化为”一种有机肥料。 乌克兰塞瓦斯托波尔核能研究所生化实验室研究员
新研究称麻风病细菌可将成熟细胞转化为干细胞
据《自然》网站报道，英国爱丁堡大学科学家在研究麻风分支杆菌(Mycobacterium leprae)在体内的传播时，无意中发现这种麻风细菌能对细胞进行重编程，使之逆转成类似干细胞的状态，再次发育变成不同类型的细胞。研究人员指出，虽然麻风细菌“绑架”细胞的机制尚不清楚，但模仿这一机制有望带来
一种细菌可清除二恶烷污染－将其转化为无害物质
据物理学家组织网近日报道，美国赖斯大学的研究人员发现，一种细菌可清除二恶烷污染。相关论文发表在最新一期的美国化学学会期刊《环境科学与技术》上。 二恶烷也称二氧六环、1，4-二氧己环，是一种微毒无色液体，主要用作溶剂、乳化剂、去垢剂等，对皮肤、眼部和呼吸系统有刺激性，并且可能对肝、肾和神经系
拥有“人造树叶”不愁缺能源－细菌将太阳能转化为液体燃料
采集阳光是植物十亿多年前掌握的本领，利用太阳能，通过周围的空气和水进行光合作用养活自身。科学家还想出了如何利用太阳能发电，从光伏电池到后来用的燃料电池产生氢。但氢却一直没有被作为一种在世界范围内实用的汽车燃料，或用于液体燃料发电。 据物理学家组织网近日报道，美国哈佛大学艺术与科学学院、哈佛医学
美利用经遗传改造的细菌将生物质能直接转化为乙醇
美国佐治亚大学的一项研究发现，他们对能降解木质纤维素的细菌嗜热木聚糖酶进行遗传改造后，其直接将以柳枝稷为原料的生物质能转化成了乙醇燃料，发表在最新一期《美国国家科学院院刊》上的该研究未来有望实现工业化生产，生产出物美价廉的燃料。 在利用柳枝稷和巴茅根等非食物农作物生物质能制造具有成本效益的生物
酵母转化实验_乙酸锂转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸锂仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1. 在开始实验前2天，接种待转化的酵母菌株的单菌落于5 ml YPD培养基中，于30℃恒温摇床，培养过夜。 2. 转化的前一天晚上，往1 L 无菌烧瓶中加入300 ml YPAD培养基，然后
酵母转化实验_电穿孔转化
实验材料酵母试剂、试剂盒二硫苏糖醇山梨醇仪器、耗材电穿孔仪器电击池水浴锅实验步骤1. 实验前两天，将转化用酵母菌株的单菌落接种于5 ml YPD培养基中，30℃过夜培养至饱和。 2. 转化前一天晚上，在装有500 ml YPD培养基的2 L 无菌烧瓶中接种适量的过夜培养液，于30℃剧烈摇动培养过
质粒的转化及转化子的鉴定实验——电转化法
实验方法原理电转化法：外加于细胞膜上的电场造成细胞膜的不稳定，形成电穿孔，不仅有利于离子和水进入细菌细胞，也有利于孔DNA等大分子进入。同时DNA在电场中形成的极性对于它运输进细胞也是非常重要的。实验材料外源片段与载体的连接产物大肠杆菌感受态细胞试剂、试剂盒X-galAmpLA培养基水抗生素仪器、耗
酵母转化实验_原生质体转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD山梨醇CaCl2-MEPEG选择性再生琼脂仪器、耗材水浴锅离心机分光光度计培养箱实验步骤1. 在实验前2天，将转化用酵母菌株的单菌落接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养过夜（如果酵母菌株是温度敏感的应在低温下培养）。2. 转化前一天晚上，从5 ml 过夜培养
科学家制造基因录音机－将细菌转化为长期记忆存储设备
美国麻省理工学院的工程师们已经将大肠杆菌的基因组转化成为长期的记忆存储设备。他们设想这个稳定、可消除、易取回的记忆将适合一系列应用，例如用于环境和医学监测的传感器。“你可以存储长期信息，”麻省理工学院电子工程、计算机科学和生物工程副教授卢冠达(Timothy Lu)这样说道。“你可以想
DNA转化
DNA转化Chemical Transformation· Transformation of Competent Cells (RbCl2 Method) (Goldberg Lab)Very nice protocol for E. Coli transformation inc
质粒转化
[ 基本原理 ] 将质粒 DNA 导入细菌的过程称为转化（ Transformation ）。此感受态细菌细胞在 CaCl 2 低渗溶液中膨胀为球状（感受态细菌的制备，见前）。质粒 DNA 与 CaCl 2 形成抗 DNase 羟基 - 磷酸钙复合物黏附于细菌表面，经 42℃ 短时间热冲