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少突胶质细胞原代培养

少突胶质细胞来源于1-2 天的大鼠。断头后大鼠大脑收集到Ham’s F-12培养液中,移除脑膜和血管。皮质用机械匀浆进行匀浆然后将细胞悬液依次通过230μm和104μm尼龙网进行过滤。细胞通过1000rpm 7分钟离心进行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM进行重悬细胞。最后以2.0×105 cells/cm2浓度将细胞接种于培养皿中,将培养皿维持在37°C,5%CO2潮湿环境中。3天后更换培养基,以后每两天更换一次。9-11天后细胞能够铺满培养皿。少突胶质细胞祖代生长在星形胶质细胞层的上面然后运用旋转摇床以260rpm 18小时摇荡分离,通过30μm的尼龙网过滤,然后细胞悬液接种到含无血清培养基的培养皿中。培养基成分:DMEM-Ham‘s F-12混合物(1:1),10mM HEPES,0.1%牛血清蛋白,25μg/mL 人铁转蛋白,30nM三碘甲状腺氨酸,20nM氢化可的松,20nM黄体酮,10n......阅读全文

大鼠视神经少突胶质细胞培养实验

牛血清培养法             实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行

大鼠视神经少突胶质细胞培养实验

牛血清培养法             实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行

视神经少突胶质细胞体外培养纯化及鉴定

1.材料和方法 1.1 DMEM/F12条件培养液(亚硒酸钠40μg·L-1,腐胺16.2 mg·L-1,转铁蛋白100 mg·L-1,胰岛素234U·L-1,甲状腺素0.4μg·L-1,黄体酮0.62 mg·L-1,谷氨酰胺3g·L-1)。DMEM/F12培养基、小牛血清购自Hy

大鼠视神经少突胶质细胞培养

实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。实验材料 Wistar大鼠试剂、试剂盒 亚硒酸钠腐胺转铁蛋白胰岛素甲状腺素黄体酮谷氨酰胺小牛血清兔抗鼠GC抗体仪器、耗材 眼科剪滴管离心机培养皿 CO2培养箱实验步骤 一、实验步骤1.  

大鼠视神经少突胶质细胞培养实验——牛血清培养法

大鼠视神经少突胶质细胞培养可以:(1)获得大鼠视神经少突胶质细胞;(2)用于视神经损伤修复研究;(3)用于少突胶质细胞相关课题研究。实验方法原理采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。实验材料Wistar大鼠试剂、试剂盒亚硒酸钠腐胺转铁蛋白胰岛素甲状腺

细胞技术专题:大鼠视神经少突胶质细胞培养实验(二)

2. 免疫组织化学染色结果培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色 GC 蛋白阳性,未加一抗的呈阴性。染色结果显示成熟的少突胶质细胞突起丰富,互相形成蜘蛛网状(图 3)。苏木素复染,异质细胞较少,90%以上为阳性细胞(图 4)。  Figure 1 Cells migrated from

振荡摇床法纯化培养少突胶质细胞实验

基本方案             实验方法原理 利用少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞生长存存时间上的差异,以及细胞生

振荡摇床法纯化培养少突胶质细胞实验

实验方法原理利用少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞生长存存时间上的差异,以及细胞生长方式、细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的混合胶质细胞中分离少突胶质前休细胞,然后再利用差速贴壁的原理用塑料培养皿或培养瓶除去纯化后污染的星形胶质细胞以获得高纯度的少突胶质细胞,并在体外诱导分化

Th17细胞在中枢炎症及神经元损伤中的作用

  众多中枢神经系统疾病,无论是急性还是慢性疾病,亦或是自身免疫性疾病,都与中枢炎症密切相关。小胶质细胞的激活、免疫细胞的浸润、炎性因子的产生都表明了脑组织内炎症反应的发生,其中胶质细胞的功能异常和神经元损伤是中枢炎症的重要病理改变。辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)及其

皮层星形胶质细胞的原代培养实验——贴附差异法

皮层星形胶质细胞的原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)皮层星形胶质细胞功能研究。实验方法原理利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的皮层来源的混合胶质细胞中去除少突胶质细胞和小胶质细胞,其中星形胶质细胞的

免疫系统对神经内分泌系统的调控(二)

  二、细胞因子对神经内分泌系统的影响  细胞因子作为免疫递质可影响神经内分泌的各项机能,其作用的生物学基础有以下几方面:(1)循环血中可检测到IL-1、IL-6、TNF、IL-2等细胞因子,且在一定条件下浓度有较大波动;(2)神经细胞及神经内分泌细胞可稳定或受诱导而合成IL-1、IIL-

皮层星形胶质细胞的原代培养实验

贴附差异法             实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长

皮层星形胶质细胞的原代培养实验

贴附差异法             实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长

皮层星形胶质细胞的原代培养

实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的皮层来源的混合胶质细胞中去除少突胶质细胞和小胶质细胞,其中星形胶质细胞的贴附力最强。用这种方法获得的星形胶质细胞纯度很高(95%以上),且细胞具有较好的增

神经细胞与外泌体研究进展

  胶质细胞与外泌体  胶质细胞占CNS细胞的90%,主要包括小胶质细胞、星形胶质细胞以及少突胶质细胞。小胶质细胞是存在于CNS的巨噬细胞,占CNS细胞总数的10%。在生理状态下,小胶质细胞主要起到免疫监视作用。脑缺血后,小胶质细胞分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α

小胶质细胞原代培养

实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料 新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋

小胶质细胞原代培养实验

基本方案             实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震

免疫系统对神经内分泌系统的调控(四)

  四、免疫功能在神经及内分泌组织中的体现  (一)中枢神经系统(CNS)  1.脑是免疫效应器官 既往认为脑是免疫特许器官,表现为:①脑内移植物存活时间长、存活率较高,且免疫排斥反应较弱;②中枢神经系统损伤后,较少出现中笥粒细胞浸润;③存在血脑屏障及血脑疹液屏障;④脑内无明显的淋巴引流,

小胶质细胞原代培养实验

实验方法原理利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+

《干细胞》:大脑干细胞移植新发现

在新一期的《Stem Cell》杂志上,来自瑞典哥德堡大学健康科学研究院(The Sahlgrenska Academy)大脑修复与复原中心的研究人员发现,如果一种叫做星型胶质细胞的脑细胞不被激活,那么植入鼠脑的干细胞就能够产生更多、更成熟的神经细胞。这一重要发现是干细胞研究领域的一项重大进步。

免疫细胞化学在神经科学中的应用-2

七、个体和种族发育的研究  神经系统是一个历史发展的产物,有种族发育和个体发育的历史。在种系发生方面,有不同的发育规律,如一些神经肽自腔肠动物已经发生,而VIP自鱼类才开始发生。免疫反应的强弱和神经肽的含量亦因种属不同而异,如笔者对输精管的神经支配的研究表明,在大鼠、豚鼠和猫等动物,输精管管壁内有丰

胶质瘤干细胞培养

胶质瘤是颅内最常见的肿瘤,病因不清。切除后容易复发,放射治疗和化疗效果不理想。近年来从成年的脑组织中可以培养出神经干细胞,传统的观点认为,胶质瘤中只含有胶质细胞,没有神经元。近期的研究证明,胶质瘤在体外分化为神经元和星形胶质细胞,证明了胶质瘤中存在干细胞的可能性。这种细胞能够同时表达神经元和星形胶质

神经胶质细胞培养实验_酶消化法

神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神

神经胶质细胞培养实验_酶消化法

神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神

细胞常见问题解答

  1.原代细胞与细胞系有什么区别?   细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells.

细胞培养培养基

  绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如

嗅鞘细胞的原代培养实验

实验方法原理 嗅鞘细胞是在功能上介于施万细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊胶质细胞,是决定嗅神经元轴突终生再生的关键因素。它具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘等作用,为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移特性,已成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。基于其与成纤维细胞贴壁能力的不同,目前我

神经胶质细胞培养实验

酶消化法 胰蛋白酶消化法             实验方法原理 胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,

科学家发现可用于治疗神经退行性疾病的新靶点

  在一项新的研究中,来自美国斯坦福大学的研究人员发现利用抗体阻断一种蛋白的活性能够改善衰老小鼠的认知行为。相关研究结果发表在2019年4月11日的Nature期刊上,论文标题为“CD22 blockade restores homeostatic microglial phagocytosis i

嗅鞘细胞的原代培养实验

基本方案实验方法原理嗅鞘细胞是在功能上介于施万细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊胶质细胞,是决定嗅神经元轴突终生再生的关键因素。它具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘等作用,为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移特性,已成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。基于其与成纤维细胞贴壁能力的不同,