拟南芥转化

实验概要本实验以拟南芥为试材介绍了转化及筛选的过程。主要试剂1. 渗透培养基:(1L)1/2xMurashige-Skoog5%蔗糖0. 5克MES用KOH调至pH5. 7再加:10微升lmg/ml的6-BA母液200微升Silwet L-77Top agar0. 1%琼脂PNS或水溶液2. 筛选培养基平板1xMS salt,或1XPNSpH5.80. 8%琼脂卡那霉素30mg/l (Columbia,LanDsberg),Nossen需50mg/l3. 次氯酸钠溶液活性氯5. 2%原液用无菌水临时稀释7%使用实验步骤1. 植物生长 1) 建议在直径7厘米的培养杯里种5处,每处种几棵,萌发一周后,每处只留下一棵最好的苗。 2) 将萌发的植物培养至茎高约3厘米时,去除其顶生花序。注意要避免伤及腋生花序。去除顶生花序将刺激腋生花序的生长。转化必须在去除顶生花序4......阅读全文

拟南芥转化

实验概要本实验以拟南芥为试材介绍了转化及筛选的过程。主要试剂1. 渗透培养基:(1L)1/2xMurashige-Skoog5%蔗糖0. 5克MES用KOH调至pH5. 7再加:10微升lmg/ml的6-BA母液200微升Silwet L-77Top agar0. 1%琼脂PNS或水溶液2. 筛选培

拟南芥的转化

实验概要本实验采用花浸泡法利用农杆菌介导将目的基因转入拟南芥。主要试剂YEB液体培养基,LB培养基,0.1 M CaCl2,0.05 M MgSO4,花浸泡缓冲液(0.5XMS,5%蔗糖,0. 03%Silwet L-77 ),Rif,Kan主要设备摇床,离心机,培养钵,温室,托盘,塑料薄膜实验材料

拟南芥的培养

实验概要本实验方法就拟南芥的培养技术进行了简单介绍。主要试剂1. PNS营养液:每升含2.5m1 1M磷酸缓冲液(pH5.5)5ml 1M KN03,2m1 1M MgSO4.7H20,2m1 1M Ca(N03)a.4H20,2.5m1 20mM  Fe.EDTA,1 ml MS微量兀素。2. 人

农杆菌介导转化拟南芥

实验概要1. 学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理。2. 掌握农杆菌介导转化拟南芥 的实验方法,了解拟南芥的生理特点及在基因工程实验中应用实验原理拟南芥(Arabidopsis thaliana)是一种十字花科植物,二年生草本,高7~40厘米,花期3~5月。广泛用于植物遗传学、发育生物学和

拟南芥培养箱怎么培养拟南芥培呢?这套方法为你解惑

   拟南芥作为高等植物的模式生物被全世界的植物生物学实验室广泛研究。拟南芥培养箱可用于基因表达、器官发育、基因突变等研究。然而,怎么培养好这种小植物可能不是那么容易。    拟南芥培养箱培养拟南芥步骤:    1、首先把拟南芥种子放到滤纸上,用70%酒精进行消毒处理,再用无水酒精进行处理(也可

拟南芥转基因植株的鉴定

实验概要本实验介绍了拟南芥转基因植株的初步鉴定方法,包括:阳性苗的筛选,GUS基因表达分析,组织PCR和RT-PCR分析。主要试剂0.2%的Triton X-100,10%的次氯酸钠,含20 mg/L Hygromycin的MS培养基,X-Gluc,75%乙醇,0.25 N NaOH,0.25

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

实验材料叶组织                                                          试剂、试剂盒研磨悬浮缓冲液                                                          仪器、耗材烧杯      

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

            实验材料 叶组织 试剂、试剂盒 研磨悬浮缓冲液 仪器、耗材

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

实验材料叶组织试剂、试剂盒研磨悬浮缓冲液仪器、耗材烧杯Polytron 匀浆器实验步骤1. 组织匀浆(1) 收集 10 g 叶组织,放进一 400 ml 的烧杯中。(2) 加入 200 ml 冰冷的研磨悬浮缓冲液。在 4℃ 的房间中,用 Polytron 匀浆器进行 6~7 个 3 秒钟脉冲匀浆叶组

拟南芥微管结合蛋白CSI1

  3月16日,植物科学研究权威期刊Plant Cell在线发表了中科院上海生命科学研究院植生生态所植物分子遗传国家重点实验室薛红卫研究组的最新研究成果:拟南芥ARCP蛋白CSI1通过结合微管,维持微管稳定性并调控根和花药的发育。  微管是由α、β微管蛋白异二聚体通过非共价键形成的管

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

实验材料 叶组织试剂、试剂盒 研磨悬浮缓冲液仪器、耗材 烧杯Polytron 匀浆器实验步骤 1. 组织匀浆(1) 收集 10 g 叶组织,放进一 400 ml 的烧杯中。(2) 加入 200 ml 冰冷的研磨悬浮缓冲液。在 4℃ 的房间中,用 Polytron 匀浆器进行 6~7 个 3 秒钟脉冲

拟南芥基因组DNA的提取

实验概要本实验介绍了用CTAB法提取拟南芥基因组DNA。主要试剂CTAB提取液(2%CTAB,50mMEDTA,50mM Tris-HCl,PH 8.0,0.84M NaCI,0.05%巯基乙醇),氯仿,无水酒精,70%的酒精主要设备1.5 mL离心管,65℃水浴锅,高速离心机,研钵实验材料拟南芥叶

人工气候箱对拟南芥的培养

拟南芥是一种十字花科植物,广泛用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究,已成为一种典型的模式植物。对于这种典型植物,喆图带领大家分析一下,人工气候箱对拟南芥的培养。,要知道拟南芥生长过程中需要哪些条件?1、 温度  拟南芥生长室理想温度范围是16-25℃,佳生长温度为22-23℃。温度过高(高于

拟南芥种子休眠机制研究获进展

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/4/498538.shtm 种子休眠是指完整有活力的种子在适宜环境条件下仍不能萌发的生物学特性,受环境和遗传因素影响,是典型的多基因调控的复杂数量性状。目前已发现的种子休眠调控因子的作用机制中,基因转录调控

用ReadyMixTM-PCR-Reaction-Mix进行拟南芥SSLP

用ReadyMix TM PCR Reaction Mix 进行拟南芥SSLP (32 个样品+3 个对照)一、PCR采用SIGMA REDTaq® ReadyMixTM PCR Reaction Mix提供的 试剂 (包括20 mM Tris-HCl, pH 8.3, 100 mM KCl, 3

OsAGAP在拟南芥中的功能分析

实验概要本实验对水稻小G蛋白ArfGTPase激活蛋白OsA GAP在拟南芥中的功能进行了分析,首先构建了OsAGAP在拟南芥中的正义表达载体,利用农杆菌介导的真空抽滤法转化拟南芥,筛选拟南芥阳性苗,然后用组织PCR和 Southern杂交做了检测。实验材料1. 所用拟南芥((Arabidopsis

研究揭示拟南芥铁、锌平衡机制

铁、锌是植物生长发育所必需的微量营养元素,在植物的生命活动中起着重要的作用。铁、锌的缺乏或过多都会造成危害,影响植物的生长发育。因此,植物对铁、锌离子的吸收受到严密的调控。拟南芥的FIT蛋白是调控铁吸收的关键转录因子,它与bHLH038、bHLH039、bHLH100或bHLH101蛋白互作,形成异

拟南芥原生质体制备转化方法

实验概要本实验介绍了拟南芥原生质体制备转化操作流程。主要试剂1. 纤维素酶解液:试剂15ml酶液体系11-1.5﹪ Cellulase R10 (YaKult Honsha)0.225g干粉20.2-0.4﹪ Mecerozyme R10 (YaKult Honsha)0.045g干粉30.4M m

“RNA-甲基化”研究汇总——拟南芥篇

关于RNA甲基化修饰的研究成果在Nature,Science,Cell等高分期刊上频频亮相,并一次次刷新人们对生命科学的认知。拟南芥作为植物界中研究RNA甲基化修饰的先行者,许多学者将它作为研究对象,并与最新m6A、m5C RNA甲基化测序技术结合,证实到RNA甲基化广泛存在于拟南芥各个发育

拟南芥花粉管苯胺蓝染色

一、方法和试剂 母液 1.  冰醋酸 2.  乙醇 3.  1 M NaOH(氢氧化钠) 4.  100 ml 1 M K2HPO4(磷酸氢二钾) 5.  100 ml 1 M KH2PO4(磷酸二氢钾) 6.  苯胺蓝(Fisher) 7.  甘油 工作溶液 1.  冰醋酸含量为10%的乙醇溶液

拟南芥细胞培养原理及操作步骤

实验概要了解植物细胞悬浮培养的基本原理,通过实验掌握植物细胞悬浮培养的方法和技术。并通过实验练习和巩固无菌操作技术。实验原理植物细胞的悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养,在培养过程中能够保持良好的分散状态。植物离体培养可产生愈伤组织。将疏松型的愈伤组织县浮在液体培养基中并

农杆菌侵染拟南芥花序的转化方法

制备转化用的农杆菌菌液准备:1.灭菌 试管 400毫升细长烧杯2瓶,离心瓶4-6个(250ml)。2.试剂:YEP 1200ml(每瓶300ml 共4瓶)+Kan 1;1000,Rif1:500。   1/2MS+2%蔗糖(灭菌115度20分钟),Silwet在-20℃贮存。3.步骤:共转化农杆菌:

拟南芥转基因植株PCs含量的测定

实验概要本实验测定了转基因拟南芥总谷胱甘肽(GSH)含量、非蛋白巯基(NPT)含量。主要试剂200 uM CdSO4,5% sulfosalicylic acid(含6. 3 mM diethylenetriaminepentaacetic acid ),Co-enzyme working

拟南芥叶绿体蛋白质组学分析实验

试剂、试剂盒HEPES-KOH                                                                  山梨醇                                                                  

科学家为模式植物拟南芥绘制“蓝图”

  任何生物体的每个细胞都包含完整的遗传信息,或者说是一个生物的“蓝图”,编码所谓的DNA核苷酸构建块序列。但是植物是如何创造出各种各样的组织的呢?比如将光能转化成化学能并产生氧气的叶子,或者从土壤中吸收养分的根?答案就在各自组织细胞的蛋白质模式。科学家为模式植物拟南芥绘制“蓝图”。图片来源:Cha

转基因拟南芥研究能提高作物生长速度

  加拿大圭尔夫大学研究人员发现,在一种叫做拟南芥(Arabidopsis)的小花植物中插入一种特殊的玉米酶,会使其生长速度加倍,种子产量达到原来的4倍。   这一发现有望提高油菜籽、大豆等重要油料作物和生物燃料作物亚麻荠的产量,也会捕获更多大气二氧化碳,有可能给食用作物和生物燃料种植带来变革。  

《科学》:乙烯能调节拟南芥根部干细胞分化

乙烯是一种能够催熟果实的气态植物激素。在最新一期的《科学》杂志上,由瑞典、法国、英国的研究人员联合发表的文章报告说,他们发现乙烯还能够调节拟南芥根部的干细胞分化。 已经知道,多细胞生物的构建依赖于能兼顾自我更新和产生分化的子细胞的特殊细胞——干细胞。在这项新的研究中,研究人员证实对植物生长很重要的气

概述泛素缀合酶在拟南芥中的研究

  泛素缀合酶是由150-200个氨基酸组成,具有研究拟南芥中Ubc6的功能的物质。  在拟南芥中,大约有一半的E2s成员的生化特征被描述,并且有很大一部分的拟南芥E2s成员都可以在酵母细胞中找到相应的同源物。然而,在拟南芥中有三种E2s基因家族表达的蛋白并没有在芽殖酵母中找到同源物,但是却在哺乳动

拟南芥叶绿体蛋白质组学分析实验

试剂、试剂盒 HEPES-KOH山梨醇抗坏血酸维生素 C半胱氨酸PF-Percoll仪器、耗材 浓缩离心设备实验步骤 建议在短日照条件下培养材料以诱导营养生长,并在照光的早期收取材料以提高获得完整叶绿体的产率。所以试剂应在收集材料之前准备好,并连同其他一些设备,如离心机转头及离心管等在冰箱或冰上冷却

拟南芥突变体纯合植株的获得

实验概要本实验利用农杆菌转化侵染野生型拟南芥获得变体纯合植株。实验材料拟南芥(Arabidopsis thaliana, Col-0),培养条件,长日照为16h光照/8h黑暗,22oC;短日照为8h光照/16h黑暗,22oC。实验步骤1. 拟南芥基因组的小量提取    1) 取0.2 g拟南芥叶片,